송이버섯[Tricholoma matsutake(S. Ito et Imai);Sing.]에서 polyphenol oxidase 조효소액(粗酵素液)을 추출(抽出), 그 성질(性質)을 조사(調査)하여 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. Trihydroxyphenol류(類)와 o-diphenol류(類)에 활성(活性)을 보였고 이들중 pyrogaroll이 최고활성(最高活性)을 보였으며 m-diphenol, p-diphenol 그리고 monophenol류(類)에서는 활성(活性)을 보이지 않았다. 최적(最適) pH는 4.0 부근이었고, 최적온도(最適溫度)는 $45{\sim}55^{\circ}C$였으며, 효소(酵素)의 활성(活性)이 $70^{\circ}C$에서 2분(分) 가열(加熱)로 완전(完全)히 실활(失活)되었다. $Cu^{++}$, $Fe^{++}$ 및 $Mg^{++}$은 $10^{-1}mM$이상(以上) 농도(濃度)에서는 효소력(酵素力)이 증가(增加)되었으나, 그 이상(以上)의 농도(濃度)에서는 오히려 저하(低下)되었다. 저해제(沮害劑)로는 Na-DETC, L-ascorbic acid, L-cysteine 및 NaCl이 양호(良好)하였다. pyrogaroll에 대한 km치(値)는 0.88mM이었다.
In order to optimize the extract condition and improve physiological activity of the extract form Tricholoma matsutake, experiments related to extraction methods, totale yield, content of total soluble polysaccharide, SOD-like activity, total polyphenol amount, and volatile flavor compound and the others were carried out, results were obtained as following: Compare with traditional hydrothermal extraction method (Hot water extraction : HWEW), it illustrates that the low temperature extraction method which combines a supersonic waves and microwave (Supersonic microwave extraction : SMEW) causes of increasing the total yield, total soluble polysaccharide. As to the anti-oxident effect, SMEW method leds to increasing of the SOD-like activity, total polyphenol amount as well. Also, cytotoxic effect and growth inhibitory effect against cancer cell line are much higher in SMEW method than HWEW method, especially SMEW5 extracts treated by supersonic 15 min. and microwave 120W, 3 min. and 2 times. The main volatile flavor compound and infinitesimal volatile flavor compound both increase significantly by SMEW method. It is concluded the main components of the volatile flavor compounds extracted from Tricholoma matsutake are 1-octen-3-0l, Methyl cinnamate, 2-octeno1 et al. alcohol typies. Consequently, SMEW5 method is considered as the most effective one for anti-oxidant and is prior to any other methods. And the optimun conditions of this method are : supersonic waves (supersonic, 25KHz, 50W) 15 minutes, microwave spectroscopy (microwave, 2,450MHz, 120W) 3 minutes, and every treatment is performed once followed twice repeats.
Cellulose 분해에 관련된 $\beta$-Glucosidase 효소 활성의 특성 파악을 위하여 송이균사(Tricholoma matsutake DGUM 26001)의 액체 배양시 세포외로 분비되는 $\beta$-Glucosidase 효소를 부분정제하여 그 특성을 조사하였다. 효소 활성에 미치는 적정 온도는 55-$70^{\circ}C$이었고 최적 온도는 $65^{\circ}C$이었다. 적정 효소활성에 영향을 주는 적정 pH는 3.0-5.0 범위였으며 최적 pH는 4.0이었다. Salicin을 기질로 최적 조건하에서 $\beta$-Glucosidase 효소의 비활성도는 18.7 unit/mg protein이었다. 열안정성은 $60^{\circ}C$이하의 온도에 60분간 열처리시 약 90%이상의 효소활성을 유지하였다. $Fe^{++}$이온은 효소활성을 촉진하였으나, $Hg^{++}$ 및 $Cu^{++}$이온은 효소활성을 매우 억제하였다. Salicin에 대한 효소활성을 100으로 하였을 때, cellobiose는 48.6%의 상대적 효소활성을 나타내었으며, cellobiose에 대한 Km값 및 Vmax값은 각각 0.12mM과 0.02umol/min었다.
Seo, Jong Beom;Choi, Ah Hyeon;Rusaati, Butoto Imani wa;Kang, Jun Won
농업과학연구
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제48권3호
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pp.493-503
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2021
Tricholoma matsutake (Pinus mushroom, PM) is one of the most valued ectomycorrhizal fungi in Asia because it is an expensive forest product with a unique flavor and taste. Therefore, many studies have tried to successfully cultivate Tricholoma matsutake artificially in Korea and other countries. However, its physiological and ecological characteristics are still unknown. Thus, we need to understand the diversity and clusters of microorganisms related to Tricholoma matsutake and to identify their core microorganisms related to their growth and production. In this study, we obtained an average of 11,661 fragments from three pine mushrooms with metagenome (an assemblage of genes of all microorganisms in the natural world) analysis from a pine forest located in Pohang, Gyeongsang-Bukdo. Of these, the valid reads were on average 5,073 per sample available for analysis, and the average length of a read was 456 bp. There were an average of 33.3 phyla in the metagenome analysis. Firmicutes phylum made up on an average 46% of the phyla and was dominant among the phyla. The next dominant phylum was Proteobacteria at 27% followed by Bacteroidetes at 17%, Actinobacteria at 5% and Verrucomicrobia at 2%. The Proteobacteria phylum consisted of the γ-proteobacteria class at 54% followed by β-proteobacteria at 37%, α-proteobacteria at 6%, δ-proteobacteria at 2% and ζ-proteobacteria at 0%. The metagenome consisted of the Ruminococcaceae family at 17% followed by Pseudomonadaceae at 13%, Burkholderiaceae at 7%, Bacteroidaceae at 7%, Lachnospiraceae at 7% and Clostridiaceae at 6%.
송이 감염묘법은 송이 인공재배 방법으로써 높은 잠재성을 가지고 있다. 본 연구실에서는 2001년부터 2004년까지 감염묘를 이식하였으며, 2006년에 확인된 생존율은 20%였다. 송이균이 생존한 이들 감염묘를 대상으로 2009년까지 송이균의 생장 특성과 균환 발달을 조사하였다. 송이균의 생장 크기는 $4\;cm{\times}\;cm$부터 $52\;cm\;{\times}\;35\;cm$ 까지 송이 감염묘 개체 간에 큰 차이를 보였다. 이러한 균환 크기의 다양성은 송이 감염묘의 생산 지역과 식재 지역 간의 환경적 차이에 기인하는 것으로 보인다. 송이 감염묘에서 송이균의 생장은 이식 초기에 곤봉 모양 또는 좁은 'V'자 형태(예각)로 자라던 것이 시간이 지남에 따라 좀 더 넓은 'V'자 형태(둔각)로 발전하였다. 본 조사를 통해 확인된 몇 개의 송이 감염묘의 균환으로부터 2010년 가을에는 송이 자실체가 발생할 것으로 기대된다.
본 연구에서는 담자균류의 일종인 Tricholoma matsutake의 균사체 생육과 polysaccharide 생산을 최적화하기 위하여 5L jar fermentor에서 교반속도와 통기량의 영향을 검토하였다. 교반속도는 150 rpm에서 가장 좋은 결과를 보였으며, 균체량은 배양 10일째 21.87 g/L, polysaccharide는 교반속도는 300 rpm에서 배양 8일째 8.86 g/L 로 가장 높은 값을 나타내다. 통기량은 11일째 0.5 vvm에서 가장 좋은 균체량 20.85 g/L, polysaccharide는 1.5vvm에서 배양 11일째 8.83 g/L로 가장 높은 값을 나타내었다.
The differences in the nonvolatile metabolites of pine-mushrooms (Tricholoma matsutake Sing.) according to different parts and heating times were analyzed by applying principal component analysis (PCA) to $^1H$ nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy data. The $^1H$ NMR spectra and PCA enabled the differences of nonvolatile metabolites among mushroom samples to be clearly observed. The two parts of mushrooms could be easily discriminated based on PC 1, and could be separated according to different heattreated times based on PC 3. The major peaks in the $^1H$ NMR spectra that contributed to differences among mushroom samples were assigned to trehalose, succinic acid, choline, leucine/isoleucine, and alanine. The content of trehalose was higher in the pileus than in the stipe of all mushroom samples, whereas succinic acid, choline, and leucine/isoleucine were the main components in the stipe. Heating resulted in significant losses of alanine and leucine/isoleucine, whereas succinic acid, choline, and trehalose were the most abundant components in mushrooms heat-treated for 3 min and 5 min, respectively.
Methyl trans-cinnamate is a significant flavor compound of Tricholoma matsutake. Attempts were made to produce this compound by culturing the mycelium using submerged culture. No methyl trans-cinnamate could be detected when the mycelium was cultured in the basal liquid medium. However, the addition of Pinus desiflora extracts to the medium, methyl trans-cinnamate was largely produced. To find out compounds or fractions inducing methyl trans-cinnamate, dichloromethane fraction obtained from the wood extracts of P. densiflora was subjected to column chromatography. Three sub-fractions were obtained from the $CH_2CI_2$ fraction. Submerged cultured mycelium treated with sub-fraction 1 has the highest content of methyl trans-cinnamate. Maximum methyl trans-cinnamate $(470.2{\mu}g/g)$ was obtained when the first sub-fraction of dichloromethane fraction of the P. densiflora wood extracts was added to the medium. This indicates that wood extracts of P. densiflora contains inducer of the methyl trans-cinnamate production in the T. matsutake submerged culture.
송이버섯 생육지의 소나무세근으로부터 내생균이 분리되었다. 분리된 내생균을 rDNA-ITS 영역으로 동정한 결과 18종이 확인 되었으며, 이중에는 자낭균류 15종, 털곰팡이 아문 3종이 포함되어 있음이 확인 되었다. 본 연구의 내생균 중에는 Penicillium속 균주가 가장 높은 빈도로 생육하고 있음이 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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