Objective : The purpose of this study is to investigate the effects of Bangpungtongsung-san extracts on the preadipocytes proliferation, of 3T3-L1 cell line. lipolysis of adipocytes in rat's epididymis and localized fat accumulation of porcine by extraction methods(alcohol and water). Methods : Diminish 3T3-L1 proliferation and lipogenesis do primary role to reduce obesity. So, 3T3-L1 preadipocyte and adipocytes were performed on cell cultures, and using Sprague-Dawley rats for the lipogenesis, and treated with 0.01-$1mg/m{\ell}$ Bangpungtongsung-san Extracts depend on concentrations. Porcine skin including fat tissue after treated Bangpungtongsung-san Extracts by means of the dosage dependent variation are investigated the histologic changes after injection of these extracts. Results : Following results were obtained from the 3T3-L1 preadipocyte proliferation and lipolysis of adipocyte in rats and histologic investigation of fat tissue. 1. Bangpungtongsung-san extracts were showed the effect of decreased preadipocyte proliferation on the high dosage($1.0mg/m{\ell}$). 2. Bangpungtongsung-san extracts were showed the effect of decreased the activity of glycerol-3-phosphate dehydrogenase(GPDH) on the high dosage($1.0mg/m{\ell}$) and Specially, alcohol extract of Bangpungtongsung-san was clear as time goes by high concentration. 3. Bangpungtongsung-san extracts were showed tries to compare the effect of lipolysis, alcohol extract of Bangpungtongsung-san on the high dosage($1.0mg/m{\ell}$) was observed the effect is higher than water extract. 4. Investigated the histological changes in porcine fat tissue after treated Bangpungtongsung-san extracts, we knew that water extract of Bangpungtongsung-san was showed the effect of lipolysis on the high dosage($10.0mg/m{\ell}$) and alcohol extract of Bangpungtongsung-san was showed significant activity to the lysis of cell membranes in all concentration. Conclusion : These results suggest that Bangpungtongsung-san efficiently induces diminish proliferation of preadipocyte and lipolysis in adipose tissue.
Purpose: Human adipose tissue-derived stromal cells(hADSCs) can be expanded in vitro and induced to differentiate into multiple mesenchymal cell types. In this study we have examined various neuronal phenotypes and gene expression profiles of the hADSCs in the neuronal induction. Methods: The hADSCs were isolated from human adipose tissue and they were characterized by the flow cytometry analysis using CD13, CD29, CD34, CD45, CD49d, CD90, CD105 and HLA-DR cell surface markers. We differentiated the hADSCs into the neuronal lineage by using chemical induction medium and observed the cells with contrast microscopy. The immunocytochemistry and western blotting were performed using the NSE, NeuN, Trk-A, Vimentin, N-CAM, S-100 and ${\beta}$-Tubulin III antibodies. Results: The hADSCs were positive for CD13($90.3{\pm}4%$), CD29($98.9{\pm}0.7%$), CD49d($13.6{\pm}6%$), CD90 ($99.4{\pm}0.1%$), CD105($96%{\pm}2.8%$) but negative for CD34, CD45 and HLA-DR. The untreated cultures of hADSCs predominately consisted of spindle shaped cells and a few large, flat cells. Three hours after the addition of induction medium, the hADSCs had changed morphology and adopted neuronal-like phenotypes. The result of immunocytochemistry and western blotting showed that NSE, NeuN, Trk-A, Vimentin, N-CAM, S-100 and ${\beta}$-Tubulin III were expressed. However, NSE, NeuN, Vimentin were weakly expressed in the control. Conclusion: Theses results indicate that hADSCs have the capabillity of differentiating into neuronal lineage in a specialized culture medium. hADSCs may be useful in the treatment of a wide variety of neurological disorders.
10년생 두릅나무의 동아(冬芽)를 절편으로 체세포배(體細胞胚)를 유도하고 식물체(植物體)를 재생(再生)시켜서 단지(團地)에 활착시키는 실험을 수행하였다. 배발생(胚發生) 캘러스는 MS 배지(培地)에 2, 4-D를 첨가하여 유도(誘導)되었다. 다량의 체세포배가 MS 배지에 2, 4-D와 BA를 동시에 첨가한 조건에서 발생(發生)되었다. 배발생 캘러스에서는 기형의 체세포배가 흔히 관찰되었으나 대부분은 전형적(全形的)인 배(胚) 형태(形態)를 보였다. 어뢰형에서 자엽(子葉) 단계(段階)에 이르는 성숙(成熟)한 체세포(體細胞) 배(胚)는 모두 발아(發芽)가 가능하였으나 완전한 식물체로의 재분화(再分化)는 MS 기본 배지에서 평균(平均) 14%이었다. 재분화된 식물체는 온실(溫室)에서 순화(馴化) 후(後) 단지(團地)에서 95% 이상 활착(活着)되었고, 이식(移植) 후(後) 3년까지 정상적인 생장(生長)을 보였다.
화경을 상, 중, 하부로 나누어 신초 및 자구를 유도하기 위하여 NAA와 몇 종류의 cytokinin 첨가 배지에서 각 부위별 화경 절편체를 배양해서 얻은 결과는 다음과 같다. 화경 조직에서 상부, 중부, 하부 중 소화경이 부착된 상부조직에서 다아체 및 자구 형성이 전반적으로 가장 양호 하였다. 다아체 형성은 NAA $0.1mg{\cdot}L^{-1}$와 TDZ $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ 혼용배지에서 가장 효율적이었고 자구 형성은 NAA $0.01mg{\cdot}L^{-1}$와 kinetin $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ 또는 NAA $0.01mg{\cdot}L^{-1}$와 kinetin $0.2mg{\cdot}L^{-1}$ 혼용배지에서 가장 효율적이었다. 온실에서 순화된 식물체는 정상적으로 개화하였으며 재식 2년차에 1.5개 내외의 자구를 가진 구를 생산할 수 있었다.
The dissolved oxygen level of any cell culture environment has a critical effect on cellular metabolism. Specifically, hypoxia condition decreases cell viability and recombinant protein productivity. In this work, to develop CHO cells producing recombinant protein with high productivity, mammalian expression vectors containing a human tissue-type plasminogen activator (t-PA) gene with hypoxia response element (HRE) were constructed and stably transfected into CHO cells. CHO/2HRE-t-PA cells produced 2-folds higher recombinant t-PA production than CHO/t-PA cells in a $Ba^{2+}-alginate$ immobilized culture, and 16.8-folds in a repeated batch culture. In a non-aerated batch culture of suspension-adapted cells, t-PA productivity of CHO/2HRE/t-PA cells was 4.2-folds higher than that of CHO/t-PA cells. Our results indicate that HRE is a useful tool for the enhancement of protein productivity in mammalian cell cultures.
Pressure sores are an ulceration and necrosis of the skin and underlying tissue usually occur after prolonged or repeated pressure by interruption of blood flow from the small. vessels to the skin and deep tissue. The management of pressure sores is mostly difficult and requires prolonged hospitalization or repeated surgical interventions with a high recurrence rate. In this article we reviewed 14 cases of National Pressure Ulcer Advisory Pannel staging III, IV over the lateral malleolar area of the ankle in 2 years period from January 1999 to October 2001. The pressure over lateral malleolar area was mainly due to unique Korean sitting position with cross legs at flexed hips and knees or supine position of patient with external rotation of low extremity. Male to female ratio was 11: 3 and ages were between 36 and 83 (mean age: 67.1 years). Associated diseases were DM(7 cases), Hemiparesis caused by CVA(2 cases), Liver cirrhosis(2 cases), disarticulation of opposite hip due to squamous cell ca.(1 case), Intertrochanteric Fx.(1 case). Wound cultures reported Staphylococus, Pseudomonas and others. Abnormally elevated ESR and CRP were seen in 6 cases. Operative treatments were irrigation and debridement, direct closure with gravity drainage and skin grafting. The most important aspect of pressure sore treatment is pressure relief of the lateral malleolar area. Pressure-relieving Cast or Brace was helpful for local management and preventing recurrence.
Purpose: Necrotizing fasciitis is a life-threatening, destructive soft tissue infection with a very high rate of mortality that needs early diagnosis and aggressive treatment. Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is a systemic, autoimmune disease and it's major cause of mortality is an infection. But necrotizing fasciitis in SLE is very rare and there have been only 22 cases reported in the literatures. We reported a patient of necrotizing fasciitis with SLE and reviewed 22 others from literature research. Methods: A 40-year-old female patient with a history of SLE for 6 years came to the emergency room. The patient complained of severe pain and swelling on her right leg. She was diagnosed as necrotizing fasciitis and underwent emergency fasciotomy. As wound cultures showed variable organisms, she was treated with broad-spectrum antibiotics and underwent several surgical debridements. Then, the wound was treated with the V.A.C (Vacuum Assisted Closure) device and split thickness skin grafting was performed two times. Results: Skin graft was well taken within 2 weeks after operations and the patient was discharged to outpatient follow up. There was no complication related with surgery and she could walk without cane after 3 months. Conclusion: We treated a necrotizing fasciitis in a patient with SLE and reviewed 22 others from literature research. The case presented here suggests that necrotizing fasciitis is a rare disease in SLE patients, but should be considered in the differential diagnosis of soft tissue infection in SLE patients. A high index of suspicion is needed for early diagnosis and proper management in these patients.
본 연구는 감귤 품종인 '삼보감'과 '병귤'에서 3종류의 싸이토키닌(BA, 2iP, kinetin)과 그들의 농도(0, 0.1, 0.5, 1.0, 2.0mg/L)가 마디배양에 의한 대량 증식에 미치는 영향을 구명하고자 수행되었다. 마디의 절편체는 기내 발아된 두 품종의 유묘에서 얻어졌다. 두 품종을 비교하면 신초의 수는 '병귤'에서보다 '삼보감'에서 더 많이 형성되었다. 본 실험에서 사용된 3종류의 싸이토키닌 중에 고체 MS 기본배지에 첨가된 BA가 신초의 대량 생산에 가장 효과적인 촉진제였으며 그 적정농도는 1.0 mg/L인 것으로 나타났다. 줄기의 신장 뿌리의 형성은 싸이토키닌의 종른에 관계없이 싸이토 키닌의 농도가 증가함에 따라 억제되었다. 삼보감'에서는BA 1.0 mg/L에서 가장 탄은 신초 및 엽수를 형성한 반면 '병귤에서는 어떠한 싸이토키닌의 종류나 농도도 본 실험에서 신초 및 뿌리 등의 형성에 커다란 영향이 없었다.
시클라멘의 급속증식체계를 확립하기 위하여 발아 후 자엽이 전개된 어린 식물체의 괴경, 자엽, 엽병 등의 절편을 분리하여 절편부위별로 캘러스 및 기관분화에 미치는 생장조절제의 종류와 농도에 따른 식물체의 생장반응을 조사하였다. 절편부위별 캘러스 형성 및 shoot분화에 있어서 auxin류 단용처리의 경우 괴경절편의 NAA처리구에서 절편으로부터 캘러스 없이 shoot가 직접 발생하여 가장 양호하였으며, 1개의 절편체에서 10개 이상의 다아체가 분화되었다. 자엽이나 엽병절편은 캘러스만 유도되었고 대부분 치상당시의 상태로 shoot 발생에 auxin류의 처리는 부적합하였다. Cytokinin류 단용처리는 1.0 mg/L TDZ처리구에서 괴경의 경우 100% shoot 분화율을 보였고, 자엽절편 역시 배양 40일경부터 다수의 shoot가 발생되어 양호하였다. NAA와 BA혼용처리는 0.5 mg/L NAA와 0.5 mg/L BA 혼용첨가된 배지에서 괴경. 자엽, 엽병절편 모두 shoot 분화가 양호하였으며, auxin류와 cytokinin 류 단용처리보다 NAA와 BA 혼용처리가 모들 절편에서 양호한 결과를 보였다. 뿌리발생을 유도하기 위해 NAA와 IBA 단용처리에 shoot를 배양한 결과 배양 15일경부터 0.5 mg/L IBA처리구에서 뿌리가 발생되기 시작하여 배양 30일 후에는 Pot이식이 가능할 정도로 뿌리가 발생되어 가장 양호한 결과를 보였다.
Dissolved oxygen level of cell culture media has a critical effect on cellular metabolism, which governs specific productivity of recombinant proteins and mammalian cell growth However, in the cores of cell aggregates or cell-immobilized beads, oxygen level frequently goes below a critical level. Mammalian cells have a number of genes induced in the lower level of oxygen, and the genes contain a common cis-acting element (-RCGTG-), hypoxia response element (HRE). By binding of hypoxia inducible factor-l (HIF-I) to the HRE, promoters of hypoxia inducible genes are activated, which is a survival mechanism. In this work, to develop a CHO cell capable of producing recombinant proteins in immobilization and high density cell culture efficiently, mammalian expression vectors containing human tissue-type plasminogen activator (t-PA) gene controlled by HRE were constructed and stably transfected into the CHO cells. In $Ba^{2+}$ -alginate immobilization culture, CHO/pCl/dhfr/2HRE-t-PA cells produced 2 folds higher recombinant t-PA activity than CHO/pCl/dhfrlt-PA cells without $CoCl_2$ treatment. Furthermore, in repeated fed batch culture, productivity of t-PA in immobilized CHO/pCI/dhfr/2HRE-t-PA cells was 121 ng/ml/day, total production of 0.968 mg/day at 11 days culture while CHO/pCIIdhfrlt-PA cells was 22.8 ng/ml/day. All these results indicate that HRE is very useful for the enhancement of protein productivity in mammalian cell cultures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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