• 한국수산과학회지
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• 제41권1호
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• pp.7-12
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• 2008

To develop a whitening agent, cytotoxicity of the soluble collagen isolated from Todarodes pacificus (CIT) was evaluated. CIT tested for cytotoxicity on human dermal fibroblast (CCD-986sk) was exhibited very low cytotoxicity. Because tyrosinase is the key enzyme for melanin biosynthesis, the use of various tyrosinase inhibitors is a common practice for whitening purpose in cosmetics. Tyrosinase inhibitory activity and melanin production assay were measured to confirm the whitening effect. The inhibitory effect of MMP-1 in UV-irradiated human dermal fibroblast was also performed. CIT showed strong inhibition potency on tyrosinase by 51.5% at 0.2 mg/mL which increased the inhibition by increasing the concentration of CIT, and showed 69.1% inhibition at 1.0 mg/mL. CIT showed strong inhibition effect on melanin production with 82% at 1.0 mg/mL. The CIT also reduced about 76% expression of MMP-1 in UV-irradiated CCD-986sk cell at 1.0 mg/mL. From the preliminary observations, we suggest that the collagen isolated from CIT could be a potential source of natural skin-whitening and anti-aging agents for the photo-damaged skin.

• KSBB Journal
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• 제19권6호
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• pp.437-440
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• 2004

치자 열매 추출물로부터 미백제 개발을 위해 항산화, 항균, 항암 등 생리활성을 가지는 치자로부터 tyrosinase 효소활성 저해와 B16F10 melanoma cell을 이용한 melanogenesis 억제 효과를 실험하였다. Tyrosine을 기질로 사용하여 ethanol, hexane, chloroform, ethyl acetate 용매 및 증류수 추출물에 대한 tyrosinase 효소 저해활성을 실험한 결과 에탄올 추출물 ($81.5{\pm}1.6\%$)이 증류수 추출물 ($62.7{\pm}0.4\%$)보다 더 우수한 효과를 보여주었다. Ethyl acetate 분획물의 tyrosinase 효소활성 저해율은 다른 유기용매 분획물보다 현저히 우수한 $99.7{\pm}0.1\%$나타내었으며, 현재 tyrosinase 저해제로 개발된 arbutin ($97.8{\pm}1.2\%$)과 유사한 저해활성을 보였다. B16F10 melanoma cell을 이용한 melanogenesis 억제 효과에서도 에탄올 추출물이 증류수 추출물보다 우수한 억제활성을 보여 주었다. Ethyl acetate 분획물을 사용하였을 경우, melanogenesis 억제 효과가 다른 분획물보다 현저히 우수하였다. 이상의 실험결과는 치자 추출물의 미백원료로서 사용 가능성을 보여주었다.

• KSBB Journal
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• 제19권2호
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• pp.118-124
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• 2004

본 연구에서는 효모에서 분리한 melanoston이라고 명명된 멜라닌 생성을 억제하는 물질의 작용 기전을 밝히기 위한 것이다. $\alpha$-MSH를 처리한 B16 melanoma 세포에서 melanoston은 tyrosinase mRNA 발현양을 10% 정도 저해되는데 그쳤으며 western blotting을 이용한 단백질 측정에서도 이와 비슷한 정도의 단백질 생성 억제를 보였다. 그러나 B16 세포 배양액에 melanoston을 첨가할 경우 세포내 tyrosinase 활성이 33% 까지 감소되는 것으로 나타나 metanoston이 tyrosinase inhibitor는 아니지만 세포내 tyrosinase 활성화 (activation) 과정을 억제하는 것으로 추측할 수 있었다. 또한 광학 현미경을 이용한 morphology 관찰에서 $\alpha$-MSH를 처리한 세포에서는 많은 dentrite가 형성되면서 세포분화가 일어나는 반면 melanoston를 처리한 경우에는 dendrite가 감소하면서 세포형태가 대조군과 비슷하게 회복 되는 것을 알 수 있었다. 또 FITC-anti-tyrosinase-Ab를 이용한 형광 염색을 통해서는 $\alpha$-MSH만 처리한 세포에서는 tyrosinase의 분포가 dendrite를 포함한 세포 전체로 퍼져나가는 것을 관찰할 수 있었고 $\alpha$-MSH와 melanoston을 동시에 처리한 세포에서는 대조군과 비슷하게 tyrosinase가 핵 주변에서만 관찰되어 melanoston이 B16 melanoma 세포의 분화과정에서 이를 억제하는 효과를 주고 있음을 알 수 있었다. 이상의 결과들을 종합해 볼 때 melanoston은 $\alpha$-MSH에 진행되는 B16 세포의 분화를 억제하고 이 과정에서 멜라닌 생성의 주된 효소인 tyrosinase의 활성화를 억제하며 결과적으로는 멜라닌 생성을 저해하는 것으로 사료된다.

• Korean Journal of Acupuncture
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• 제37권1호
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• pp.24-30
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• 2020

Objectives : The purpose of this study was to investigate melanogenesis inhibition of ethanol extract of Polyporus (EP) by using B16F10 melanoma cells. Methods : We measured antioxidant effect of EP by using 1,1-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay and we confirmed melanin contents and tyrosinase activity of EP in cells. Additionally, the expression of tyrosinase-related protein-1 (TRP-1) and TRP-2 was observed by Western blot. Results : EP showed significantly high radical scavenging activity and inhibition of melanogenesis in dose-dependent manner by decreasing cellular tyrosinase activity and melanin content with or without α-melanin stimulating hormone. TRP-1 and TRP-2 expressions were also suppressed by EP in B16F10 cells. Conclusions : These results suggest that EP inhibits the melanogenesis and it could be a new organic ingredient for hyper-pigmentation.

• 약학회지
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• 제48권6호
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• pp.374-378
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• 2004

To investigate the whitening activity of Laminaria japonicus, we measured the effect of hot-water extracts on melanin production in B16 melanoma cells. Melanocyte stimulating h ormone (MSH, $1{\mu}M$)-stimulated melanin production in B16 melanoma cells was significantly inhibited by fucoidan and hot-water extracts, but not by alginate. The purified tyrosinase activity was not affected by hot-water extracts, alginate and fucoidan. However, tyrosinase expression was significantly inhibited by fucoidan and hot-water extract in Western blot. These results suggest that inhibitory mechanism of hot-water extracts on melanin production may be due to the inhibition of tyrosinase expression but not to direct inhibition of tyrosinase, such an effect of which may be dependent on fucoidan.

• 대한화장품학회:학술대회논문집
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• 대한화장품학회 2003년도 IFSCC Conference Proceeding Book II
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• pp.479-479
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• 2003

We investigated the tyrosinase inhibitory effect using whitening materials such as arbutin, ethyl ascorbyl ether, glabridin, kojic acid, magnesium ascorbyl phosphate and ascorbic acid. Tyrosinase inhibition rate were determined varying the enzyme concentration, reaction time, reaction temperature and pH. The optimal conditions to measure the inhibitory efficacy were as follows. : enzyme concentration 1,500 or 2,000IU/mL, reaction time 15min(for the enzyme concentration 1,500 IU/mL) and l0min(for the enzyme concentration 2,000IU/mL), reation temperature 42$^{\circ}C$, pH 6.5. Under these conditions $IC_{50}$/ of arbutin, ethyl ascorbyl ether, glabridin, kojic acid, magnesium ascorbyl phosphate and ascorbic acid were calculated. In the case of magnesium ascorbyl phosphate, the inhibitory effect of tyrosinase was very low and the $IC_{50}$/ of magnesium ascorbyl phosphate could not be calculated. Other five materials showed good inhibitory effect of tyrosinase and can be used for the whitening materials.

• 한방재활의학과학회지
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• 제21권1호
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• pp.47-56
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• 2011

Objectives : This study was conducted to identify the antimicrobial anti-oxidative and tyrosinase inhibitory effect of three kinds of herbal plants, Polygonum cuspidatum, Chelidonii herba, Pharbitis nil L. naturally grown across the nation. Methods : To investigate in vitro anti-oxidative activity assay, antimicrobial effect and tyrosinase inhibitory activity, MeOH 80% extract, n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol and water fractions of herbal plants were tested by diphenylpicrylhydrazyl(DPPH) method. Results : Bsutanol fractions of each plants showed about 90% on anti-oxidative effect. In case of tyrosinase activity, ethlyacetate fraction of Polygonum cuspidatum showed a potent inhibition effect. In the antimicrobial effect, ethylacetate fraction of Polygonum cuspidatu, hexane fractions of Chelidonii herba and the methanol 80% extracts of Pharbitis nil L. exhibited inhibition effect significantly. Conclusions : In MeOH 80% extracts, we couldn't found any extracts or fractions which have antimicrobial, anti-oxidative and tyrosinase inhibitory activity, however ethylacetate fractions of Polygonum cuspidatum showed effects commonly in these three assay system.

• Korean Chemical Engineering Research
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• 제50권4호
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• pp.604-609
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• 2012

기능성화장품 소재로 사용하기 위한 후코이단의 특성 및 후코이단 분자량의 영향에 대해 연구하였다. 후코이단은 미역 포자엽에서 추출하였고 접촉글로우방전 전기분해(CGDE)방법에 의해 후코이단 분자량(35~160 kDa)을 조절하였다. 후코이단의 tyrosinase inhibition, 보습력, elastase 활성저해 효과와 항산화력(DPPH assay, radical scavenging)을 측정하여 화장품으로서 가능성을 확인하였다. 후코이단의 보습력은 최고의 보습제 중의 하나인 히아루론산의 보습력보다 높았고, 분자량이 감소함에 따라 보습력이 약간 증가하였다. 주름개선 효과실험인 elastase 활성저해 효과 실험결과 표준 비교물질인 adenosine 보다 높은 elastase 활성저해 효과를 보였다. 최고의 tyrosinase 저해효과, elastase 활성저해 효과, 항산화력(DPPH assay, radical scavenging)을 갖는 후코이단의 분자량은 100 kDa이었다.

• 한국자원식물학회지
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• 제26권5호
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• pp.645-651
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• 2013

시설오이로 많이 재배되고 있는 4 품종을 선발하여 생육단계별로 총 페놀 및 플라보노이드 함량, 피부염증과 가려움증 관련 Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Malassezia furfur균에 대한 항균효과 그리고 tyrosinase 억제 활성에 대하여 비교 분석하였다. 총 페놀 함량은 장죽청장과 장형낙합 품종에서 늘푸른청장과 신조은백다다기 품종에 비해 상대적으로 다소 높게 나타났으며, 생육단계별로는 대부분 수확기에 이른 5단계에서 높은 함량을 보였다. 총 플라보노이드 함량은 조사된 오이 4품종 모두 생육단계별로 큰 차이를 나타내지는 않았다. 항균활성은 Staphylococcus aureus균에서는 장형낙합 품종이 모든 생육단계에서 상대적으로 높은 활성을 보였으며, Staphylococcus epidermidis균에서는 생육단계 및 품종에 따라 저해환이 8~12 mm로 항균성에 차이를 나타냈다. 또한 Malassezia furfur균에서는 장죽청장에서 항균활성이 높게 나타났으며, 특히 생육 3, 4단계에서는 저해환이 14 mm로 형성되어 가장 높은 항균효과를 보였다. 전체적으로 오이의 항균성은 Staphylococcus aureus균에서 비교적 높은 것을 확인할 수 있었다. 오이 추출물의 tyrosinase 억제 활성은 장축청장과 신조은백다다기 품종에서 상대적으로 높은 활성을 보였으며, 다음으로 장형낙합 품종에서 비교적 높게 나타났지만, 늘푸른청장의 경우는 상대적으로 낮은 활성을 보였다. 또한 생육초기보다 수확기에 이르렀을 때 모든 품종에서 tyrosinase 억제 활성이 다소 높게 나타났다. 본 실험의 결과, 피부상재균 및 비듬균에 대한 오이의 항균성과 미백효능을 확인함으로서 향후 고부가가치 향장소재로서의 이용성을 더욱 증대시킬 수 있을 것으로 기대된다.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제34권2호
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• pp.296-304
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• 2017

구아바 잎 추출물이 미백 기능성 화장품 소재로써의 활용 가능성을 확인하고자 하였다. DPPH radical 소거 활성, 세포 내 ROS 측정, B16F10 melanoma cell 에서의 세포 독성 및 자외선A에 대한 세포 보호효과, 시험관 내 tyrosinase 억제 효과, 멜라닌 생합성 억제 효과를 측정하였다. 구아바 잎 추출물의 높은 DPPH radical 소거 활성과, 세포 내 ROS 활성 억제 측정을 통해 항산화 효과를 확인하였다. B16F10 melanoma cell에서의 세포 생존율이 모든 농도에서 98% 이상의 생존율을 나타냈으며, UVA로부터의 세포 보호효과가 농도 의존적으로 높아지는 것을 확인하였다. 또한 10%의 시험관 내 tyrosinase 활성 억제 효과와 20%의 멜라닌 생합성 억제 효과를 확인되었다. 구아바 잎 추출물은 B16F10 melanoma cell에 대한 독성이 적고, 높은 항산화 활성과 tyrosinase 활성 억제 및 멜라닌 생합성 억제 효과를 통해 안전하고 우수한 미백 효과를 가진 미백 기능성 화장품 소재로써의 개발 가능성을 확인하였다.