본 연구는 단백질분해효소로 whey protein을 가수분해하여 얻은 가수분해물의 용해도와 유화특성의 변화를 측정하기 위해 실시하였다. Whey protein concentrates를 porcine trypsin(E : S=1 ; 3,000)으로 pH 8.0, 37$^{\circ}C$에서 6시간 동안 가수분해한 whey protein 가수분해물의 유화활성은 분해 4시간째에 가장 높게 나타났으며, 이 때 가수분해도는 5.50%이었다. whey protein의 효소가수분해로 whey protein 중의 $\alpha$-lactalbumin은 분해가 잘 일어나지 않으나 $\beta$-lactoglobulin은 분해 초기부터 급속히 분해되며 유화력 상승에 관여하는 여 러개의 저분자량 peptide를 생성하였다. 가수분해물의 용해도는 가수분해시간이 지남에 따라 증가세를 보이다가 5시간부터 조금씩 감소 추세를 보였으며, pH에 따라서는 등전점 부근인 pH4~5에서 용해도가 가장 낮았으나 가수분해시간이 증가함에 따라 이 부근의 용해도가 현저히 증가하였으며 pH 6이상에서는 pH가 증가함에 따라 용해도도 증가하였다. 유화활성은 용해도의 결과와 거의 비슷한 결과를 나타내었다. 유화 안정성은 분해시간이 지남에 따라 조금씩 증가함을 보여주었으나, 가수분해 4시간부터 pH 8 이상의 PH에서 급격한 증자를 나타내었다.
This study investigated the ACE-inhibitory effect of yogurt beverage fortified with hydrolysates as well as the suitability of hydrolysates as a nutraceutical additive to yogurt beverage. Three whey protein hydrolysates hydrolyzed by alcalase, protamex, and trypsin were each added to yogurt beverage at concentrations of 1.25, 2.5, and 5 mg/mL. Yogurt beverage fortified with 2.5 mg/mL of hydrolysates had 61-69% ACE-inhibitory activity, whereas yogurt beverage fortified with 5 mg/mL of hydrolysates showed 74% ACE-inhibitory activity. There were no significant differences in ACE-inhibitory activity between the alcalase or protamex hydrolysates during storage; however, trypsin hydrolysate exhibited significant differences. On the other hand, physicochemical characteristics such as pH (3.47-3.77), titratable acidity (0.81-0.84%), colority, viable cell count, and sensory qualities were not significantly different among the tested yogurt beverage samples during storage. These results showed that yogurt beverage fortified with whey protein hydrolysates maintained antihypertensive activity and underwent no unfavorable changes in physicochemical characteristics regardless of enzyme type.
This study was carried out to separate the calcium-binding protein derived from enzymatic hydrolysates of cheese whey protein. CWPs (cheese whey protein) heated for 10 min at $100^{\circ}C$ were hydrolyzed by trypsin, papain W-40, protease S, neutrase 1.5 and pepsin, and then properties of hydrolysates, separation of calcium-binding protein and analysis of calcium-binding ability were investigated. The DH (degree of hydrolysis) and NPN (non protein nitrogen) of heated-CWP hydrolysates by commercial enzymes were higher in trypsin than those of other commercial enzymes. In the result of SDS-PAGE (sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis), $\beta$-LG and $\alpha$-LA in trypsin hydrolysates were almost eliminated and the molecular weight of peptides derived from trypsin hydrolysates were smaller than 7 kDa. In the RP-HPLC (reverse phase HPLC) analysis, $\alpha$-LA was mostly eliminated, but $\beta$-LG was not affected by heat treatment and the RP-HPLC patterns of trypsin hydrolysates were similar to those of SDS-PAGE. In ion exchange chromatography, trypsin hydrolysates were shown to peak from 0.25 M NaCl and 0.5 M NaCl, and calcium-binding ability is associated with the large peak, which was eluted at a 0.25 M NaCl gradient concentration. Based on the results of this experiment, heated-CWP hydrolysates by trypsin were shown to have calcium-binding ability.
유청을 기초로 하는 배지를 제조하여 Lactobacillus brevis를 배양하면서 유청 단백질로부터 기능성 펩타이드 생성을 알아보고자 하였다. Lb. brevis의 적정생장에 필요한 배지성분의 농도는 2% 유청 분말, 1%의 포도당 및 0.5%의 효모추출물이었다. Lb. brevis의 생장은 효모 추출물의 보충이 포도당의 보충보다 더 효과적이었다. 이 유청 배지에서 Lb. brevis의 생장은 2.0 ${\times}$ 10$^8$CFU/mL에 달하였다. 생장 후의 유청 배지를 10,000 ${\times}$ g에서 10분간 원심분리하여 그 여액으로부터 얻은 유청단백분해물은 ACE 효소 억제 효과가 나타났다. 분자량 8,000Da 이하로 부분 정제한 분획의 ACE에 대한 억제효과는 유청단백분해물의 64.7 ${\pm}$ 3.6%, IC$_{50}$은 38.8 ${\pm}$ 2.2 mg/mL로 나타났다. 따라서 유청을 기초로 한 배지는 젖산균으로부터 유청 단백질을 발효하여 ACE 억제 효과를 주는 펩타이드 생산에 적합한 배지임을 알 수 있었다.
This investigation was aimed at developing a ready-to-reconstitute beverage by utilizing probiotics and whey protein hydrolysates carrying bioactive peptides. Cheddar cheese whey was ultrafiltered. The 18% protein retentate was subjected to protein hydrolysis using Neutrase. The hydrolyzed retentate was further condensed to 35% total solids and spray-dried at $75^{\circ}C$ outlet air temperature. Different levels of sugar, citric acid and stabilizer were blended for spray-dried hydrolysates. Spray-dried hydrolysate was further inoculated with different levels of probiotics grown in a whey medium and dried in fluidized-bed drier at $40^{\circ}C$ to obtain a ready-to-reconstitute beverage. Hydrolysis was greatest at an enzyme:substrate ratio of 1:25 for 3 h. Spray-dried hydrolysate reconstituted to 1% protein and blended with 15% sugar, 0.2% citric acid and 0.15% xantham gum resulted in a superior product with no sedimentation. Accordingly, sugar, citric acid and xanthum gum were dry-blended with spray-dried hydrolysates. Bifidobacterium bifidum and Lactobacillus acidophilus that was grown separately in a whey medium, blended to produce 2% spray-dried hydrolysate and dried as described above resulted in a readyto-reconstitute beverage mix. The fluidized dried product typically exhibited a probiotic count of $10^8$colony forming units (CFU)/g. However, blending of probiotic to the retentate and direct spray-drying precipitously reduced the probiotic count to $10^4$ CFU/g of powder.
Jeewanthi, Renda Kankanamge Chaturika;Lee, Na-Kyoung;Paik, Hyun-Dong
한국축산식품학회지
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제35권3호
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pp.350-359
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2015
This review focuses on the enhanced functional characteristics of enzymatic hydrolysates of whey proteins (WPHs) in food applications compared to intact whey proteins (WPs). WPs are applied in foods as whey protein concentrates (WPCs), whey protein isolates (WPIs), and WPHs. WPs are byproducts of cheese production, used in a wide range of food applications due to their nutritional validity, functional activities, and cost effectiveness. Enzymatic hydrolysis yields improved functional and nutritional benefits in contrast to heat denaturation or native applications. WPHs improve solubility over a wide range of pH, create viscosity through water binding, and promote cohesion, adhesion, and elasticity. WPHs form stronger but more flexible edible films than WPC or WPI. WPHs enhance emulsification, bind fat, and facilitate whipping, compared to intact WPs. Extensive hydrolyzed WPHs with proper heat applications are the best emulsifiers and addition of polysaccharides improves the emulsification ability of WPHs. Also, WPHs improve the sensorial properties like color, flavor, and texture but impart a bitter taste in case where extensive hydrolysis (degree of hydrolysis greater than 8%). It is important to consider the type of enzyme, hydrolysis conditions, and WPHs production method based on the nature of food application.
Jeewanthi, Renda Kankanamge Chaturika;Kim, Myeong Hee;Lee, Na-Kyoung;Yoon, Yoh Chang;Paik, Hyun-Dong
한국축산식품학회지
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제37권1호
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pp.62-70
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2017
The aim of this study was identifying a suitable food grade enzymes to hydrolyze whey protein concentrates (WPCs), to give the highest bioactivity. WPCs from ultrafiltration retentate were adjusted to 35% protein (WPC-35) and hydrolyzed by enzymes, alcalase, ${\alpha}-chymotrypsin$, pepsin, protease M, protease S, and trypsin at different hydrolysis times (0, 0.5, 1, 2, 3, 4, and 5 h). These 36 types of hydrolysates were analyzed for their prominent peptides ${\beta}-lactoglobulin$ (${\beta}-Lg$) and ${\alpha}-lactalbumin$ (${\alpha}-La$), to identify the proteolytic activity of each enzyme. Protease S showed the highest proteolytic activity and angiotensin converting enzyme inhibitory activity of IC50, 0.099 mg/mL (91.55%) while trypsin showed the weakest effect. Antihypertensive and antioxidative peptides associated with ${\beta}-Lg$ hydrolysates were identified in WPC-35 hydrolysates (WPH-35) that hydrolyzed by the enzymes, trypsin and protease S. WPH-35 treated with protease S in 0.5 h, responded positively to usage as a bioactive component in different applications of pharmaceutical or related industries.
The purpose of this study was to investigate the acid tolerance, bile acid tolerance, and fermentation activity of lactic acid bacteria isolated from Kimchi in the presence of hydrolysates of whey protein concentrate. Kimchi isolates DK109, DK119, DK121, DK128, DK211, DK212, and DK215, which were identified as Lactobacillus sp., and L. casei DK128 showed the highest acid and bile acid tolerance. To produce whey hydrolysates, enzymes were added to a 10% (w/v) whey protein concentrate (WPC) solution at 1:50 (w/v, protein). The viabilities of the DK strains were determined in the presence of low pH and bile salts. Then, yogurt was produced via fermentation with L. casei DK128, an isolate from Kimchi, in the presence of the following additives: CPP, WPC, and WPC hydrolysates (WPCH) generated by alcalase (A) or neutrase (N). The produced yogurts were subjected to various analyses, including viable cell counts (CFU/mL), pH, titratable activity, and sensory testing. After 8 h of fermentation, the pH and titratable activity values of all test samples were 4.2 and 0.9, respectively. The viable counts of LAB were $3.49{\times}10^8$, $5.72{\times}10^8$, $7.01{\times}10^8$, and $6.97{\times}10^8$, for the Control, CPP, A, and N samples, respectively. These results suggest that whey proteins have potential as dietary supplements in functional foods and that WPCH could be used in yogurt as a low-cost alternative to CPP.
Recently, functional foods and bioactive components in foods have drawn the attention and interest of food scientists, nutritionists, health professionals, and general consumers. Bioactive whey protein is a highly concentrated milk serum isolate or concentrate, which is high in protein (80~90% protein by weight), carbohydrate- and sugar-free, and nonfat or very low in fat. Bioactive whey protein enhances both healthy and deficient immune systems. In general, ultrafiltered whey protein contains various whey protein concentrate peptides, which could be used for manufacturing probiotics added to health beverages. Hence, the objective of this paper was to review the published literature on research of new functionally improved health beverages using various bioactive components extracted from milk and dairy products.
본 연구에서는 고지방식으로 유도한 식이성 비만 모델 수컷 흰쥐에게 고지방식이와 함께 유청단백질 및 유청단백질 가수분해물을 급여하였을 때, 유청단백질 가수분해물의 섭취에 따른 체중, 장기 및 체지방, 지질 농도 및 식욕 조절호르몬에 대한 영향을 살펴보았다. 즉, 실험동물 흰쥐에게 18% 우지를 첨가한 고지방식을 기본으로 하여 질소원으로 유청단백질(whey protein concentrate 80: WPC80, 매일유업(주)) 10%를 4주간 공급한 후(control period), 4군으로 나누어서 고지방식을 기본으로 유청단백질, 유청단백질 가수분해물(whey protein hydrolysate), 유청 macropeptide fraction(whey macropeptide fraction; WH중 MW${\geq}$10,000)의 3종을 함유한 실험식이를 각각 6주 동안 급여하였다. 그 결과는 다음과 같다. 체중증가량 및 식이섭취량은 유청단백질 수준이나 가수분해물 섭취에 따른 실험군간 유의적 차이가 없었다. 간의 무게는 가수분해물 섭취에 의해 감소하였으나, 신장, 고환 및 비장의 무게는 실험군간 유의적 차이가 없었다. 한편, 신장의 무게는 고단백 식이에 의해 유의적으로 증가하였다(p<0.05). 지방조직의 무게는 신장 주변 지방과 부고환 주변 지방 모두 유청단백질 수준이나 가수분해물 섭취에 따른 차이를 보이지 않았다. 혈청의 총 지질과 중성지방은 가수분해물 섭취에 의해 유의적으로 낮게 나타났다(p<0.05). 반면, 혈청의 총 콜레스테롤과 HDL 콜레스테롤은 유청단백질 수준과 가수분해물 섭취에 따른 차이를 보이지 않았다. 간 조직의 총 지질, 중성지방과 총 콜레스테롤은 가수분해물 섭취에 따라 차이가 없었으며, 고단백식이에 의해 유의적으로 감소하였다(p<0.05). 일일 분 배설량은 고단백식이에 의해 유의적으로 증가하였다(p<0.05). 분 중 총 지질함량과 중성지방 함량은 가수분해물 섭취 시 그 함량이 유의적으로 증가하였다(p<0.05). 반면, 분 중 총 콜레스테롤 함량은 유청단백질 수준이나 가수분해물 섭취에 따른 영향을 받지 않았다. 혈청 중 glucose와 insulin 농도는 가수분해물 섭취 시 유의적으로 감소하였다(p<0.05). 혈청 중 leptin 농도는 유청단백질 수준이나 가수분해물 섭취에 따른 유의적인 차이를 보이지 않았다. 혈청 중 ghrelin 농도는 고단백 식이에 의해 유의적으로 감소하였으며(p<0.05), 특히, 가수분해물 섭취 시 감소하는 경향을 보였다. 이상의 결과로부터 유청단백질 가수분해물의 섭취는 intact 유청단백질보다 흰쥐의 혈청과 간의 지질 농도를 저하시키고, 분 중으로의 지질배설량을 증가시키는 것으로 나타났다. 또한 혈중 glucose 농도와 insulin 농도를 감소시킴으로서 인슐린 저항성을 개선시켰으며, ghrelin 감소를 통한 식욕조절 효과를 보였다. 한편, 본 연구에서 유청단백질 가수분해물이 체중감소나 조직의 지방량에는 영향을 미치지 않았는데, 이것은 본 연구에서 사용된 25% 단백질 수준이 체중감소나 조직 지방량에 영향을 미치기에는 부족한 수준이라 사료되며, 단백질 수준에서의 증가 또는 보다 장기간 동안의 섭취가 수행되어진다면 식욕 촉진 호르몬 분비 감소를 통해 체중 감소에 있어서 더 유의적인 효과가 나타날 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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