폐흡충 감염시 숙주 말초혈액에는 많은 항체가 생성되므로 각종 면역학적 진단에 이용되 고 있다. 그러나 이들 항체가 폐흡충 충체 구성 요소 중 주로 어느 기관(또는 구조물)에 대한 항체 인지에 대해서는 별로 연구된 바 없었다. 이 연구는 면역 조직화학적 방법을 이용하여 폐흡충 충체 의 부위별 항원성을 파악하기 위한 것으로 충체 절편 표본에서 흡반, 표피, 피극, 난황선, 장, 자성 및 웅성 생식기, 충란 등의 항원성을 비교 관찰한 것이다. 충체 표본으로는 감염 11∼20주 된 고양이의 폐조직에서 충낭(WOrm capsule)을 적출하여 포르말 린 고정 및 파라핀 포매한 것을 4㎛ 두께로 영아 사용하였고, 항혈청(1차 항체)으로 감염 11∼20 주 된 고양이 혈청을, 2차 항체로 peroxidase-conjugated goat anti-cat IgG를 사용하는 간접 면역 대소 염색법(indirect immunoperoxidase staining technique)을 이용하였고, 진한 황색 또는 황갈색으로 염색되면 양성으로 판정하였다. 항체의 희석 농도는 1차 항체 1 : 500~1 : 2,000, 2차 항체 1 : 200~1 : 500으로 하였고 10회 이상 반복 염색하였다. 실험 결과 장 상피의 표면(intestinal epithelial border), 장 내용물, 난황선(vitelline glands) 및 충낭 내의 충란(eggs in worm capsule) 등이 강한 양성 반응을 보였고 자궁 내 충란 및 충체 실질 조직 중 일부도 약하지만 양성 반응을 보였다. 한편 흡반(suckers), 표피(tegument), 피극(spines), 표피하세포(subtegumental cells), 장 상피세포의 세포질, 웅성 생식기관 및 난소 등은 음성 반응 을 나타내었다. 항원성의 강도를 순서대로 나열해보면 장 상피의 표면, 장 내용물, 충낭 내의 충란, 난황선, 자궁 내 충란, 충체 실질조직의 순이었다. 항원성이 강한 장 상피층 및 장 내용물은 1차 항체 1 : 4,000(2차 항체 1 : 200)에서도 양성 반응을 보였으나 충체 실질조직 중 일부는 1차 항체 1 : 500의 고농도(2차 항체 1 : 200)에서만 양성 반응을 보였다. 이상의 결과를 종합해 볼 때, 폐흡충 감염시 나타나는 혈청의 항체 반응은 충체의 배설물과 충 낭 주위에 산출된 충란에 의해 가장 강력히 유발되는 것이 아닌가 생각되며 이들이 충낭을 벗어나 숙주 조직으로 총수되는 가장 중요한 항원성 물질이 아닌가 추측된다.
배추흰나비 P. rapae와 P. brassicae GV에 대한 봉입체 및 바이러스단백질의 물리화학적 성상을 비교 분석한 결과 전기영동법에 의한 봉입체단백질은 그 분자량이 P. rapae GV는 30kd, P. brassicae GV는 31 kb의 단일단백질이었으며, trypsin, chymotrypsin, papain 및 staphylococcus aureus V8 protease에 의한 peptide mapping에서는 두 바이러스 간에 큰 차이가 없었다. 바이러스입자단백지르이 전기영동법에 의한 분석결과, 두 바이러스 간에 큰 차이가 없었다. 바이러스입자단백질의 전기영동법에 의한 분석결과, 두 바이러스에서 각각 42개의 band가 나타났으며 고분자량 부분에서 P. rapae GV의 경우는 115, 110, 105 및 103 kd의 4개 band인데 반해 P. brassicae GV는 107 kd의 한 band만 관찰되었다. 그리고 봉입체단백질의 아미노산 분석비교에서 두 바이러스 간의 큰 차이는 없었으며 일반적으로 곤충에 많이 존재하는 산성아미노산인 aspartic acid와 glutamic acid의 함량이 많았고 염기성 아미노산에서 lysine의 함량이 특히 많았으며 봉입체단백질의 면역학적인 시험결과에서는 P. rapae GV 항혈청에 대해 두 바이러스는 공통 침강선을 형성하였다.
흰쥐에 이락촌폐흡충(Paragonimus iloktsnenensis)을 감염시키고 폐흡충중의 특성과 진행 과정을 조사한 다음 praziquantel 투여가 폐 병변에 미치는 대과를 관찰하였다. 이락촌폐흡충 피낭 유충을 흰쥐에 감염시킨 바 전례에서 폐장에 병변을 유발하였고 육안적으로 폐 표면으로 돌출하는 출혈성 및 결절성 충낭들이 관찰되었으며, 현미경적으로 충낭과 아울러 폐실질 및 폐포 내에 충란에 의한 육아종 형성, 국소적 무기폐 및 염증 반응을 나타내었고, 병변 주위에는 육아조직과 결체조직의 증가가 동반되었다. 이락촌폐흡충 감염 5주 후에 prasiquantel을 투여한 바, 3일 후부터 이미 충체가 손상을 받아 지행성 변화를 보이기 시작하였고, 그 후로 충체가 점차 사멸, 소실되어 21일 후에 는 충체를 찾아볼 수 없었다 일부 흰쥐에서는 투약 후 14일까지 충체가 살아있는 경우도 관찰되었다. 대부분의 흰쥐에서는 충체가 사멸됨에 따라 폐장의 병변도 회복되기 시작하였는데 충남의 크기가 줄어들고, 충체가 흡수되며, 주위의 염증 반응과 무기폐 현상도 감소되었고, 산란양이 적어 충란 육아종 형성도 감염 대조군에 비해 경미하였다. 이상의 결과로 볼 때 흰쥐에 이락촌폐흡충을 감염시키면 인체의 폐흡충증과 거의 동일한 병변을 일으키며, praziquantel을 투여하면 1차적으로 충체가 손상, 사멸되면서 2차적으로는 폐 병변이 빠른 시간에 잘 복구되므로 결국 폐흡충증을 치유시키는데에 탁월한 효과가 있음을 알 수 있었다.
This studies was carried out to investigate a process of formation for the granulomatous lesions in the liver and the haematological variation with the lapse of time after infection of Capillaria hepatica in dogs. Twelve crossbred puppies, about 3 months of age and 2-3 kg of body weight, were administered with 2,000 Capillaria hepatica infective eggs. Every four puppies was sacrificed on 1 week, 3 weeks and 5 weeks after infection, respectively. Although no marked clinical sign was noticed, total leukocyte values were increased peak on 1 week, and then reduced gradually on 3 weeks and 5 weeks after infection. Absolute differential counts of neutrophils and lymphocytes were significantly increased on 1, 3 and 5 weeks after infection. Absolute differential counts of monocytes and eosinophils were trend to increase during the experimental periods. On grossly findings, liver congestions were observed in all infected puppies, and a few white specks were scattered under liver capsule in one puppy on 3 weeks and two puppies on 5 weeks after infection. On microscopic findings, many fresh larvae were observed in the liver tissues in one puppy on 1 week after infection. A worm was decayed and only a portion of cuticle was shown in one puppy on 3 weeks after infection. Around the central necrotic material, the layers of thick macrophages with a few giant cells and lymphocytes with fibrous connective tissues were consisted the granulomatous lesions on 5 weeks after infection.
스파르가눔증(sparganosis)은 Spirometra의 plerocercoid 유충이 인체에 감염되었을 때 유발되는 질병으로 국 내에서 드물지 않게 관찰되는 조직내 기생 윤충중이다. 이 연구에서는 마우스에 실험적으로 피하 스파르가눔중을 만들고 경시적으로 병변의 조직학적 소견의 변화와 효소면역법에 의한 혈청 항체가를 관찰하여 이 질병의 병소 형성 과정을 관찰하였다. 뱀에서 얻은 충체를 5마리씩 마우스에 경우 감염시키고, 1,24 및 10주와 6개월 후에 도살하여, 충체의 분포와 수를 육안으로 확인하고 피하 감염부위를 조직표본으로 만들어 현미경으로 관찰하였다. 이와 동시에 효소면역 법을 이용하여 혈청 내 항스파르가눔 IgG 항체가를 측정하여 아래의 결과를 얻었다. 1. 충체 회수울은 감염 후 1주와 2주에 각각 80% 이었으나 조금씩 증가하여 6개월에는 100%이고, 전체 평균 88.3%가 회수되었다. 충체의 대부분은 목파 몸통의 피하조직에서 검출되었고 피하조직에서 골격근에까지 침범 한 것도 일부 관찰되었다. 감염 기간이 경과할수록 충체가 성장하여 고 무게가 처음에 평균 7.3 mg에서 6개월 후에는 47.1 mg으로 증가하였다. 감염기간과 충체의 분포와는 차이가 없었다. 2. 감염 후 1주와 2주에 충체 주위에 염증세포가 국한되어 소수 관찰되었으나, 충체가 지라간 부위로 추측되 는 곳에 많은 세포가 관찰되기도 하였다. 감염 4주 이후에는 충체가 있는 조직 내의 공간 주위로 파괴된 조직세 포와 중성구, 호산구, 림프구등의 염증세포가 많이 침윤되어 있고, 일부에서 삼출액도 관찰되었다. 감염 후 4주 와 10주에는 충체와 이에 인접한 염중세포층의 주위를 조직구(histiocytes)와 섬유다세포가 충을 이루어 둘러싸고 있었다. 감염 후 6개월에 관찰한 바, 대부분의 충체 주위에서 염증세포가 줄고 섬유소에 의한 충낭(worm capsule)이 얇게 형성되어 있었다. 그러나 이 때에도 충체 주위에 농양을 만들거나 심한 염증소견을 보인 부분도 있었다. 모든 감염 군에서 충체는 형태학적으로 온전하고 칼슘 과립을 갖고 있었다. 3. 혈칭 내 IgG 항체가는 평균 흡광도가 감염 후 1주에 0,108, 2주에 0.141이었으나 4주에 0.456, 10주에 0.955, 6개원에 1.060으로 증가하였다. 이상의 결과를 종합하면 스파르가눔 감염 추 4주가 경과하면 염증반응이 강하게 나타나고, 조직구와 섬유세 포가 관찰되기 시작하며, 혈청 내 IgC 항체가도 유의하게 증가함을 알 수 있었다. 충체가 이동하지 않을 경우에 약 10주가 경과하면 충체 주위에 섬유소가 증식하여 충낭을 형성하고 이 기간 이후에는 항체가의 증가도 완만 하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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