Background: Peste des petits ruminants (PPR), caused by the PPR virus (PPRV), is an acute and fatal contagious disease that mainly infects goats, sheep, and other artiodactyls. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) are considered the primary innate immune cells. Objectives: PBMCs derived from goats were infected with PPRV and analyzed to detect the relationship between PPRV replication and apoptosis or the inflammatory response. Methods: Quantitative real-time polymerase chain reaction was used to identify PPRV replication and cytokines expression. Flow cytometry was conducted to detect apoptosis and the differentiation of CD4+ and CD8+ T cells after PPRV infection. Results: PPRV stimulated the differentiation of CD4+ and CD8+ T cells. In addition, PPRV induced apoptosis in goat PBMCs. Furthermore, apoptosis and the inflammatory response induced by PPRV could be suppressed by Z-VAD-FMK and Z-YVAD-FMK, respectively. Moreover, the virus titer of PPRV was attenuated by inhibiting caspase-1-dependent apoptosis and inflammation. Conclusions: This study showed that apoptosis and the inflammatory response play an essential role in PPR viral replication in vitro, providing a new mechanism related to the cell host response.
Porcine transmissible gastroenteritis virus (TGEV), porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) and rotaviruses are considered as the most important causative agents of diarrhea in piglets. The study established 3 method vaccination programs to prevent PEDV. A (LL)group inoculated twice vaccinations on 2-weeks-interval during the late term of pregnant sows with PEDV live vaccine. The B (LKK) group was applied that one time single PEDV live vaccine at the pre-mate followed by the TGEV PEDV combined inactivated vaccine (twice vaccination on 2-weeks interval at the third-trimester). C (KK) group was applied to sow which inoculated twice vaccination on 2-weeks-interval during the late term of pregnant sows with by the TGEV, PEDV combined inactivated vaccine. As the result of SN test on sows in the pig farm before vaccination, antibody titers was showed 9/45 (20.0%). By comparison with the serum neutralizing antibody titers against PEDV of the vaccination programs after PEDV of the vaccination, A group and B group vaccination method was higher than those of C group in sows. In the piglets up to 2 weeks of age, A group was showed antibody titers of 17/22 (81.8%) that showed 2-128, and B group was showed antibody titers of 30/37 (81.1%) that showed 2-512, and C group was showed antibody titers of 14/28 (50.0%) that showed 2-32. On the other hand, PEDV antibody titers were tested for the survey. As the results of SN test, Aujeszky's disease survey in 54 pig farms from november 2005 to august 2006, antibody titers of 47/286 (16.4%) showed above 2. Five breeding farms were antibody titers of 38/77 (49.4%), Wanggung zone farms antibody titers of 59/85 (69.4%). In pigs farms vaccinated the first of twice PEDV live vaccine, and after 6 month, the second of twice TGEV PEDV combined inactivated vaccine (LLKK, 256-1024 titer) method was higher than those of vaccinated twice the early term of pregnant, and twice the late term of pregnant sows of PEDV live vaccine (LLLL, 32 titer).
본 연구는 강원도지역에서 분리된 전염성조혈기괴사증 바이러스(Infectious Hematopoietic Necrosis Virus: IHNV) 변이주들의 유전자형에 따른 병원성의 분석에 대한 연구이다. JRt-Shizuoka linage와 JRt-Nagano lineage에 속하는 IHNV 변이주들을 무지개송어 치어에 실험적으로 감염시켜 각 변이주들에 감염된 무지개송어의 폐사율을 비교하고, 병리조직을 관찰하며, 혈청형을 분석하였다. 그 분석의 결과, 고역가로 접종하였을 때 Sizuoka linage에 속하는 RtPc0314c와 RtPc0314g 변이주와 JRt-Nagano lineage에 속하는 RtPc0816g 변이주 모두 100% 누적 폐사율을 보였고, JRt-Shizuoka linage에 속하는 RtPc0314c와 RtPc0314g 변이주에 감염된 무지개송어에서 더 빠른 폐사가 관찰되었다. 저역가로 접종하였을 때에는 실험종료시까지 100% 폐사율을 보이지 않았지만, JRt-Nagano lineage에 속하는 변이주 보다 JRt-Shizuoka linage에 속하는 변이주에 감염된 무지개송어에서 더 높은 폐사율을 보였다. 또한 병리조직 분석 결과 RtPc0314c와 RtPc0314g 변이주에 감염된 무지개 송어의 신장과 비장 조직에서는 감염 증상이 확인되었지만, RtPc0816g 변이주에 감염된 무지개송어에서는 감염 증상이 확인되지 않았다. 하지만 이들 변이주들간의 구조 단백질, 혈청형에서는 차이가 없었다. 이러한 결과로 볼 때 강원도 지역에서 분리된 IHNV는 비록 구조 단백질과 혈청형의 차이는 나타나지 않았지만, JRt-Shizuoka lineage에 속하는 변이주들의 병원성이 더 높음을 확인할 수 있었다.
Chicken Mx protein (cMx) induced interferon (IFN) is an antiviral protein to inhibit replication of RNA virus, particularly negative stranded RNA virus, through blockage of transfortation of viral RNA and proteins. In order to determine antiviral effects of cMx from different MHC haplotype chicken, we characterized cMx gene by studying on nucleotide sequencing, antiviral effects to Newcastle disease virus, VSV and MDV, and transcription activities. Three types of eMx genes (2,118 bp) were detected from the different MHC haplotype chickens [B19 (N), B15(F) and B21 (GSP)] chickens, which have showed different susceptible to Marek's disease (MD). Several amino acid substitutions were showed in the cMx. The amino acid 548 and 631 in the cMxs from N and F, chickens susceptible to MD, was Val and Asn which was important on antiviral effects, and showed in resistant cMx. Those in the cMx from GSP, chicken resistant to MD, were same that showed in susceptible cMx. Though every cMx transactivated the expression of the reporter gene, the transcription activation by resistant cMx from N and F was lower compared to that by susceptible cMx from GSP. The decease of the cell growth in the resistant cMx cloned cells was seen in comparison with another cMx clone cells. Replication of NDV and VSV was suppressed in the clones with resistant cMx from N and F. NMx258-transducted cells lack of antiviral effects, and NMx437 or NMx646-transducted cells was showed 60% of antiviral effects compared to NMx705. Mean death time (MDT) and hemaggutination (HA) titer to NDV was long and low in the eggs of N and F lines, but short and high in the egg of GSP line. Interestingly, strong suppression to NDV was observed in the clone with N-Mx and in the eggs of N line. However, the effects of Mx for replication of vvMDV1 have not been. Thus, resistant types of cMx, N- and F-Mx, have showed the anti-viral effects to only RNA virus including NDV and VSV, but not to DNA virus. Antiviral effects of cMx were required whole length of amino acid including Val and Asn in amino acid 548 and 631.
Krishnan, N.;Chaudhuri, A.;Sengupta, A.K.;Chandra, A.K.;Sen, S.K.;Saratchandra, B.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제2권2호
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pp.149-153
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2001
The influence of baculovirus Bombyx mori Nuclear Polyhedrosis virus (BmNPV) infection on intermediary metabolic pathways in silkworm Bombyx mori L. was investigated. Studies revealed that NADP-linked malate dehydrogenase activity in hemolymph of infected silkworms at 96 hrs post infection (p.i.) with visible symptoms of infection was enhanced in comparison to healthy larvae of the same age. Also, NADP-dependent MDH activity was significantly lower in fat body cytosol of infected larvae at 96 hrs p.i. when compared to healthy larvae. Similarly, some biometabolic parameters like growth, protein content and cholesterol titer were observed to be influenced by baculovirus infection. While the growth of infected larvae was significantly retardedi protein content was also drastically reduced in both hemolymph and fat body tissues. Cholesterol titers however, was enhanced in infected larvae. The results observed herein point to a significant change in the normal biochemical and biometabolic pathways required for growth and development following BmNPV infection.
We developed a sensitive, nested reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) to detect Hantaan, Seoul, Belgrade, Puumala and Sin Nombre viruses in animal tissues. Total RNA was extracted from blood, lung or kidney samples of experimentally-infected hamsters by using the guanidine isothiocyanate buffer-acid phenol-chloroform method. Genus-reactive outer primers were derived from the consensus region of the G1 gene sequences of several hantaviruses. Serotype-specific primers were selected within the region amplified by the outer primers. To examine the sensitivity and specificity of the test, we diluted known quantities of Hantaan, Seoul, Belgrade, Puumala and Sin Nombre viruses in human or hamster immune sera before performing the nested RT-PCR. We could detect as little as 1 pfu of virus, even in the presence of high-titer neutralizing antibodies, and the serotype-specific primers amplified only homologous serotype viruses. RT-PCR with these primers demonstrated virus in the blood of experimentally-infected hamsters as early as four days to as late as 30 days after infection. A comparison of a standard immunofluorescent antibody screening test (IFAT) to nested RT-PCR with RNA extracted from lung or kidney tissues of the hamsters, demonstrated that RT-PCR to be more sensitive for identifying viruses in these tissues.
Classical swine fever virus (CSFV) is the etiologic agent of classical swine fever, a highly contagious disease that causes significant economic losses to the swine industry. The lapinized C-strain, a widely used vaccine strain against CSFV, has low growth efficiency in cell culture, which limits the productivity in the vaccine industry. In this study, a recombinant virus derived from C-strain was constructed and subjected to continuous passaging in PK-15 cells with the goal of acquiring a high progeny virus yield. A cell-adapted virus variant, RecCpp80, had nearly 1,000-fold higher titer than its parent C-strain but lost the ability to induce fever in rabbits. Sequence analysis of cell-adapted RecC variants indicated that at least six nucleotide changes were fixed in RecCpp80. Further adaption of RecCpp80 variant in swine testicle cells led to a higher virus yield without additional mutations. Introduction of each of these residues into the wild-type RecC backbone showed that one mutation, M979R (T3310G), located in the C-terminal region of E2 might be closely related to the cell-adapted phenotype. Rabbit inoculation revealed that $RecCpp40_{+10}$ failed to induce fever in rabbits, whereas $RecCpp80_{+10}$ caused a fever response similar to the commercial C-strain vaccine. In conclusion, the C-strain can be adapted to cell culture by introducing specific mutations in its E2 protein. The mutations in RecCpp80 that led to the loss of fever response in rabbits require further investigation. Continuous passaging of the C-strain-based recombinant viruses in PK-15 cells could enhance its in vitro adaption. The non-synonymous mutations at 3310 and 3531 might play major roles in the enhanced capacity of general virus reproduction. Such findings may help design a modified C-strain for improved productivity of commercial vaccines at reduced production cost.
Thirty-day-old piglets were intranasally or subcutaneously inoculated with 2ml of Aujeszky's disease virus, NYJ-1 strain, at the titer of $10^{6.75}$$TCID_{50}/0.1ml$, that was isolated from the diseased piglets in Korea, and histopathological studies were performed to elucidate the pathognomonic characters of the isolate. Results obtained through the experiments were as follows: 1. Major clinical signs on the 2nd and 3rd days post inoculation (p.i.) were fever, anorexia and dyspnea. On the 6th and 7th days p.i., nervous signs, severe dyspnea and salivation were observed in the group of intranasal inoculation, and one out of 3 piglets in this group died on the 7th day p.i.. General signs were more severe in the group of intranasal inoculation than the group of subcntaneous injection. Between the 8th and l0th days p.i., the signs subsided and the piglets were completely recovered from the illness. 2. Hematologically, most of the inoculated pigs showed a mild lymphocytopenia on the 5th and 6th days p.i.. 3. By necropsy, swelling and hemorrhagic lesions were observed in tonsil, central nervous system and lung. No specific changes were grossly found in other parenchymatous organs. 4. In histopathological study, degeneration and necrosis of nervous cells, non-suppurative meningoencephalitis, diffuse or focal gliosis, perivascular cutting and degeneration of ganglion cells were observed in central nervous system, and swelling and hemorrhagic changes were shown in the tissues of liver, lung and lymph nodes. 5. By indirect immunofluorescence antibody assay using ADV-monoclonal antibody, specific ADV antigens were detected in the tissues of tonsil, brain and spleen of the succumbed piglet. However, in the experimentally slaughtered piglets, the specific reactions were noted only in the tonsils.
Fish culture is constantly threatened by various infectious diseases which are largely transmitted by water. Plasma technology is being used to sterilize polluted water in many industries. In this study, two bacterial pathogens Aeromonas salmonicida and Streptococcus iniae, and a virus (viral hemorrhagic septicemia virus, VHSV) were subjected to plasma water that was produced by a corona discharge system. Growth of A. salmonicida was greatly inhibited from 105.61 CFU/ml in positive control to 103.51 CFU/ml in treated group by only 60 sec contact with plasma water. Similarly, S. iniae was inhibited from 105.85 CFU/ml to 103.40 CFU/ml. VHSV titer also decreased from 104.1 TCID50/ml to 101.45 TCID50/ml by the same treatment. Activation of water by the plasma was confirmed by the existence of ozone in the plasma water. These results suggest that plasma water could efficiently disinfect fish pathogens, possibly by the action of reactive oxygen species contained in the plasma water.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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