The ubiquitous family of 14-3-3 proteins functions as regulators in a variety of physiological processes. Eight rice 14-3-3 genes, designated OsGF14a through h, were identified from an exhaustive search of the genome database. Comparisons of deduced amino acid sequences reveal a high degree of identity among members of the OsGF14 family and reported Arabidopsis 14-3-3 proteins. A phylogenetic study indicates that OsGF14s contain both $\varepsilon$ and non-$\varepsilon$ forms, which is also confirmed by a structural analysis of OsGF14 genes. Furthermore, transcripts of OsGF14b, OsGF14c, OsGF14d, OsGF14e, OsGF14f and OsGF14g were detected in rice tissues. Their different expression patterns, the different effects of environmental stresses and plant hormones on their transcription levels, and the different complementary phenotypes in yeast 14-3-3 mutants not only indicates that OsGF14s are responsive to various stress conditions and regulated by multiple signaling pathways, but also suggests that functional similarity and diversity coexist among the members of OsGF14 family.
The mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascade is one of the major and evolutionally conserved signaling pathways and plays pivotal role in the regulation of stress and developmental signals in plants. Here, a novel gene, termed Gossypium hirsutum MAPK (GhMAPK), was isolated from cotton. The full-length cDNA of GhMAPK encodes for a 372 amino acid protein that contains all 11 of the MAPK conserved subdomains and the phosphorylationactivation motif, TEY. Amino acid sequence alignment revealed that GhMAPK shared high identity with group-C MAPK in plants and showed 83~89% similarities with MAPKs from Arabidopsis, apricot, pea, petunia, and tobacco. Southern blot analysis indicated that the GhMAPK belonged to a multygene family in cotton. Two introns were found within the region of genomic sequence. Northern blot analysis revealed that the transcripts of GhMAPK accumulated markedly when the cotton seedlings were subjected to various abiotic stimuli such as wounding, cold (4$^{\circ}C$), or salinity stress; Furthermore, GhMAPK was upregulated by the exogenous signaling molecules, such as salicylic acid (SA) and hydrogen peroxide ($H_2O_2C$), as well as pathogen attacks. These results indicate that the GhMAPK, which has a high degree of identity with group-C plant MAPKs, may also play an important role in response to environmental stresses.
Park, Soo-Young;Ryu, Sun-Hwa;Kwon, Suk-Yoon;Kim, Jong-Guk;Kwak, Sang-Soo
Journal of Plant Biotechnology
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v.30
no.2
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pp.135-141
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2003
Peroxiredoxin(Pix) are large family of peroxidases that reduce alkyl hydroperoxides and hydrogen peroxide. A cDNA clone (referred to as swPrxl) encoding Pix was from a sweetpotato cDNA library constructed from suspension-sultured cells, and its expression was investigated in terms of stress. The swPrxl contained an open reading frame (ORF) encoding mature protein of 193 amino acids with calculated molecular mass of 20.8kDa. The predicted amino acid sequence of swPrxl has two conserved cysteines that are essential resicues for the reduction of peroxides. It showed high amino acid sequence homology ot PixIIF of Arabidopsis (77%) and putative Prx of rice(72%). RNA gel-blot analysis showed that swPrxl gene was expressed dominantly in leave among intact tissues, and also highly detect in suspension-cultured cells. Interestingly, the level of swPrxl transcripts was almost the same regardless of the growth stage in suspension culture. Furthermore, the transcription level of swPrxl gene was not significantly changed in response to various stress treatments such as wounding, extreme temperature and stress-related chemicals RT-PCR analyses.
Although transforming growth factors (TGFs) are implicated in the process of endochondral ossification, which is initiated by the differentiation of mesenchymal cells into chondrocytes, it is not clear how $TGF-{\beta}3$ regulates the chondrogenic differentiation of limb bud mesenchymal cells. Here, differential display polymerase chain reaction (DD-PCR) screening and RT-PCR analysis revealed that transcripts of A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM 10) decreased during the chondro-inhibitory action of $TGF-{\beta}3$ on cultured chick leg bud mesenchymal cells. Electroporation of ADAM 10 morpholino antisense oligonucleotides inhibited the ectodomain shedding of delta-1, and cell proliferation and subsequent precartilage condensation, in a manner similar to that caused by $TGF-{\beta}3$. The suppression of mesenchymal cell proliferation induced by $TGF-{\beta}3$ and ADAM 10 morpholino antisense oligonucleotides was reversed by activation of ADAM 10 with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) or knockdown of Notch-1 with siRNA. Collectively, these data indicate that, in cultured chick leg bud mesenchyme cells, $TGF-{\beta}3$ downregulates ADAM 10 and inhibits cell proliferation and subsequent precartilage condensation by inhibiting the ectodomain shedding of delta-1, and that this results in the activation of Notch signaling.
Oligoadenylate synthetase (OAS) protein family is the major interferon (IFN)-stimulated genes responsible for the activation of RNase L pathway upon viral infection. OAS-like (OASL) is also required for inhibition of viral growth in human cells, but the loss of one of its mouse homolog, OASL1, causes a severe defect in termination of type I interferon production. To further investigate the antiviral activity of OASL1, we examined its subcellular localization and regulatory roles in IFN production in the early and late stages of viral infection. We found OASL1, but not OASL2, formed stress granules trapping viral RNAs and promoted efficient RLR signaling in early stages of infection. Stress granule formation was dependent on RNA binding activity of OASL1. But in the late stages of infection, OASL1 interacted with IRF7 transcripts to inhibit translation resulting in down regulation of IFN production. These results implicate that OASL1 plays context dependent functions in the antiviral response for the clearance and resolution of viral infections.
Spermatogenesis is known to be regulated by a number of genes and several factors such as hormones, growth factors, cytokines and others. This study was done to evaluate the relationship between HSPs and DAZ genes in human spermatogenesis; we observed the expression pattern of HSP gene in azoospermia men with DAZ gene that regulated the gene expression related with human spermatogenesis. RT-PCR method was used to detect DAZ, HSP70A, and HSP70B transcripts in all RNA samples. Total RNA was extracted from 21 testis tissues using TRIZOL reagent. cDNAs were synthesized with reverse transcriptase, AMV. All PCR reaction were performed on a PCR themocycler with DAZ, HSP70A, and HSP70B-specific primers. Semen analysis, karyotyping and testis histology were performed. DAZ gene, known as a candidate gene of azoospermia factor(AZF), was deleted in 2 of 21 patients. To evaluate the only effects of HSPs in this patients, 2 DAZ deleted cases were removed. We observed the mRNA of HSP70B in 5 whereas none could be seen with regard to HSP70A. Furthermore, the sperm of these 5 men were discovered to be immature. In conclusion, HSP70B as well ad DAZ gene seem to be involved causing spermatogenic failure. We suggest that HSP70B plays an important role in spermatogenesis and it is one of factors induced sperm maturation in human.
Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2005.11a
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pp.53-59
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2005
Sequences of candidate chicken testis-specific genes were analyzed in order to develop a resource for functional genomic studies of the testis and male germ cells. Tentative consensus sequences (TCs) containing ESTs expressed in testis libraries only were selected from the TIGR Gallus gallus Gene Index, resulting in a total of 292 TCs. The transcriptional expression of these genes were evaluated in a variety of chicken tissues, including testis and ovary, Of the panel of 292 TCs, 110 were expressed in a testis-specific manner. The correlation between the number of ESTs assembled into each TC and the number of testis-specific TCs was not significant. Annotation of the TCs using the Gene Ontology database terms showed that the proportion of testis-specific TCs that were classified as having catalytic activity (within the Molecular Function branch) was larger than the proportion of total chicken TCs classified in the same way. Our results might facilitate the investigation of testis-specific genes and their functional analysis in the chicken as well as in other avian species.
Razmkhah, Mahboobeh;Arabpour, Fahimeh;Taghipour, Mousa;Mehrafshan, Ali;Chenari, Nooshafarin;Ghaderi, Abbas
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.15
no.17
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pp.7201-7205
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2014
Chemokine and chemokine receptor expression by tumor cells contributes to tumor growth and angiogenesis and thus these factors may be considered as tumor markers. Here we aimed to characterize cells directly extracted from glioma, meningioma, and secondary brain tumors as well as non-tumoral cells in vitro. Cells were isolated from brain tissues using 0.2% collagenase and characterized by flow cytometry. Expression of SDF-1, CXCR4, CXCR7, RANTES, CCR5, MCP-1 and IP-10 was defined using flow cytometry and qRT-PCR methods. Brain tissue isolated cells were observed as spindle-shaped cell populations. No significant differences were observed for expression of SDF-1, CXCR4, CXCR7, RANTES, CCR5, and IP-10 transcripts. However, the expression of CXCR4 was approximately 13-fold and 110-fold higher than its counterpart, CXCR7, in meningioma and glioma cells, respectively. CXCR7 was not detectable in secondary tumors but CXCR4 was expressed. In non tumoral cells, CXCR7 had 1.3-fold higher mRNA expression than CXCR4. Flow cytometry analyses of RANTES, MCP-1, IP-10, CCR5 and CXCR4 expression showed no significant difference between low and high grade gliomas. Differential expression of CXCR4 and CXCR7 in brain tumors derived cells compared to non-tumoral samples may have crucial impacts on therapeutic interventions targeting the SDF-1/CXCR4/CXCR7 axis.
Park, Jihun;Son, Eunjee;Lee, Seonwoo;Nam, Jeonghee
Journal of the Korean Chemical Society
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v.61
no.5
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pp.251-262
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2017
The purpose of this study was to investigate characteristics of interaction in mentoring conversations and to examine how the interaction features change as mentor teachers have more mentoring experiences. Participants of this study were three mentor who have over 17 years' teaching experience and six beginning science teachers. For this study, one-to-one mentoring dialogue recordings and transcripts were collected and the dialogues were analyzed by utilizing an analytical framework of interaction. the result of analyzing characteristics of mentors' interaction shows that mentors used simple questions and support the most when they started mentoring conversation. the change of characteristics of mentor's interactions indicates three mentors tended to use more thought-provoking questions in the $2^{nd}$ year mentoring than in the $1^{st}$ year and as a result of it mentee's reflection and reflective practices were increased. Through mentors' interview, the mentors could have the opportunity to reflect their own mentoring and this means mentors' self reflection was provoked by means of the mentoring program.
D-type G1 cyclins are known to be crucial for the progression of mitotic cell cycle in mammals. Although many studies have been performed to elucidate the roles of D-type cyclins, it is largely unknown whether D-type cyclins are directly involved in the regulation of meiotic germ cell development. In the present study, we examined the expression patterns of D-type cyclins (cyclin D1 and D3) during male germ cell development by northern blot and in situ Hybridization analyses. In the adult testes, we detected a 4.2 kb cyclin D1 mRNA and two different sizes (2.3 kb and 1.8 kb) of cyclinD3 mRNAs. The short form of the cyclin D3 transcript was testis-specific. Along with the testicular development, expression of cyclin D3 mRNA was increased whereas cyclin D1 mRNA was gradually decreased. in situ hybridization study also revealed that the expression of cyclin D3 was restricted to the postmeiotic germ cells. Furthermore, the 2.3 kb transcript was highly expressed in the round spermatids and decreased in the elongated spermatids/residual bodies, while the 1.8 kb transcript was expressed in elongated spermatids/residual bodies more abundantly. Sucrose-gradient separation of polysomal RNA fractions demonstrated that some portions of the 2.3 kb transcript are translationally active, while the 1.8 kb transcript is likely to be inactive. Taken together, the present data suggest a functional importance of cyclin D3 expression in the differentiated postmeiotic male germ cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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