• 한국식품영양과학회지
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• 제25권5호
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• pp.831-838
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• 1996

STZ 유발 당뇨쥐에 날메밀, 볶은메밀, 찐메밀을 식이의 50%가 되도록 각각 혼합한 메밀식 이를 급여하여 2주간 사육시킨 후 변의 단백질 함량, 췌장무게, 췌장의 $\alpha-amylase,$ chymotrypsin, lipase환성 및 변의 $\alpha-amylase,$ chymotrypsin, trypsin 활성을 각각 측정하였다. 변중 단백질 함량은 당뇨대조군에 비하여 당뇨날메밀군, 당뇨볶은메밀군, 당뇨찐메밀군에서 각각 99%, 91%, 103% 유의적으로 증가하였으며 , 췌장 무게는 당뇨대조군과 비교하여 당뇨날메밀군에서 24% 유의적으로 증가하였다. 췌장의 $\alpha-amylase$ 및 lipase 환성은 당뇨대조군과 당뇨메밀군들 사이에 유의적인 차이가 없었으나 chymotrypsin 활성은 당뇨찐메밀군에서 45% 유의적으로 감소하였다. 변의 $\alpha-amylase활성은$ 당뇨대조군과 당뇨메밀군들 사이에 유의적인 차이가 없었으나, chymotrypsin 활성은 모든 당뇨메밀군들에서, trypsin 활성은 당뇨볶은메밀군에서 유의적으로 증가하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제28권12호
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• pp.2079-2094
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• 2018

Sunflower trypsin inhibitor (SFTI) is a 14-amino-acid bicyclic peptide that contains a single internal disulfide bond. We initially constructed chimeras of SFTI with N-terminal secretion signals from the Escherichia coli OmpA and Pseudomonas aeruginosa ToxA, but only detected small amounts of protease inhibition resulting from these constructs. A substantially higher degree of protease inhibition was detected from a C-terminal SFTI fusion with E. coli YebF, which radiated more than a centimeter from an individual colony of E. coli using a culture-based inhibitor assay. Inhibitory activity was further improved in YebF-SFTI fusions by the addition of a trypsin cleavage signal immediately upstream of SFTI, and resulted in production of a 14-amino-acid, disulfide-bonded SFTI free in the culture supernatant. To assess the potential of the secreted SFTI to protect the ability of a cytotoxic protein to kill tumor cells, we utilized a tumor-selective form of the Pseudomonas ToxA (OTG-PE38K) alone and expressed as a polycistronic construct with YebF-SFTI in the tumor-targeted Salmonella VNP20009. When we assessed the ability of toxin-containing culture supernatants to kill MDA-MB-468 breast cancer cells, the untreated OTG-PE38K was able to eliminate all detectable tumor cells, while pretreatment with trypsin resulted in the complete loss of anticancer cytotoxicity. However, when OTG-PE38K was co-expressed with YebF-SFTI, cytotoxicity was completely retained in the presence of trypsin. These data demonstrate SFTI chimeras are secreted in a functional form and that co-expression of protease inhibitors with therapeutic proteins by tumor-targeted bacteria has the potential to enhance the activity of therapeutic proteins by suppressing their degradation within a proteolytic environment.

• Investigative Magnetic Resonance Imaging
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• 제8권2호
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• pp.100-108
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• 2004

목적 : Trypsin으로 관절연골의 변성을 인공적으로 유도한 뒤 관절연골의 구성성분인 glycosaminoglycan(GAG)의 소실을 생화학적으로 정량분석하고 $Gd(DTPA)^{2-}$-(gadolinium diethylene triamine pentaacetic acid)조영증강, 그리고 T1, T2, rho 이완시간등과 어떤 상관관계가 있는지를 조사함으로써 관절연골의 초기 퇴행성 변화에 대해서 자기공명영상(MRI)으로 관찰이 가능한 지를 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : 적출된 3개의 돼지 슬개골에서 실험에 사용될 관절연골조각을 폭 8 mm, 길이 10 mm 크기의 관절연골조각을 3개 만들었다. 분광광흡수계(spectrophotometry)에서 dimethylmethylene blue를 이용한 chondroitin sulfate standard의 흡수도를 측정하여 GAG을 정량분석 하였다. 관절연골을 배양할 용액은 0.2 mg/ml trypsin, 1 mM $Gd(DTPA)^{2-}$ 첨가된 trypsin, 그리고 대조군용 인산염완충식염수(phosphate buffered saline, PBS)의 3가지를 준비하였다. 배양시간은 1시간에서 5시간까지는 매시간마다 배양하였고 24시간과 48시간까지 배양하였다. MRI촬영은 1시간에서 5시간까지만 매시간마다 배양후 시행하였다. 1.5T 기기에서 MRI촬영은 T1강조영상(TR/TE, 450/22)과 혼합에코기법(mixed echo sequence) (TR/TE, 760/21-168, 8 echoes)등을 시행하였다. 모든 촬영에서 영상영역은 50 mm, 절편두께는 2 mm, 그리고 매트릭스는 $256\times512$ 였다. MRI촬영자료에서 관절연골부위를 픽셀단위로 비교분석 하였다. 배양이 끝난 관절연골은 hematoxylin & eosin, toluidine blue, alcian blue, trichrome 염색 등을 시행하여 관찰하였다. 결과 : Dimethylmethylene blue를 이용한 GAG의 정량분석결과 배양시간증가에 따라 GAG의 농도가 비례적으로 증가하였다. $Gd(DTPA)^{2-}$ 첨가된 trypsin배양에서 관절연골의 T1 강조 영상에서의 신호강도는 trypsin 배양에 비하여 평균 $42.0\%$ 증가하였고 4시간과 5시간배양에서는 trypsin에서만 배양한 관절연골에 비하여 신호강도가 더욱 뚜렷하게 증가되었다 (p<0.05). 관절연골의 T1, T2, rho 이완시간은 배양시간에 따라 유의성 있는 차이가 관찰되지 않았으나 $Gd(DTPA)^{2-}$ 첨가된 trypsin배양에서 T1이완시간의 증가가 관절연골의 표층부와 이행부에서 측정되었다. 조직검사결과 trypsin 배양의 관절연골에서 toluidine blue와 alcian blue염색에서 결손이 관찰되었다. 결론 : Trypsin 배양시간에 따라 관절연골의 GAG결손을 정량적으로 확인할 수 있었고 픽셀크기 $97.9\times195\;{\mu}m$인 MRI로 $Gd(DTPA)^{2-}$-조영증강 및 이완시간을 측정할 수 있었다. 배양시간에 따른 GAG결손은 T1, T2, rho 이완시간보다 $Gd(DTPA)^{2-}$-조영증강에서 유의한 차이를 관찰할 수 있었다. 그러므로 관절연골의 초기 퇴행성 변화를 진단하는 데는 T1강조영상에서 $Gd(DTPA)^{2-}$-조영증강정도를 비교하는 것이 가장 유용할 것으로 사료된다.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제5권3호
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• pp.223-227
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• 1997

The protective effect of human urinary trypsin inhibitor(UTI) on acute hemorrhagic shock in beagle dog was studied. Hemorrhagic shock was experimentally induced in thoracotomized beagle dogs by removing blood and maintaining low arterial blood pressure for 30 min, and then blood removed was entirely transfused back into the dogs within one hour. When the blood was transfused, UTI was administered together to check the potential protective effect of UTI on hemorrhagic shock. The arterial blood pressure recovery was accelerated slightly by UTI treatment. Blood pH and $P_{a co2}$ returned to normal level in shorter time in the UTI treatment group. These data suggest that UTI may have protective effects on experimentally induced hemorrhagic shock.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1996년도 춘계학술대회
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• pp.165-165
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• 1996

균의 감염에 의해 유도되는 패혈성 shock는 균이 분비하는 elastase가 관여하며, 외부에서 serine pretense inhibitor의 biopolymer의 투여로 균에 의해 유도된 패혈성 shock를 억제시킬 수 있다고 보고되고 있다. 이에 본 연구진은 패혈성 치료제의 개발의 목적으로, 국내에서 민간 약으로 많이 이용되고 있는 백편두로부터 새로운 elastase inhibitor를 분리, 정제하여 부분 아미노산 서열 및 특성을 조사하였기에 발표하고자 한다. 백편두 추출액을 여러 차례에 걸쳐 column chromatography을 수행하면서 얻어지는 각 fraction에 대하여 elastase MCA-기질 및 trypsin MCA-기질을 이용하여 활성 측정 후 elastase 기질 및 trypsin 기질에 대하여 활성을 억제하는 fraction들을 모아 $C_{18}$ open column chromatography 및 $C_{18}$ HPLC 과정을 수행하여 2종류의 trypsin 활성 억제 물질과 1종류의 elastase inhibitor를 분리, 정제하여 각각을 Ti1, Ti2 및 Ti3로 명명하였다. 전기영 동 상에서 단일 hand를 확인한 후 각각의 inhibitor들의 부분 아미노산 서열을 결정하였다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제4권4호
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• pp.25-28
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• 1971

The effects of additives for food and drug upon the tryptic hydrolysis of casein an a Synthetic substrate, $N^{\alpha}-Benzoyl-L-arginine$ ethylester (BAEE) in vitro has been studied. The results of this study were summarized as follows 1) It was found that the action of inhibition became stronger in the following order: Methyl parabene>Rose Bengal> Phloxine> Sod. DHA> Erythrosine by the colorimetric method using BAEE. These results also showed that other additives had no effect on the activity of trypsin. 2) All samples tested showed respectively same tendency using casein in this method. But the activity by Erythrosine and Sod. DHA was slightly increased in this experiment.

• 한국식품영양과학회지
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• 제22권1호
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• pp.68-72
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• 1993

한국산 꾸지뽕나무 잎을 추출하여 생리활성 및 flavonoid 성분의 함량을 HPLC로 정량하였다. MeOH중 EtOAc 및 n-BuOH분획은 trypsin 효소활성 저해능을 나타내므로서 항염증활성 성분은 이 분획에 있을 것으로 사료되며, 또한 EtOAc분획은 Staphylococcus aureus에 대한 항균효과도 있음을 발견하였다. EtOAc 분획에서 kaempferol 7-O-$\beta$-D-glucopyranoside 성분을 분리하여 MeOH 엑스중 함량을 측정한 결과 0.31%(w/w)함유되어 있음을 알 수 있었다.

• Journal of Pharmaceutical Investigation
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• 제5권4호
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• pp.24-31
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• 1975

This paper attempts to investigate the effect of proteolytic enzyme on the absorption and excretion of pyrazinamide. The rat small intestinal absorption of pyrazinamide in the presence of proteolytic enzyme such as chymotrypsin and compounding enzyme (chymotrypsin and trypsin) are increasingly absorbed, but in the trypsin are similar to that of control. Blood levels of pyrazinamide after rabbit's duodenum injection are significantly enhenced to correspond to 112-120% by proteolytic enzymes concentration respectively, but both on the high concentration of chymotrypsin and the low concentration of trypsin are insignificantly enhenced. Proteolytic enzymes do not give the effect on clearance of pyrazinamide. Proteolytic enzymes give the effect on absorption of pyrazinamide, but do not give the effect on excretion of pyrazinamide.

• 한국축산식품학회:학술대회논문집
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• 한국축산식품학회 2006년도 정기총회 및 제37차 춘계 국제학술발표대회
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• pp.269-271
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• 2006

Casein과 whey의 가수분해 물에 대한 항산화 능을 측정하기 위해 연구를 수행하였다. pH에 따른 Total antioxidant capacity(TAC)는 casein 및 whey 모두 pH 6.0 에서 보다 pH 7.4에서 더 높은 TAC 결과를 나타내었다. Casein이 whey보다 농도가 증가함에 따라 TAC 값이 증가하였으며 이는 배양시간이나 pH에 따른 TAC 측정에서와 같이 casein이 whey보다 더 높은 TAC 값을 나타내고 있으나, $2,000{\mu}g/mL$에서는 TAC 값이 감소하여 casein, whey 모두 유사한 TAC 값을 나타내었다. Trypsin에 의한 casein 및 whey의 가수분해는 반응 10분 이후부터는 NPN 량이 더 이상 증가하지 않았으며 casein보다 whey가 분해율이 낮았다. Trypsin처리한 casein과 whey의 TAC를 측정한 결과로서 trypsin 처리구가 무처리구에 비해 높은 TAC 결과를 나타내었다.

• Journal of Pharmaceutical Investigation
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• 제4권1_2호
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• pp.31-38
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• 1974

The effort of proteolytic enzyme on the absorption and excretion of sulfadimethoxine are investigated in this paper. The rat small intestinal absortion of sulfadimethoxine in the presence of proteolytic enzymes such as chymotrypsin and trypsin are increasingly absorbed more than 20% during 3 hours. Blood levels of sulfadimethoxine following oral administration are not effected by proteolytic enzyme, but both on the high concentration of chymotrypsin and the low concentration of trypsin at only 3 and 4 hours are increased(P<0.05) from that of the control . Blood levels of sulfadimethoxine after duodenum injection are remakably enhensed to correspand to 18.5-25.0% (P<0.01) by the proteolytic enzyme concentration respectively. Proteolytic enzymes did not give influence on excretions of sulfadimethoxine after duodenum and oral administration.