분자 생물학적 방법 인 DGGE를 이용하여 저온에서 김치가 발효되는 동안 관여하는 미생물의 다양성과 변화양상을 분석하였다. 김치를 저온 ($4^{\circ}C$)에서 발효시키는 60 일 동안 5 일 마다 시료를 채취하였으며, 채취한 김치 시료에서 genomic DNA를 추출하여 실험을 수행하였다. 김치 시료 genomic DNA로부터 16S rDNA의 V3영역을 증폭하여 DGGE를 수행한 결과에서 관찰된 amplicon들의 염기서열을 분석한 결과 저온에서 김치가 발효되는 동안 젖산균들이 주요 미생물 군집으로 나타났으며, 그 중에서도 Weissella koreensis가 발효 전 과정 동안, Lactobacillus sakei의 경우는 발효 10 일째부터, 그리고 Leuconostoc gelidurn은 발효30 일째부터 amplicon들의 농도가 진하게 나타나 이들이 저온에서 김치 발효 과정 동안의 우점종 균주들 임을 알 수 있었다.
For preliminary molecular typing, PCR-based fingerprinting using random amplified polymorphic DNA (RAPD) is the method of choice. In this study, 14 bacterial strains were isolated from different Korean food sources, identified using 16S rRNA gene sequencing, and characterized through RAPD-PCR. Two PCR primers (239 and KAY3) generated a total of 130 RAPD bands, 14 distinct PCR profiles, 10 polymorphic bands, one monomorphic band, and four unique bands. Dendrogram-based analysis with primer 239 showed that all 14 strains could be divided into seven clades out of which clade VII had the maximum of seven. In contrast, dendrogram analysis with the primer KAY3 divided the 14 L. citreum strains into four clades out of which clade IV consisted of a maximum of 10 strains out of 14. This research identified and characterized bacterial populations associated with different Korean foods. The proposed RAPD-PCR method, based on sequence amplification, could easily identify and discriminate the lactic acid bacteria species at the strain-specific level and could be used as a highly reliable genomic fingerprinting tool.
대한화장품학회 2003년도 IFSCC Conference Proceeding Book II
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pp.243-244
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2003
The effects of Lactic acid bacteria have been investigated on anti-tumor. cholesterol reduction in blood. promotion of immune and skin-beauty. We are focused on cosmeceutical activity of Lactic acid bacteria (LAB). Ml, which is found in Korean traditional food. Kimchi The LAB.Ml has been identified as Lactobacillus plantarum Ml and individually cultured with Soybean soup and Soybean-Curd whey, until the total acidity has been reached the highest. After then, cell-free extracts from Ml have been used for the following studies. We assessed the effect of Lactobacillus plantarum Ml on the depigmentation of B16FlO melanoma cell. The melanin content of cells was decreased with 1-3% of cultured extracts. The tyrosinase activity was reduced by cell-free extracts of Lactobacillus plantarum Ml. Anti-aging and anti-oxidative activity of Ml cultured extract was also studied in NIH-3T3 human fibroblast cells. It showed that induction of cell proliferation. collagen synthesis and free radical scavenging activity. Additional studies for anti-fungal and anti-acne activity were also detected on Staphylococcus aureus and Propionibacterium acnes, respectively. These results suggest that cultured extract of Lactobacillun plantarum Ml would be used for cosmeceutical ingredients through multifunctional reaction on skin such as whitening, anti-wrinkle. anti-oxidation and anti-acnes.
본 연구에서는 전유(全乳)에 고형분 함량(15%)을 증가시키기 위해 탈지분유 대신 고구마와 호박을 첨가하여 요구르트를 만들고, 젖산균의 산생성, 생균수 및 요구르트의 품질(관능성, 저장성)에 미치는 영향을 조사하였다. 산생성은 12시간까지 급격히 증가하였고 그 이후에는 완만히 증가하였으며 호박첨가구보다 고구마첨가시 높았다. 생균수은 24시간 발효 후 모든구에서 $6.4{\times}10^{9}cfu/ml$이상이였으며 접종 후 12시간만에 정상기에 도달하였다. 발효액 중의 유기산은 탈지분유를 첨가한 경우보다 고구마나 호박을 첨가할 때 총산에 대한 젖산 함량 비율이 감소하여 대조구는 83%, 고구마첨가구는 76%, 호박첨가구는 74%이었다. 관능검사 결과를 보면 고구마첨가 요구르트가 대조구보다 우수하였고 호박첨가요구르트가 가장 나빴다. 발효가 완료된 모든 요구르트의 저장성은 $5^{\circ}C$에서 15일간 산생성과 pH, 생균수에 거의 변화가 없어 매우 우수한 것으로 나타났다. 이상의 결과를 요약하면 고구마를 첨가하여 기호성이 높고, 식품 영양학적인 가치가 있는 새로운 형태의 요구르트제조가 가능하였다.
오징어젓갈의 안전성 확보 및 품질 균일화를 목적으로 사용할 종균 후보 선발을 위하여 오징어젓갈 우점 bacteria를 도출하고, 이들 중 황색포도상구균과 장염비브리오균에 대한 생육저해활성 보유 균주를 선발하였다. 6종의 배지를 이용하여 2종류의 오징어젓갈 시료로부터 순수 분리한 121 균주를 16S rRNA 유전자 염기서열분석을 통하여 동정한 결과, Bacillus 속, coagulase-negative staphylococci (CNS), 유산균의 순으로 우점하는 것으로 나타났다. CNS는 두 시료 모두에서 검출되었고, 유산균은 시료에 따라 분리되는 종(species)이 다르게 나타났다. 121 균주로부터 선발된 황색포도상구균과 장염비브리오균의 생육을 모두 저해하는 6종의 Bacillus 균주는 NaCl이 6% 첨가된 배지에서 단백질분해활성을 나타내었다.
본 연구에서는 bacterial cellulose를 생산하는 감귤에서 분리된 Gluconacetobacter sp. gel_SEA623-2를 이용하여 초기 초산농도 및 Lactobacillus plantarum KCCM 80077 유산균을 접종한 mixed culture가 bacterial cellulose 생산성에 미치는 영향을 알아보았다. 0.5%의 초산을 첨가한 mixed culture의 경우 초기 생균수가 $2.4{\times}10^6CFU/ml$에서 14일 동안 배양한 이후에 $1.1{\times}10^7CFU/ml$까지 증가하였고 total acidity가 0.5%의 초산을 첨가한 single culture와 비교하여 0.3% 가량 높게 측정되어 유산균에 의해 추가적으로 젖산이 생성된 것으로 판단된다. Single culture에서는 초기 초산농도가 0.0 및 0.5%일 때 1.0% 농도와 비교하여 상대적으로 높은 bacterial cellulose 생산성을 나타내기는 하였으나 유의적인 차이는 보이지 못하였다. 하지만 mixed culture에서는 0.5%의 초산을 첨가하였을 때 $37.83{\pm}6.81g/L$의 dry weight과 $10.33{\pm}0.58mm$의 thickness를 나타냄으로써 1%의 초산을 첨가한 single culture의 $28.40{\pm}1.23g/L$와 $7.50{\pm}0.50mm$의 생산량과 비교하여 유의적인 차이를 나타내었다(P<0.05).
Yunus, M.;Ohba, N.;Shimojo, M.;Furuse, M.;Masuda, Y.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제13권11호
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pp.1542-1547
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2000
To standardize proper formulation of urea and molasses, the former to increase crude protein content of tropical grass and the latter for improving its silage quality, we examined the fermentation quality of silage of fresh and wilted napiergrass (Pennisetum purpureum Schumach) with different levels of urea and molasses with or without lactic acid bacteria (LAB). Silage was made of napiergrass with conditions of fresh young (Exp. 1),young wilted for half day (Exp. 2) and fresh mature (Exp. 3). Chopped plant materials of about 1cm length were ensiled into a laboratory silo and incubated for one month at $25^{\circ}C$. The treatments were the combination of 0, 0.2 and 0.6% of urea and 0, 2 and 5% of molasses (fresh material basis) with or without LAB inoculation. After opening the silo, pH, organic acids, volatile basic nitrogen (VBN) and total nitrogen (TN) were determined. Addition of molasses significantly (p<0.01) lowered pH values in three experiments. Though molasses addition increased lactic acid production even at a higher level of urea, pH values at 0 and 2% molasses were significantly increased by urea in fresh and wilted young silages, but in fresh mature silage it occurred only when molasses was not added. VBN/TN at 0.6% urea were decreased significantly by the highest molasses in three experiments. Significant increases in TN by the increasing of urea addition were observed at all levels of molasses in wilted young and fresh mature silages. In conclusion, a combination of 5% molasses and 0.6% urea could improve the nutritive and fermentation qualities of napiergrass silage under young, wilting and mature conditions.
This study investigated the effects of adding oyster shell powder (OSP) from Crassostrea gigas on the food quality of Chinese cabbage Kimchi (CCK). We monitored the changes in microbial levels, pH, acidity and sensory evaluation during the fermentation of CCK treated with various contents of OSP. The microbial assay showed that adding OSP to CCK inhibited the growth of viable cells, total coliforms, and lactic acid bacteria, with the greatest growth inhibition against lactic acid bacteria over the fermentation period. After fermentation for 18 days, the lactic acid bacterial counts in CCK treated with OSP (0.3%, 0.5% and 1%) were at least 1 log CFU/g lower than those of control CCK. In addition, the pH and acidity of CCK treated with OSP were lower than in control CCK over the fermentation period. The overall sensory evaluation of CCK with 0.3% OSP was better than that of control CCK after fermentation for 24 days. In conclusion, OSP treatment, especially 0.3% OSP, enhances the food quality and extends the self-life of CCK, while minimizing the detrimental effects on its sensory characteristics.
현재 시판되고 있는 5개사의 농후 발효유를 수집하여 이들의 물리화학적 특성과 저장중 변화를 관찰하였다. pH는 $3.87{\sim}4.19$, 산도는 젖산량으로 $0.97{\sim}1.4%$, 점도는 $7,850{\sim}21,000Cp$ 범위였으며, 당도는 $16.2{\sim}22.2$ Brix를 나타내고 있었다. $5^{\circ}C$ 저장 중 pH 계속 강하하여 저장 16일에 pH4.1 내외에 이르렀고, 산도는 비례하여 상승하였으며 점도는 저장기간에 따라 증가하는 현상으로 보아 젖산균의 활동이 계속됨을 보여주었다. 젖산균은 초기 $10^8{\sim}10^9CFU/ml$로 규정 이상이었고 저장중 일부 증가하거나 일정수준을 유지하고 있었다.
한국인 모유중 미생물을 분리 및 동정하여 미생물의 분포를 파악함으로써 영 유아의 건강에 대한 안정성을 확보하고자 하였다. 건강한 한국인 149명의 산모로부터 비유기간을 고려하여 유즙기에 의한 수집과 손에 의한 수집방법에 따라 모유를 나누어 미생물의 동정을 실시하였다. 유즙기로 수집한 경우 일반세균수는 평균 2.33${\times}$$10^4$ cfu/mL이구 손으로 착유시는 평균 7.83${\times}$$10^3$ c려/mL로서 유즙기를 이용하여 착유한 경우 평균 9.80${\times}$$10^2$∼3.06${\times}$$10^4$ cfu/mL 많이 존재하였으며, 대장균군 또한 유즙기를 이용하여 착유할 경우 평균9.36${\times}$$10^3$∼8.57${\times}$$10^4$ cfu/mL 많이 존재하는 것으로 나타났다. 반면에 유산균수는 평균 8.63${\times}$$10^2$∼7.64${\times}$$10^4$ cfu/mL로서 기계착유와 손착유 방법에 따른 차이점이 없었다. 일반세균의 동정은 산모로부터 수집된 모유를 Standard plate count agar를 이용하여 콜로니의 형태학적 특성에 따라 5가지 형태로 나누어 100개군으로 분리하였으며, Microbial Identification System(MIDI)을 이용하여 일반세균군을 동정한 결과, 휴 13개 균종으로 분포하고 있었으며, 그 중 Staphylococcus속이 7가지의 아종으로 전체 일반세균의 81% (1.07${\times}$$10^4$ cfu/mL)로서 가장 많이 존재하고 있는 것으로 나타났다. 그 밖에 Mcrococcus속, Bacillus속, Providencia속, Pseudomonas속, Yersinia속 및 Acinetobacter속이 각각 1종씩 검출되었다. 유산균의 동정은 BCP agar를 이용하여 콜로니의 형태학적 특성에 따라 6가지 형태로 나누어 36개군의 유산균군을 분리하였다. 그리고 Bergey's Manual 및 API 50CH system을 이용하여 생리적 및 생화학적 동정을 실시한 결과, 총 7개 균종으로 분포하고 있었으며, Lactobacillus brevis 균주간 전체 유산균중 50.9% (4.72${\times}$$10^4$ cfu/mL)로서 가장 많이 존재하고 있는 것으로 나타났다. 그 밖에 Lactobacillus curvatus, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis, Lactobacillus acidophiiu 등 85.1%(7.89x$10^4$ cfu/mL)가 간균으로 분포하고 있었으며 구균으로는 Leuconostoc lactis와 Streptococcus salivarius subsp. thermophilus가 총 14.9% (1.39${\times}$$10^4$ cfu/mL)분포하고 있는 것으로 동정되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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