Hyun-Joong Kim;Younsik Jung;Mi-Ju Kim;Hae-Yeong Kim
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.33
no.11
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pp.1457-1466
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2023
Enteric fever is caused by typhoidal Salmonella serovars (Typhi, Paratyphi A, Paratyphi B, and Paratyphi C). Owing to the importance of Salmonella serovars in clinics and public hygiene, reliable diagnostics for typhoidal serovars are crucial. This study aimed to develop a novel diagnostic tool for typhoidal Salmonella serovars and evaluate the use of human blood for clinically diagnosing enteric fever. Five genes were selected to produce specific PCR results against typhoidal Salmonella serovars based on the genes of Salmonella Typhi. Heptaplex PCR, including genetic markers of generic Salmonella, Salmonella enterica subsp. enterica, and typhoidal Salmonella serovars, was developed. Typhoidal Salmonella heptaplex PCR using genomic DNAs from 200 Salmonella strains (112 serovars) provided specifically amplified PCR products for each typhoidal Salmonella serovar. These results suggest that heptaplex PCR can sufficiently discriminate between typhoidal and non-typhoidal Salmonella serovars. Heptaplex PCR was applied to Salmonella-spiked blood cultures directly and provided diagnostic results after 12- or 13.5-h blood culture. Additionally, it demonstrated diagnostic performance with colonies recovered from a 6-h blood culture. This study provides a reliable DNA-based tool for diagnosing typhoidal Salmonella serovars that may be useful in clinical microbiology and epidemiology.
Non-typhoidal Salmonella serovars remain a potential threat to human health and many animals including beef cattle, broiler chickens, and pigs which possible sources of non-typhoidal salmonellosis in human. In this study, the cecal contents of slaughtered pigs were examined for Salmonella serovar prevalence. The characteristics of the isolates, including antimicrobial resistance patterns and virulence genes, were studied along with the reference strain S typhimurium ATCC 13311. Out of 640 sample, 137 Salmonella(21.4%) were isolated and their serovar were identified S typhimurium 83 strains(60.6%), S agona 10 strains(7.3%), S schwarzengrund 4 strains(2.9%), S derby 4 strains(2.9%), S ayinde 1 strains(0.7%), and untypable 35 strains(25.5%). All 83 S typhimurium strains(100%) were multi-drug resistance to at least 7 antibiotics, and 20 strains(24.1%) of 83 isolates were R-type ACSSuT. Examination of virulent gene by PCR revealed that 73 S typimurium field isolates(88%) have a invA gene and 24 strains(28.9%) have a spvC gene. Consequently, S typhimurium infection in slaughtered pigs was relatively to appear high prevalence in their herds which suggested that it should be necessary for herd health monitoring and surveillance.
Distribution of Salmonella enterica serovars and their associated virulence determinants is wide-spread among food animals, which are continuously implicated in periodic salmonellosis outbreaks globally. The aim of this study was to determine and evaluate the diversity of five Salmonella serovar virulence genes (invA, pefA, cdtB, spvC and iroN) isolated from food animals and humans. Using standard microbiological techniques, Salmonella spp. were isolated from the feces of humans and three major food animals. Virulence determinants of the isolates were assayed using PCR. Clonal relatedness of the dominant serovar was determined via pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) using the restriction enzyme, Xbal. Seventy one Salmonella spp. were isolated and serotyped into 44 serovars. Non-typhoidal Salmonella (NTS; 68) accounted for majority (95.8%) of the Salmonella serovars. Isolates from chicken (34) accounted for 47.9% of all isolates, out of which S. Budapest (14) was predominant (34.8%). However, the dominant S. Budapest serovars showed no genetic relatedness. The invA gene located on SPI-1 was detected in all isolates. Furthermore, 94% of the isolates from sheep harbored the spvC genes. The iroN gene was present in 50%, 100%, 88%, and 91% of isolates from human, chicken, sheep, and cattle, respectively. The pefA gene was detected in 18 isolates from chicken and a single isolate from sheep. Notably, having diverse Salmonella serovars containing plasmid encoded virulence genes circulating the food chain is of public health significance; hence, surveillance is required.
Salmonella enterica serovar Typhimurium isolate HJL777 is a virulent bacterial strain in pigs. The high rate of salmonella infection are at high risk of non-typhoidal salmonella gastroenteritis development. Salmonellosis is most common in young pigs. We investigated changes in gut microbiota and biological function in piglets infected with salmonella via analysis of rectal fecal metagenome and intestinal transcriptome using 16S rRNA and RNA sequencing. We identified a decrease in Bacteroides and increase in harmful bacteria such as Spirochaetes and Proteobacteria by microbial community analysis. We predicted that reduction of Bacteroides by salmonella infection causes proliferation of salmonella and harmful bacteria that can cause an intestinal inflammatory response. Functional profiling of microbial communities in piglets with salmonella infection showed increasing lipid metabolism associated with proliferation of harmful bacteria and inflammatory responses. Transcriptome analysis identified 31 differentially expressed genes. Using gene ontology and Innate Immune Database analysis, we identified that BGN, DCN, ZFPM2 and BPI genes were involved in extracellular and immune mechanisms, specifically salmonella adhesion to host cells and inflammatory responses during infection. We confirmed alterations in gut microbiota and biological function during salmonella infection in piglets. Our findings will help prevent disease and improve productivity in the swine industry.
Evie Khoo ;Roseliza Roslee ;Zunita Zakaria;Nur Indah Ahmad
Journal of Veterinary Science
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v.24
no.6
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pp.82.1-82.12
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2023
Background: The current conventional serotyping based on antigen-antisera agglutination could not provide a better understanding of the potential pathogenicity of Salmonella enterica subsp. enterica serovar Brancaster. Surveillance data from Malaysian poultry farms indicated an increase in its presence over the years. Objective: This study aims to investigate the virulence determinants and antimicrobial resistance in S. Brancaster isolated from chickens in Malaysia. Methods: One hundred strains of archived S. Brancaster isolated from chicken cloacal swabs and raw chicken meat from 2017 to 2022 were studied. Two sets of multiplex polymerase chain reaction (PCR) were conducted to identify eight virulence genes associated with pathogenicity in Salmonella (invasion protein gene [invA], Salmonella invasion protein gene [sipB], Salmonella-induced filament gene [sifA], cytolethal-distending toxin B gene [cdtB], Salmonella iron transporter gene [sitC], Salmonella pathogenicity islands gene [spiA], Salmonella plasmid virulence gene [spvB], and inositol phosphate phosphatase gene [sopB]). Antimicrobial susceptibility assessment was conducted by disc diffusion method on nine selected antibiotics for the S. Brancaster isolates. S. Brancaster, with the phenotypic ACSSuT-resistance pattern (ampicillin, chloramphenicol, streptomycin, sulphonamides, and tetracycline), was subjected to PCR to detect the corresponding resistance gene(s). Results: Virulence genes detected in S. Brancaster in this study were invA, sitC, spiA, sipB, sopB, sifA, cdtB, and spvB. A total of 36 antibiogram patterns of S. Brancaster with a high level of multidrug resistance were observed, with ampicillin exhibiting the highest resistance. Over a third of the isolates displayed ACSSuT-resistance, and seven resistance genes (β-lactamase temoneira [blaTEM], florfenicol/chloramphenicol resistance gene [floR], streptomycin resistance gene [strA], aminoglycoside nucleotidyltransferase gene [ant(3")-Ia], sulfonamides resistance gene [sul-1, sul-2], and tetracycline resistance gene [tetA]) were detected. Conclusion: Multidrug-resistant S. Brancaster from chickens harbored an array of virulence-associated genes similar to other clinically significant and invasive non-typhoidal Salmonella serovars, placing it as another significant foodborne zoonosis.
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