• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제37권3호
• /
• pp.157-162
• /
• 1999

Serum from mouse orally ingested with tissue cyst forming stain (Me49) of Toxoplasma gondii was assayed by Western blot and immunofluorescene assay (IFA) to establish early responses in antigenicity of the parasite in mouse model of foodborne toxoplasmosis. Sera were collected weekly to blot the RH antigen transferred onto nitrocellulose paper after being separated by 12% SDS-PAGE. With the second week serum, 34 kDa protein (p34) was detected uniquely, and all antigens of T.gondii were detected with the sera from 3 or 4 weeks. p34 was not a member of the major surface membrane proteins and confirmed to be localized in the rhoptry by IFA. It was secreted into parasitophorous vacuolar membrane (PVM) during the entry into host cells. 10.3% of sera detected p34, while all the ELISA positive sera detected the band. It has diagnostic usefulness of presumed T.gondii infection. We suggest the name of the p34 protein as ROP9.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제32권1호
• /
• pp.19-26
• /
• 1994

Toxoplasma 약독주(ME49 주)의 배양계 확립을 위하여 뇌내 cyst를 마우스 복강에 주입하고 1, 3, 5 그리고 7일후 다시 얻어 배양기 부착성 세포를 배양하는 방법으로 ME49주를 배양하였으며, ME49주의 성장에 미치는 CAMP 및 DHFR억제제의 영향을 관찰하였다. ME49주로 감염된 대식 세포의 형태학적 관찰은 Giemsa 염색방법을 이용하였고 성장정도는 $[^3H]-uracil$ 표지량을 대조군에 대한 비로 나타내었다. 감염 3일 및 5일이 경과된 후에 채취한 복수의 대식세포에서 ME49 주의 bradyzoite가 주로 판찰되었으며, 배양기에서 3일 이상 경과된 후에는 pseudocyst를 형성하기 시작하였고, 5일 10일이 경과되면서 pseudocyst의 크기가 증가하였다. CAMP를 농도별로 처리하였을 때 3일째와 5일째의 복수를 5일간 및 10일간 배양했을 때 농도의존적으로 성장을 촉진하였다. DHFR 억제제중 pyrimethamine의 경우 농도의존적인 성장억제효과를 나타냈고 methotrexate의 경우엔 ME49 주 bradyzoite의 성장에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 마우스 대식세포내에서 bradyzoite의 배양이 가능하고 그 배양조건은 3일째와 5일째 복수를 5일 이상 10일 정도 배양하는 것이 적당하며 CAMP 및 pyrimethamine이 bradyBoite의 성장을 각각 촉진 및 억제하는 것으로 나타났다.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제49권2호
• /
• pp.109-114
• /
• 2011

Dendritic cells have been known as a member of strong innate immune cells against infectious organelles. In this study, we evaluated the cytokine expression of splenic dendritic cells in chronic mouse toxoplasmosis by tissue cyst-forming Me49 strain and demonstrated the distribution of lymphoid dendritic cells by fluorescence-activated cell sorter (FACS). Pro-inflammatory cytokines, such as IL-$1{\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, and IL-10 increased rapidly at week 1 post-infection (PI) and peaked at week 3 PI. Serum IL-10 level followed the similar patterns. FACS analysis showed that the number of $CD8{\alpha}^+/CD11c^+$ splenic dendritic cells increased at week 1 and peaked at week 3 PI. In conclusion, mouse splenic dendritic cells showed early and rapid cytokine changes and may have important protective roles in early phases of murine toxoplasmosis.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제38권2호
• /
• pp.107-110
• /
• 2000

We investigated the role of recombinant Toxoplasma gondii heat shock protein (rT.g.HSP) 70-full length, rT.g. HSP70-NH2-terminal region, or rT.g. HSP70-carboxy-terminal region in prophylactic immunity in C57BL/6 mice perorally infected with Fukaya cysts of T. gondii. At 3, 4, 5, and 6 weeks after infection, the number of T gondii in the brain tissue of each mouse was measured by quantitative competitive-polymerase chain reaction (QC-PCR) targeting the surface antigen (SAG) 1 gene. Immunization with rT.g.HSP70-full length or rT.g.HSP70-carboxy-terminal region increased the number of T. gondii in the brain tissue after T. gondii infection, whereas immunization with rT.g.HSP70-NHa-terminal region did not. These results suggest that T.g. HSP70-carboxy-terminal region as well as T.g.HSP70-full length may induce deleterious effects on the protective immunity of mice infected with a cyst-forming T. gondii strain, Fukaya.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제26권3호
• /
• pp.155-162
• /
• 1988

Toxoplasmn gondii이 강독주인 RH주와 조직내 cyst 형성주인 Fukaya주의 세포막 단배 성분을 SDS 존재하에 서 전기영동하여 분석하였다. 먼저 RH tachyzoite와 Fukaya의 cyst를 각각 마우스의 복강액과 뇌조직으로부터 분리하였는데, 불연속 Percoll density-gradient서 원심분리하여 tachygoite는 50 U와 605 Percoll용액 경계면에서, cyst는 40%와 50%의 경계면 및 50%와 60 % 경계면에서 얻었으며, cyst는 저장액으로 처리하여 bradyzoite를 얻었다. Lactoperoxidase를 촉매로 세포막에 방사성 요오드를 표지시킨 후 자가방사표지그림을 얻었을 때, bradyzoite 는 15 KDa와 14 KDa의 분자량을 가진 단백질이 주요 단백질로 나타났으며, tachyzoite에서는 30 KDa 단백질이 주요 단백질로 나타났다. 또, 당단백질의 존재를 파악하기 위해서 lectin blotting을 시행하였는데, concanavalin A는 bradyzoite에서 200K∼50KDa의 여러 단백질을, .그리고 tachyzoite에서는 52KDa 단백질을 주로 하는 33K∼20 KDa단백질을 검출하였으며, phytohemagglutinin은 두·유형에서 아무런 단백질도 검출하지 못하였다. 한편, 이들을 효소면역이적법으로 항 Fukfya항체와 항 RH항체로 반응시켰을 때, 많은 교차 반응을 보였으나, bradyzoite에서는 15 KDa 단백질이, 그리고 tachyzoite에서는 52 KDa, 30 KDa 및 25 KDa 단백 짙이 각각 유형 특이 항원 단백으로 나타났다. 위의 결과들로, bradyzoite에서는 15 KDa 단백질이 당단백질은 아니지만 특이 항원성을 갖는 주요 백으로 나타났으며, tachyzoite에서는 지금까지 주요 세포막 단백으로. 알려진 P3O외에 당단백질이며 성을 갖는 세포막 단백으로 SaKDa 단백 (gps2)을 확인할 수 있었다.