El Khoury, Pamela;Salameh, Carell;Younes, Samer;Awad, Andy;Said, Yana;Khalaf, Roy A.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.29
no.11
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pp.1806-1816
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2019
Candida albicans is an opportunistic fungus possessing multiple virulence factors controlling pathogenicity. Cell wall proteins are the most important among these factors, being the first elements contacting the host. Ddr48 is a cell wall protein consisting of 212 amino acids. A DDR48 haploinsufficient mutant strain was previously found necessary for proper oxidative stress response and drug resistance. In this study, we aimed to further elucidate the role of Ddr48 by performing additional phenotypic characterization assays. A combinatory proteomic and bioinformatics approach was also undertaken to determine differentially expressed cell wall proteins. Results showed that the mutant strain exhibited a 10% decrease in adhesion mirrored by a 20% decrease in biofilm formation, and slight sensitivity to menadione, diamide, and SDS. Both strains showed similar hyphae formation, virulence, temperature tolerance, and calcofluor white and Congo red sensitivities. Furthermore, a total of 8 and 10 proteins were identified exclusively in the wild-type strain grown under filamentous and non-filamentous conditions respectively. Results included proteins responsible for superoxide stress resistance (Sod4 and Sod6), adhesion (Als3, Hyr4, Pmt1, and Utr2), biofilm formation (Hsp90, Ece1, Rim9, Ipp1, and Pra1) and cell wall integrity (Utr2 and Pga4). The lack of detection of these proteins in the mutant strain correlates with the observed phenotypes.
In the absence of exogeneous nitrogen supply, evaluation of a symbiosis effectiveness of Bradyrhizobium japonicum USDA 110 in a supernodulating soybean mutant, SS2-2, its wild type, Sinpaldalkong 2, and control genotype, Jangyeobkong, was conducted in this study. Nodules in SS2-2 were initially white and similar to its wild type, Sinpaldalkong 2. At the late stage, the wild type nodules became dark pinkish by maturation, by contrast, mature nodules in SS2-2 remained light green to pinkish, indicating a lack of leghemoglobin. Tap root length was short in nodulated symbiotic SS2-2 than that of its wild type and the control genotype. Nodulated root length and nodule density on root length were significantly increased by B. japonicum inoculation, but no significant increase was observed on root length and percentage of nodulation to total root length. Regardless of Bradyrhizobium inoculation, SS2-2 showed higher nodule dry weight and higher acetylene reduction activity (ARA) when compared with its wild type and the control genotype. Inoculation of B. japonicum leaded the increase of ARA in 47 days after planting (DAP), in part because of nodule development. Supernodulating mutant, SS2-2, less responded to B. japonicum induction in terms of nitrogen fixation and nodulation characteristics than its wild type. Thus, interaction of supernodulating soybean mutant with Bradyrhizobium had less symbiotically associated response than normal nodulating soybean.
Cymbidium is one of the largest genus in the orchid family and a number of hybrids have been bred in the world. During mass-propagating the Cymbidium "Dongyang" using the meristem culture technology, a useful leaf mutant was selected from the protocom like bodies. The new Cymbidium variety by in vitro mutangesis from "Dongyang" was named as 'Daegook' in 1998. Compared to Dongyang, "Daegook" mutant has white or yellow stripes along the margin of leaves and flowers. The plant length of "Daegook" was shorter than "Dongyang" and the mean length and width of leaf in "Daegook" was 40 cm and 1.6 cm, respectively. The new variety, "Daegook", is expected to be a popular Cymbidium variety among consumer as a ornamental orchid mutant for pot culture by its fine and unique stripes and growth characters.
A DNA fragment which is involved in tolassin production was cloned to obtain a molecular marker of Pseudomonas tolaasii, a casual agent of bacterial brown blotch disease of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus). Tolaasin is a lipodepsipeptide toxin and known as a primary disease determinant of the P. tolaasii. It is responsible for formation of white line in agar when P. tolaasii were cultured against white line reacting organisms (WLROs). White line negative mutants (WL-) were generated by conjugation between rifampicin resistant strain of P. tolaasii and E. coli carrying suicidal plasmid pSUP2021 : : Tn5. The ability of tolaasin production of the WL- mutants was examined by hemolysis test, pathogenicity test, and high pressure liquid chromatography (HPLC) analysis of culture filtrate. All of the WL- mutants were lost the ability of tolaasin production (Tol-). Genomic library of the Tol- mutant was constructed in pLAFR3 and the cosmid clone containing Tn5 was selected. DNA fragment fro franking region of Tn5 was cloned from the plasmid and used as a probe in Southern blot. DNA-DNA hybridization with the probe to total DNA from group of bacteria ecologically similar to P. tolaasii including WLORs, fluorescent Pseudomonads isolated from oyster mushroom, P. agarici, P. gingeri, and some of other species of Psedomonas showed that some of the tested bacteria do not have any hybridized band and others have bands sowing RFLP. The cloned DNA fragment or its nucleotide sequence will be useful in detection and identification of the P. tolaasii.
Light is essential to the growth and development of plants, and it is perceived by phytochromes, which are one of the photoreceptors that regulate physiological responses in plants. Ethylene regulates the dormancy, senescence, growth, and development of organs in plants. This research focused on the interaction of phytochromes and ethylene to control hypocotyl growth and gravitropism using phytochrome mutants of Arabidopsis, phyA, phyB, and phyAB, under three light conditions: red (R) light, farred (FR) light, and white light. The mutant phyAB exhibited the most stimulation of gravitropic response of all three phytochrome mutants and wild type (WT) in all three light conditions. Moreover, phyB in the R light condition showed more negative gravitropism than phyA. However, phyB in the FR light condition showed less curvature than phyA. The hypocotyl growth pattern was similar to the gravitropic response in several light conditions. To explain the mechanism of the regulation of gravitropic response and growth, we measured the ethylene production and activities of in vitro ACS and ACO. Ethylene production was reduced in all the mutants grown in white light in comparison to the WT. Ethylene production increased in the phyA grown in R light and phyB grown in FR light in comparison to the other mutants. The ACS activity coincided with the ethylene production in the phyA and the phyB grown in R light and FR light, respectively. These results suggest that the Pfr form of phyB in R light and the Pr form of phyA in FR light increased ethylene production via increasing ACS activity.
Chlorophyll mutants were produced by treating the rhizome of Cymbidium kanran with mutagen, EMS(ethyl methan sulfonate). The germination ratio of Cymbidium kanran seeds was 5.5 times higher when the seeds were treated with ultrasonic treatment for 20 minutes than untreated control. Fifty to sixty percent of the rhizomes became dark brown when they were cultured in a liquid growth medium containing 0.2% EMS for three weeks. When the dark-brown rhizomes were cultured in a solified MS medium, new rhizomes were developed from a part of the old ones. Chlorophyll mutant rhizomes were obtained from a meristem tissue by a subculturing the cuts of these new rhizomes for a year. Of the chlorophyll mutants, a zigzag-striped type of rhizome was dominant and light-yellow and albino ones were also produced. While the zigzag-striped type rhizomes were differentiated into green and striped plant, the light yellow and the white rhizomes produced yellow-striped and albino plants repectively.These results indicate that the EMS treatment on the rhizome is an effective means to induce a chlorophyll mutant. We believe that this method may be useful to produce variegated plants chlorophyll mutants from other orchids.
A full-length cDNA and genomic DNA of a $leucoanthocyanidin$$dioxygenase$ ($DgLDOX$) gene was isolated from the petals of chrysanthemum 'Argus', and comparative features of the gene among three flower color mutants derived from a gamma-ray mutagenesis were characterized. The cDNA coding region of the gene was 1068 bp and was translated into 356 amino acids accordingly. The genomic DNA size was 1346 bp for 'Argus', while three mutants revealed ranges of 1363 to 1374 bp. A single intron between two coding exons for the $DgLDOX$ gene was found, of which size was 112 bp for 'Argus', but 128 or 137 bp for three flower color mutants, indicating that a genomic insertion in the intron occurred during the gamma-ray mutagenesis. DNA blot analysis revealed the $DgLDOX$ gene presenting as a single copy in the chrysanthemum genome. The $DgLDOX$ gene was expressed in both 'Argus' of light-pink color and two purple color mutants (AM1 and AM3) but had very weak expression in only white color mutant (AM2). The results demonstrated that variations in the flower color of the mutants might be associated with changes in the amino acid moieties in the coding exons or fragment insertions in the intron of the $DgLDOX$ gene, which potentially resulted in less expression of the gene in the white colored mutant.
Kim, Kwang-Ho;Heu, Mun-Hue;Park, Sun-Zik;Koh, Hee-Jong
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.36
no.3
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pp.197-203
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1991
Several types of endosperm and embryo mutants were induced by the treatment of MNU (N -methly- N -nitrosourea) on fertilized egg cell of rice plant. These mutants were named as dull. waxy, white core, floury, sugary, shrunken, colored seed coat and giant embryo according to their appearence, micro-scopic feature on SEM and amylose content. White cored mutant was the most frequent one among them. All of the mutants were segregated as controlled by a single recessive gene except 47320 (dull). Futher studies on the genetics and physico-chemical properities of the mutants are ongoing.
Anthocyanin, an important component in the grape berry skin, strongly affects grape quality. The transcription factors VvMYBA1 and VvMYBA2 (VvMYBA1/2) control anthocyanin biosynthesis. In addition, cultivation and environmental factors, such as light, influence anthocyanin accumulation. The present study aimed to clarify the effect of shading (reduced light condition) on the transcriptomic regulation of anthocyanin biosynthesis using a red-wine grape cultivar, Vitis vinifera 'Pinot Noir', and its white mutant, 'Pinot Blanc', caused by the deletion of the red allele of VvMYBA1/2. The grape berry skins were analyzed for anthocyanin content and global gene transcription accumulation. The microarray data were later validated by quantitative real-time PCR. A decisive influence of VvMYBA1/2 on the expression of an anthocyanin-specific gene, UDP glucose: flavonoid 3-O-glucosyltransferase, was observed as expected. In contrast, upstream genes of the pathway, which are shared by other flavonoids, were also expressed in 'Pinot Blanc', and the mRNA levels of some of these genes decreased in both cultivars on shading. Thus, the involvement of light-sensitive transcription factor(s) other than VvMYBA1/2 was suggested for the expression control of the upstream genes of the anthocyanin biosynthetic pathway. Furthermore, it was suggested that the effects of these factors are different among isogenes.
Kim, Eun-Ji;Kang, Seong-Woo;Song, Kwang-Ho;Han, Sung-Ok;Kim, Jae-Jin;Kim, Seung-Wook
Korean Chemical Engineering Research
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v.49
no.1
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pp.101-104
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2011
Cellobiose dehydrogenase(CDH) as a hemoflavoenzyme is secreted out of cell in the cellulose degradation. As CDH strongly bound to amorphous cellulose, it helps cellulose hydrolysis by cellulase. CDH may have an important role of saccharification process for bioethanol production. In this study, Phanerochaete chrysosporium ATCC 32629 was selected for the production of CDH among other strains tested. The optimal temperature and pH of CDH produced by P. chrysosporium ATCC 32629 were ${55^{\circ}C}$ and 4, respectively. To improve the activity of CDH, the mutation of P. chrysosporium was performed using proton beam that has high energy level partially. As a result, P. chrysosporium mutant with the high activity was selected at 1.2 kGy in a range of 99.9% lethal rate. The CDH and $\beta$-glucosidase activities of mutant were 1.4 fold and 20 fold higher than those of wild strain. Therefore, P. chrysosporium mutant with the high activities of CDH and $\beta$-glucosidase was obtained from mutation by proton beam irradiation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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