Park, Seung-Won;Kim, Seong Ryul;Goo, Tae-Won;Choi, Kwang-Ho
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제35권1호
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pp.39-44
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2017
The venome of Phoneutria nigriventer spider has been shown to have side effects including severe painful erections that last for hours. PnTx2-6, a toxin from P. nigriventer spider venom, modulates voltage gated $Na^+$ channels and activation of nitric oxide (NO) production. NO is essential for the regulation of blood flow and pressure. Therefore, PnTx2-6 is expected to be effective not only for erectile dysfunction but also for cardiovascular diseases. A previously has reported cDNA clone for PnTx2-6 toxin, which was expressed in E. coli cytoplasm. We created the same clone and expressed it in a bacterial expression system. PnTx2-6 increased the genes expression of superoxide dismutase 1, glutathione peroxidase 1, and sulfiredoxin 1. We hypothesized that recombinant PnTx2-6 may indirectly regulate blood flow and pressure, resulting in NO production in human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). These data suggest differential regulation of the vascular ageing process, which may contribute to the anatomic heterogeneity of atherosclerosis. The results of this study may be used for the emergency treatment of sudden cardiovascular disease caused by ageing.
The FimH subunit of type 1-fimbriated Escherichia coli has been determined as a major cause for urinary tract infections. In our previous study, the Adhesin/CTXA2B was expressed as soluble recombinant chimaeric protein derived from the uropathogenic Escherichia coli adhesin genetically coupled to cholera toxin A2B (CTXA2B) subunit in Escherichia coli. Since it is very important to optimize IPTG concentration and culture temperature to maximize cell growth and productivity, These optimal culture factors were determined to increase the productivity of the expressed Adhesin/CTXA2B chimaeric protein in Escherichia coli TB1 carrying pMALfimH/ctxa2b. Our data demonstrate that optimal concentration of IPTG for increased production of chimaeric protein was 0.5 mM. Additionally, culture time was 10 hours and temperature, 37${\circ}C$.
In view of the warmth and hunidity in Korea, there is little possibility to avoid the fungal contamination of rice soybean paste which are major foodstuffs in this country. In order to isolate aflatoxin producing fungi from these foodstuffs, 6 samples of rice were collected from the farmhouses at Cbangsung and 40 samples of soybean paste in Seoul areas. The peptone glucose chloramphenicol, Czapek-Dox agar and malt agar were used for the isolation and identification of fungi, and Adye and Meteles medium and/or Sahouraud medium for the production of toxins. The cultures for the toxin production were done at $25^{\circ}C$ for $5{\sim}7$ days. Eleven Penicillium species were isolated. from 6 samples of rice, and 37 Aspergillus flavus, 48 Aspergillus species, 1 Penicillium species and 105 others were isolated from 40 samples of soybean paste. Among these, one Penicillium species isolated from rice was found to be aflatoxin producing strain, and the toxin was quantitatively measured. Aflatoxin appeared to be more favorably produced in the glucose Sabouraud medium than in the Adye and Meteles medium.
Immunogenicity of Escherichia coli pilus and LT were evaluated in 20-week-old hens. The antigens were consisted of K88, K99, 987p pilus and heat labile toxin purified from enterotoxigenic Escherichia coli. The durations of antibody titers in sera and egg yolk were investigated by an enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). After first inoculation, antibody titers in sera reached at peak 2 weeks postinoculation. However, peak antibody titers in egg yolk were detected 4 weeks postinoculation, indicating that transfer of immunoglobulin from serum to egg yolk took about two weeks period. Although there were slight reduction in titers, the specific antibodies in egg yolk lasted up to 3 months. Immune responses against monovalent and combined antigens were showed as almost same patterns. The transfer rate of antibodies from serum to egg yolk didn't show any significant differences among three pilus antigens in this study. Considering the concentrations of antigens in each inoculated group, multivalent antigens containing heat labile toxin of E coli were found to be more immunogenic than monovalent antigen in producing specific antibodies. From this experiment, it was demonstrated that multivalent antigens containing three pilus and heat labile toxin could be a promising candidate for the production of egg yolk antibodies for prophylactic use in preventing swine colibacillosis in future.
대장균 O157:H7의 백신 생산을 위해서 purity가 높은 lipopolysacharride 분리, 정제를 위한 실험을 실시하였다. 대장균 O157:H7 균주를 확인하기 위해서 shiga toxin을 생산할 수 있는 60 MDa plasmid를 분리하였고, PCR법에 의해 E. coli O157:H7 shiga-like toxin(Stx) 1, 2의 stx gene을 증폭하여 E. coli O157:H7의 특징 (130 bp, 346 bp)을 확인하였다. E. coli O157:H7 LPS의 분리 정제는 페놀추출, 에탄올 분획 및 gel filtration의 간단한 방법을 사용하였다. 마지막으로 SDS-PAGE와 silver nitrate 염색을 이용하여 LPS의 purity를 확인하였다.
Bacillus thuringiensis microbial insecticide products have been applied worldwide. Although a few cases of B. thuringiensis foodborne illness have been reported, little is known about the toxigenic properties of B. thuringiensis isolates. The aims of this study were to estimate the pathogenic potential of B. thuringiensis selected from microbial insecticide products, based on its possession of toxin genes and production of enterotoxins. Fifty-two B. thuringiensis strains selected from four kinds of microbial insecticide products were analyzed. PCR assay for detection of toxin genes and immunoassay for detection of enterotoxins were performed. The hemolysin BL complex as a major enterotoxin was produced by 17 (32.7%), whereas the non-hemolytic enterotoxin complex was detected in 1 (1.9%) of 52 B. thuringiensis strains. However, cytK, entFM, and ces genes were not detected in any of the tested B. thuringiensis strains. The potential risk of food poisoning by B. thuringiensis along with concerns over B. thuringiensis microbial insecticide products has gained attention recently. Thus, microbial insecticide products based on B. thuringiensis should be carefully controlled.
Purpose: Cytolethal distending toxin (CDT) considered as a key factor of localized aggressive periodontitis, endocarditis, meningitis, and osteomyelitis is composed of five open reading frames (ORFs). Among of them, the individual role of CdtA and CdtC is not clear; several reports presents that CDT is an AB2 toxin and they enters the host cell via clathrin-coated pits or through the interaction with GM3 ganglioside. So, CdtA, CdtC, or both seem to be required for the delivery of the CdtB protein into the host cell. Moreover, recombinant CDT was suggested as good vaccine material and antibody against CDT can be used for neutralization or for a detection kit. Materials and Methods: We constructed the pET28a-cdtC plasmid from Aggregatibacter actinomycetemcomitans Y4 by genomic DNA PCR and expressed in BL21 (DE3) Escherichia coli system. We obtained the antibody against the recombinant CdtC in mice system. Using the anti-CdtC antibody, we test the native CdtC detection by ELISA and Western Blotting and confirm the expression time of native CdtC protein during the growth phase of A. actinomycetemcomitans. Results: In this study we reconstructed CdtC subunit of A. actinomycetemcomitans Y4 and generated the anti CdtC antibody against recombinant CdtC subunit expressed in E. coli system. Our anti CdtC antibody can be interacting with recombinant CdtC and native CDT in ELISA and Western system. Also, CDT holotoxin existed at 24h but not at 48h meaning that CDT holotoxin was assembled at specific time during the bacterial growth. Conclusion: In conclusion, we thought that our anti CdtC antibody could be used mucosal adjuvant or detection kit development, because it could interact with native CDT holotoxin.
하천에서, 생물막은 녹갈색의 얇은 막의 형태로 돌, 식물, 그리고 기타 구조물의 표면에 부착되어 있다. 생물막은 주로 영양물의 순환, 수질정화, 바닥 침전물 제거, 그리고 먹이사슬내의 에너지 흐름에 매우 중요한 역할을 한다. 본 연구에서, 우리는 유체 흐름 안에서, 독소-생산 종과 독소-민감 종의 복합적 생물막을 전산 모사하는 모델을 개발하였다. 유체 흐름으로는 균일한 흐름과 불 균일한 흐름 두 가지를 고려하였다. 균일한 흐름은 확률 프로세스로 구현되었으며, 불 균일한 흐름은 나비어-스톡스 방정식으로 구현되었다. 모델에서, 독소-생산종과 독소-민감종 간의 상호작용을 고려하기 위해, 종 개체의 번식률과 사망률이 고려되어졌다. 우리는 서로 다른 두 유체 흐름 내에서 전산 모사 되어진 생물막의 구조적 형상에 대해서 간략히 논의 하였다.
There has been an impetus in the development of biocontrol agents (BCAs) with the removal of a number of chemical compounds in the market, especially in the European Union. This has been a major driver in the development of Integrated Pest Management systems (IPM) for both pest and disease control. For control of mycotoxigenic fungi, there is interest in both control of colonization and more importantly toxin contamination of staple food commodities. Thus the relative inoculum potential of biocontrol agent vs the toxigenic specie sis important. The major bottlenecks in the production and development of formulations of biocontrol agents are the resilience of the strains, inoculum quality and formulation with effective field efficacy. It was recently been shown for mycotoxigenic fungi such as Aspergillus flavus, under extreme climate change conditions, growth is not affected although there may be a stimulation of aflatoxin production. Thus, the development of resilient biocontrol strains which can may have conserved control efficacy but have the necessary resilience becomes critical form a food security point of view. Indeed, under predicted climate change scenarios the diversity of pests and fungal diseases are expected to have profound impacts on food security. Thus, when examining the identification of potential biocontrol strains, production and formulation it is critical that the resilience to CC environmental factors are included and quantified. The problems in relation to the physiological competence and the relative humidity range over which efficacy can occur, especially pre-harvest may be increase under climate change conditions. We have examined the efficacy of atoxigenic strains of A. flavus and Clanostachys rosea and other candidates for control of A. flavus and aflatoxin contamination of maize, and for Fusarium verticillioides and fumonisin toxin control. We have also examined the potential use of fluidized-bed drying, nanoparticles/nanospheres and encapsulation approaches to enhance the potential for the production of resilient biocontrol formulations. The objective being the delivery of biocontrol efficacy under extreme interacting climatic conditions. The potential impact of climate change factors on the efficacy of biocontrol of fungal diseases and mycotoxins are discussed.
2009년 7월부터 12월까지 순천 소재 한 병원에 내원한 환자의 검체로부터 methicillin 내성 Staphylococcus aureus (MRSA) 75균주와 methicillin 감수성 S. aureus (MSSA) 24균주를 분리하였다. 분리균의 항생제 감수성 조사는 디스크 확산법을 사용하여 측정하였다. 분리균의 독소 유전자 보유는 multiplex PCR을 이용하여 장독소(enterotoxin; SE), 독성 쇼크 증상 독소 1(toxic shock syndrome toxin-1; TSST-1), 피부박탈성 독소(exfoliative toxin; ET) 및 백혈구 용해 독소(Panton-Valentine leukocidin; PVL) 유전자를 검출하였다. 분리된 MRSA 60개 균주는 1개 혹은 2개의 독소 유전자를 가지고 있으며, 22.7%의 균주가 seb, sec, seg, sei와 tst 유전자를 동시에 보유하고 있었으며 18.7%는 sec, seg, sei와 tst 유전자를 동시에 보유하고 있었다. 백혈구 용해독소를 암호하는 pvl 유전자는 검출되지 않았다. MRSA는 sec, seg, sei와 tst 유전자 보유에 높은 상관성을 보였다. MRSA 균주들은 erythromycin (분리균의 89%), gentamicin (70.7%), ciprofloxacin (69.3%), clindamycin (61.3%)과 tetracycline (58.7%)에 내성이 높은 반면, MSSA 균주들은 erythromycin를 제외한 다른 항생제에는 민감하였다. 독소 유전자 seb, sec와 tst는 tetracycline 내성과 높은 상관관계가 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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