A bioassay is a test system using a living organism (in whole or in part) to determine the presence or relative potency of chemical substances. The development and uses of bioassay are intimately linked to the discovery and characterization of the major classes of plant hormones. An application of this relationship is helpful for understanding the concept of plant hormones as well as the use of bioassay. And plant bioassay have been development and employed not only for the discovery and characterization of the biological activity of plant growth regulators but also have served several important secondary roles. The ideal bioassay should possess the characteristic of high specificity. great sensitivity. short response time, low cost and ease of obtaining plant material. acceptable ease of manipulation, and minimal space and equipment requirements.
본 연구는 유전자총기법에 의해 생산된 형질전환 고구마를 사용하여 glufosinate-ammonium에 대한 저항성 유무를 빠르고, 경제적이며, 신뢰할 수 있는 간이분석법을 찾고자 수행되었다. 저항성 진단법은 whole-plant 진단법, one leaf 진단법 및 leaf disk 진단법을 사용하였고, 이들 진단법에 의해 glufosinateammonium을 처리하고 잎의 피해율과 암모늄 축적량을 조사하였다. Leaf disk 진단법에서 glufosinateammonium 처리 후 형질전환 라인 7171의 잎에 대한 약해는 wild type에 비해 1.9배 낮았다. One leaf 진단법과 whole plant 진단법의 경우 glufosinateammonium 처리 후 7171의 잎에 대한 약해는 wild type에 비해 각각 59배와 92배 적었다. Leaf disk, one leaf와 whole plant 진단법에서 0.5-5mM glufosinateammonium 처리 후 암모늄 축적은 wild type이 7171에 비해 각각 2-20, 4-43 및 6-115배 더 많이 축적되었다. 이들 3가지 방법 모두 형질전환 고구마에 대한 glufosinate-ammonium 저항성 유무를 판단하는데 가능한 방법이나 one leaf 진단법이 가장 간편하면서 빠른 진단방법이었다. 그러나 이 방법은 엽령별 내성차이가 존재할 수 있어 고구마 엽이 10개 전개되었을 때 1, 3, 5, 7, 9엽을 각각 채취하여 3mM glufosinateammonium을 처리시 잎의 피해율과 암모늄 축적을 엽령별로 조사한 결과 유의적인 차이를 보이지 않았다. 따라서 분석에 소요되는 기간, 시료량, 정확성 등을 고려할 때 형질전환 고구마의 저항성을 판별하는데 one leaf 진단법이 가장 적합한 것으로 판명 되었다.
본 연구는 식물정유의 활용과 개발을 포함한 천연물 제초제의 개발을 효과적으로 추진하기 위한 방안으로서 식물정유 성분의 특성이 고려된 개선된 전식물체(whole-plant) 검정법을 확립하기 위해 수행되었다. 잡초 4초종을(피, 바랭이, 자귀풀, 어저귀) 이용하는 전식물체 경엽살포 검정법은 검정 화합물 량이 충분할 경우, 전식물체 생장점 점적처리법은 검정화합물이 미량일 때 추천할 수 있는 방법으로 판단되었다. 각 식물정유 처리시 초기 처리농도는 $2,500{\sim}5,000{\mu}g\;mL^{-1}$ 수준이 필요하였으며 계면활성제는 Tween 20 보다 NOP를 첨가하였을 경우에 보다 높은 살초활성을 나타내었다. 식물정유와 같이 휘발성이 있는 천연물의 활성을 평가하기 위해서는 약제를 처리한 후 과습 상태에 일정시간 두면 제초활성 발현이 증진되었다. 또한 전식물체 생장점 점적처리법은 경엽살포 검정법에 비해 약 1/100의 약제처리량(부피), 약 1/200의 성분량(무게)에서도 살초효과의 검정이 가능하였다.
The plant Eclipta prostrata, a member of the Compositae family, has folkloric reputation of being used as a medicinal agent in Bangladesh. In the present investigation, attempt was taken to explore the antimicrobial potency and cytotoxicity of its extractives and purified compounds. The methanolic extract of the whole plant, its n-hexane, carbon tetrachloride, chloroform, aqueous soluble fractions and two purified compounds, eclalbasaponin I (1) and II (2), obtained from Eclipta prostrata were subjected to screening for inhibition of microbial growth by the disc diffusion method at 300 and 100 ${\mu}g$/disc for extracts and pure compounds, respectively. In this case, the carbon tetrachloride and chloroform soluble fractions of the methanolic extract appeared very potent in terms of both zone of inhibition and spectrum of activity. However, all the extractives were also subjected to brine shrimp lethality bioassay for preliminary cytotoxicity evaluation. Here, the carbon tetrachloride soluble fraction of methanolic extract revealed the strongest cytotoxicity having $LC_{50}$ of 1.318 ${\mu}g$/ml.
Gautam, Prakriti;Panthi, Sandesh;Bhandari, Prashubha;Shin, Jihoon;Yoo, Jin Cheol
통합자연과학논문집
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제9권1호
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pp.72-79
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2016
Hexane, ethyl acetate and methanol extracts of whole plant of Boerhavia diffusa were screened for phytochemical and biological activities. Qualitative phytochemical screening via colorimetric method and the quantitative estimation of phenolic and flavonoid content were performed. Antioxidant assay using DPPH scavenging method was studied. Antimicrobial screening of plant extracts was done by cup diffusion technique. Cytotoxic activity of B. diffusa was studied by brine shrimp bioassay and anthelminthic activity was evaluated in vitro in Pheretima posthuma. This study revealed B. diffusa as a source of various phyto-constituents such as alkaloids, glycosides, saponins, tannins, carbohydrates, cardiac glycosides, flavonoids and terpenoids. Quantitative estimation of total phenol was found to be maximum in BEE i.e. $29.73{\pm}0.88$, BME $19.8{\pm}2.02$ and in BHE $9.15{\pm}0.304mgGAE/g$. Similarly, the total flavonoid content was found to be $17.44{\pm}0.75$ in BEE, $14.43{\pm}0.23$ in BHE and 3.678 mg QE/g in BME. Ethyl acetate extract showed its antibacterial activity against all tested pathogens except Escherichia coli whereas Staphylococcus aureus and Salmonella Typhi were resistant to methanol and hexane extract. The zone of inhibition (ZOI) of ethyl acetate extract against S. Typhi and B. cereus was found to be 18 mm and 14 mm respectively. The MIC value of BEE in S. Typhi was $3.125{\mu}g/ml$ and in B. cereus was $12.5{\mu}g/ml$. The preliminary screening of anticancer property of B. diffusa i.e. BSLT in methanol was found to be $165.19{\mu}g/ml$. B. diffusa was also found to contain anthelmintic property. The study helped in further exploration of medicinal properties of B. diffusa by phytochemical screening and biological activities paving the path for study and investigation in this plant.
An, Ren-Bo;Na, Min-Kyun;Min, Byung-Sun;Chang, Hyeun-Wook;Bae, Ki-Hwan
Natural Product Sciences
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제17권2호
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pp.90-94
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2011
An in vitro bioassay-guide revealed that the methanol (MeOH) extract of the whole plant of Patrinia saniculaefolia (Valerianaceae) showed cyclooxygenase-2 (COX-2) and 5-lipoxygenase (5-LOX) dual inhibitory activity by assessing their effects on the production of prostaglandin $D_2$ ($PGD_2$) and leukotriene $C_4$ ($LTC_4$) in mouse bone marrow-derived mast cells (BMMCs). Phytochemical study of the MeOH extract of this plant led to the isolation of twelve compounds; ${\beta}$-farnesene (1), squalene (2), nardostachin (3), patridoid I (4), patridoid II (5), patridoid II-A (6), oleanolic acid (7), oleanonic acid (8), 23-hydroxyursolic acid (9), oleanolic acid 3-O-${\alpha}$-L-arabinopyranoside (10), oleanolic acid 3-O-${\beta}$-D-glucopyranoside (11), oleanolic acid 3-O-[${\beta}$-D-xylopyranosyl-(1${\rightarrow}$3)-${\beta}$-D-(6-O-butyl)glucuronopyranoside] (12). Among the compounds, 4 and 5 strongly inhibited both the COX-2-dependent $PGD_2$ generation with $IC_{50}$ values of 8.7 and 13.6 ${\mu}M$, respectively, and the generation of $LTC_4$ in the 5-LOX dependent phase with $IC_{50}$ values of 41.7 and 46.9 ${\mu}M$, respectively, which suggest that the anti-inflammatory activity of P. saniculaefolia might occur in part via the inhibition of both $PGD_2$ and $LTC_4$ generation by 4 and 5.
Bioassay-guided fractionation has led to the isolation of triterpenoid saponins such as Acutoside A (3-O-[O-${\beta}$-D-glucopyrano$yl-(1${\to}$2)-O-${\beta}$-D-glucopyranosyl] oleanolic acid) from the whole plants of Viola hondoensis. Among them, Saponin 1 exhibited potent inhibitory activity against matrix metalloproteinase (MMP)-1, and prevented the UV-induced changes in the MMP-1 expression. In addition, compound was isolated from this plant for the first time.
Seo, Jee-Hee;Choi, Yeon-Hee;Kim, Jung-Sook;Kim, Seong-Kie;Choi, Sang-Un;Kim, Young-Sup;Ryu, Shi-Yong;Kim, Young-Kyoon
대한약학회:학술대회논문집
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대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.202.2-202.2
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2003
A bioassay-guided fractionation of the whole extract of Viscum album (a parasitic plant : Loranthaceae) led to the isolation of two triterpenoidal components, oleanolic acid (1), ${\beta}$-amyrin acetate (2), homoflavoyadorinin B (3) as well as large quantity of free fatty acid mixtures as active ingredients of the extract responsible for the antitumoral property. The EtOAc soluble part and BuOH soluble part of the extract demonstrated a significant inhibition on the proliferation of cultured human tumor cells such as A549 (non small cell lung), SK-OV-3 (ovary), SK-MEL-2 (melanoma), XF498 (central nerve system) and HCT-15 (colon) in vitro, whereas the remaining water soluble part exhibited a poor inhibition. (omitted)
Sclerotinia sp. (isolate BWC98-105) causes stem blight and root rot in Leghum sp., and is presently being evaluated as a potential mycoherbicide for the control of Trifoliorium repens. Bioassays have shown that Sclerotinia sp. produces phytotoxic substance which is biologically active against T. repens. Two biologically active compounds, designated as compoundsI and II, were produced in vitro from the culture filtrate of BWC98-105 isolate Sclerotium sp. Compounds I and II were purified by means of liquid-liquid extraction and $C_{18}$ open column chromatography (300 ${\times}$ 30 mm, i.d). To determine the purity, the purified compounds were analyzed by RP-HPLC. The analytical RP-HPLC column was a TOSOH ODS-120T (150 ${\times}$ 4.6 mm i.d, Japan), of which the flow rate was set at 0.7 mL/min using the linear gradient solvent system initiated with 15 % methanol to 85 % methanol for 50 min with monitoring at 254 nm. Under these RP-HPLC conditions, compounds I and II eluted at 3.49 and 4.13 min, respectively. Compound II was found to be most potent and host specific. However, compound I had a unique antibiotic activity against phytopathogenic bacteria like bacterial leaf blight (Xanthomonas oryzae) on rice, where it played a less important role in producing toxicity on T. repens. No toxin activity was detected in the water fraction after partitioning with several organic solvents. However, toxin activity was detected in the ethyl acetate and butanol fractions. In the leaf bioassay using compound II, the disease first appeared within 4-5 h as water soaked rot, which subsequently developed into well-defined blight affecting the whole plant.
A Lindernia dubia (L.) Pennell var. dubia accession from Jeonnam province, Korea was tested for resistance to sulfonylurea (SU) herbicides, imazosulfuron and pyrazosulfuron-ethyl in whole-plant response bioassay. The accession was confirmed resistant to both herbicides. The $GR_{50}$ (herbicide concentration that reduced shoot dry weight by 50%) values of resistant accession were 264 and 19 times higher to imazosulfuron and pyrazosulfuronethyl, respectively, than that of the standard susceptible accession. The surviving resistant L. dubia after pyrazosulfuron-ethyl + molinate application can be controlled by sequential applications of soil-applied herbicides, butachlor, dithiopyr, pyrazolate, and thiobencarb and foliar herbicides, bentazon. Sulfonylurea-based mixtures such as mixtures of azimsulfuron + anilofos, bensulfuron-methyl + oxadiazon, pyrazosulfuron-ethyl + fentrazamide, and pyrazosulfuron-ethyl + anilofos + carfentrazon can also be used to control the surviving resistant L. dubia. However, use of these mixtures should be restricted to a special need basis. Thus, we suggest that sequential applications of non-SU-based mixtures such as butachlor + pyrazolate and MCPB + molinate + simetryne be used to control the surviving resistant L. dubia after SU herbicide applications. Rice yield was reduced 24 % by resistant L. dubia that survived after the pyrazosulfuron-ethyl + molinate application compared with pyrazolate + butachlor in transplanted rice culture. In vitro ALS activity of the resistant biotype was 40 and 30 times more resistant to imazosulfuron and pyrazosulfuron-ethyl, respectively, than the susceptible biotype. Result of in vitro ALS assay that the resistance mechanism of L. dubia to SU herbicides may be due, in part, to an alteration in the target enzyme, ALS.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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