은어, plecoglossus altivelis의 생리학적 성전환을 위한 기초적인 연구로 성분화 과정을 조직학적으로 조사하였다. 부화 후 2일째 (평균전장 : 0.66 cm)에 중신관과 장 사이의 장간막에 원시생식세포가 나타났으며, 부화 후 30일째(평균전장:1.29 cm)의 초기 생식소는 genital ridge를 형성하는 원시 생식소 구조를 나타내었다. 부화 후 90-100일째 (평균전장:3.42 cm~4.50 cm)의 생식소는 암, 수로 분화가 이루어졌다. 정소는 부화 후 90일째 (평균전장:3.42 cm) 많은 정원세포들이 분포하고 정소 소관 (efferent duct, ED)이 관찰되었으며, 난소에서는 난소를 특징지을 수 있는 parovarian sac의 구조가 난소 가장자리로부터 나타났다. 부화 후 110일째 정소에서는 정소 소관의 수와 정원세포의 수가 점점 증가하였다. 부화 후 100일째 (평균전장: 4.5 cm) 난소에서는 난소를 특징지을 수 있는 parovarian sac이 형성되기 시작하였고, 부화 후 120일째 (평균전장:5.45 cm) 난소에서는 난소 소염의 형성 및 분리와 함께 난모세포가 소엽 내에 가득 차기 시작하여 기능적 난소의 형태로 분화하였다. 이상의 결과 본 종은 초기 성분화 과정에 자성 단계를 거치지 않고 정소와 난소로 분화되는 분화형 자웅이체였다.
Various pesticides known or suspected to interfere with steroid hormone function were screened toy effects in leydig cells on catalytic activity and mRNA expression of aromatase. Dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) is a widespread environmental pollutant. In this study, we investigated the effect of DDT on testosterone production through aromatase activity and its molecular mechanism in testicular leydig cell, R2C by using radioimmunoassay (RIA). As the results, the potent leydig: cell activator LH increased testosterone production compared to the control. DDT exposure significantly decreased testosterone production in R2C cell. In addition, DDT was found to increase aromatase gene expression and activity in R2C cell in a dose dependent manner. In order to assess whether the suppressive effects of DDT on LH-inducible testosterone (T) production might be influenced by the ER, ICI 182.780 was used, and it was found that these inhibitory effects of DDT were antagonized by ICI 182.780, implying that the estrogen receptor (ER) mediates the suppressive effects of DDT. Furthermore, the inducible effects of DDT on aromatase gene expression might be influenced by the ER, ICI 182.780 was used, and it was found that these enhancing effects of DDT were antagonized by ICI 182.780, implying that the ER mediates the inducible effects of DDT. Our results indicated that DDT inhibition of luteinizing hormone (LH) -inducible T production in R2C cell is mediated through aromatase. However, the precise mechanisms by which DDT enhance in R2C cell remains unknown. The current study suggests the possibility that DDT might act as a modulator aromatase gene transcription.
Kim, Suel-Kee;Lee, Ho-Joon;An, Su-Yeon;Lee, Chang Joo;Yoon, Yong-Dal
환경생물
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제22권4호
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pp.550-558
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2004
The effects of postnatal exposure to octylphenol(OP) on the expressions of the steroidogenic enzymes and testosterone production were evaluated. Postnatal male mice (15-day-old) were injected with 2 or 20mg $kg^{-l}$ body weight (BW) of OP for 5 days and sacrificed on postnatal day 21. Testosterone concentration was measured by radioimmunoassay and the expressions of the testicular genes were determined by RT-PCR analyses. Significant reductions in the mean body and testis weight were observed in the OP treated animals. No marked alteration in the histological structure of the testis were observed, however, slight reduction in the seminiferous tubule diameter and the number of Leydig cells and several pyknotic cells could be identified in the 20 mg $kg^{-l}$ BW of the OP treated animals. Serum testosterone concentration was dramatically reduced and the mRNA expressions of the steroidogenic acute regulatory protein (StAR), cholesterol side-chain cleavage enzyme (P450scc) and $17\beta$-hydroxylase/Cl7-20 lyase $(P450_{17\alpha})$ were decreased. No significant changes of the gene expressions of the steroidogenic factor-l (SF-I) and estrogen and androgen receptor after the OP treatment showed that the decreased expressions of the steroidogenic enzymes in the present study did not correlate with these genes. Altogether, the present study demonstrates that postnatal treatment of OP inhibits steroidogenesis by decreasing the transcriptional expressions of the StAR and steroidogenic enzymes. The alteration in steroidogenesis may adversely affect the normal development of the testis and sper- matogenesis.
This study was investigated the effort of growth and gonadal development in olive flounder, Paralichthys olivaceus exposed to PCBs Effluent Allowance Concentration, 3.0 ppb in Korea. Total length, body weight and weight gam of fish were no significant differences between two treatments (control: T.L.-110.0 mm, T.W.-9.61 g: treatment: T.L.-112.8 mm, T.W.-9.68 g), however, weight gain of fish unexposed to PCBs wat observed to increase gradually from 100 days after hatching (30 days after treatment). In the indifferentiated gonad to the juvenile stage, the differentiation of the ovary occured at 60 days after hatching (20 days after treatment) and that of the testis occured at 70 days after hatching (30 days after treatment) in two groups. In the ovary, the oogonia and ovarian lamellar appeared 130 days after hatching (50 days after treatment). The spermatogonia and resticular lobule of the testis were observed at 130 days after hatching (50 days after treatment). Testicular cyst appeared 140 days after hatching (60 days After treatment). There was no difference on the development of ovary and testis. There was no obvious difference of sex ratios. Therefore, These results considerate that PCBs have any effect for growth and gonadal development, but a little act for early growth in olive flounder.
인간의 불임을 극복하기 위한 번식공학 기술의 효율성을 증가시키기 위해 성세포의 동결이 널리 수행되고 있으나 동결 기술의 효율성에 있어서 논란의 여지가 있다. 본 연구에서는 체외수정란을 생산하기 위한 난자세포질내 정자미세주입(ICSI) 시술에 사용되는 정자와 이들 기술을 이용 생산한 체외수정란의 동결이 배 발생 및 임신에 미치는 효과를 조사하였다. ICSI방법으로 체외수정란을 생산하는 경우 정자의 동결이 체외수정, 발생 및 임신에 영향을 미치지 않았으며, 특히 동결융해한 사출 및 정소정자에 의한 체외수정율과 발생율 및 임신율도 차이가 없었다. 한편 체외수정란을 동결하는 경우 완만동결과 초자화동결에 의한 체외수정란의 생존율과 임신율은 차이가 없었으나, 동결수정란은 신선수정란에 비하여 임신율이 유의하게 낮았다(p<0.05). 결론적으로 ICSI에 사용되는 정자와 달리 ICSI에 의해 생산된 수정란을 동결하는 경우 임신율을 저하시킬 수 있다.
Guppy fry were treated for the first 40 days of life with 0, 20, 40, 60 & 100$\mu\textrm{g}$ of estradiol per gram of food in order to change the sex of normal males to functional females(genetic male). The present investigation deals with the effects of steroid hormones, such as $\beta$-estradiol and testosterone, on the sex differentiation in guppy and tilapia. The results obtained were summarized as follows. 1. In B (20$\mu\textrm{g}$/g diet) group 17$\beta$-estradiol-treated, 67.8% of male offsprings were produced. 2. In D (60$\mu\textrm{g}$/g diet) group 17$\beta$-treated, 67% of female offsprings were produced. 3. B, D groups of genetic male brooders had significantly different effects (P<0.01) upon sex ratios of their progeny. 4. This strongly indicates that sex direction has been achieved and that the male is the heterogametic sex. 5. The group that produced the highest percentage of male offspring(male percentage of observed number to expected number was 91%) contained only full-sibling male brooders to the sex-reversed female brooders. 6. After 7 months following treatment, the sex-reversed males had ovarian portion in the anterior region and a testicular portion in the posterior region of the same intersexual gonad, respectively. 7. At 7 months after treatment, the ovareis revealed a complete arrest of the ovarian formation, and appearances of spermatogenetic cell cysts among surviving auxocytes. 8. In most of sex-reversed fish, anterior portion of test is was devoid of sperm ducts including the seminal vesicle and vas deferens. 9. The male transferrin showed two strong bands, while the female transferrin showed a single weak band. 10. One of the two bands of male transferrin showed the same mobility with band of female transferrin.
본 연구는 생쥐의 고게정관내에 존재하는 분화단계의 정자세포를 발생단계별로 분리하여, 체외에서 단기간 배양체계를 확립하기 위하여 실시하였다. 8주령 이상된 생쥐의 정소로부터 정소막을 제거시킨 후, collagenase (1mg/ml), trypsin(2.5mg/ml)를 처리하여 곡세정관을 간질세포와 분리하여 배양액에 부유시켰다. 부유세포는 Celcep장치를 이용하여 세포크기와 밀도 차이에 의해 분화 단계별로 분리하였다. 회수된 세포의 균질성은 haematoxylin/eosin 또는 orcein으로 염색한 후, 광학현미경하에서 확인한 결과 약 85% pachytene spermatocyte와 round spermatid을 성공적으로 분리해냈다. 따라서 sedimentation velocity에 의해서 생쥐의 spermatogenic cell의 발달단계별 분리가 가능함을 알 수 있었다. 이러한 방법으로 분리된 pachytene spermatogenic cell들은 DMEM 배양액에서 6일 이상 배양한 결과 약 36%의 생존율을 보였다. 따라서, 분화단계별 정자 세포의 분리 및 배양체계의 확립은 웅성생식세포의 발생과정에 따른 생리 또는 분자생물학적 현상을 규명함은 물론 세포융합기술의 이용에 의한 형질전환동물 생산에의 응용을 통해 가축에 있어서의 형질전환 생산효율의 개선에 기여할 수 있으리라 사료된다.
Iron is required for cell viability but is toxic in excess. While the iron-mediated malfunction of testicular cells is well appreciated, the underlying mechanism(s) of this effect and its relationship with fertility are poorly understood. Ferritin is a ubiquitous intracellular protein that controls iron storage, ferroxidase activity, immune response, and stress response in cells. Ferritin light chain protein (FTL) is the light subunit of the Ferritin. Previously, we had identified the FTL in bovine spermatozoa following capacitation. In present study, to investigate the role of Ferritin in sperm function, mice spermatozoa were incubated with multiple doses (1, 10 and $100{\mu}M$) of sodium nitroprusside (SNP), an iron donor. SNP was increased Ferritin levels in a dose-dependent manner. The Ferritin was detected on the acrosome in spermatozoa by immunocytochemistry. Short-term exposure of spermatozoa to SNP increased tyrosine phosphorylation and the acrosome reaction (AR). Finally, SNP affected a significant decrease in the rate of fertilization as well as blastocyst formation during early embryonic development. On the basis of these results, we propose that the effects of Ferritin on the AR may reduce overall sperm function leads to poor fertility in males and compromised embryonic development.
Lee, Hui Dai;Lee, Hyo Serk;Park, Se Hwan;Jo, Dae Gi;Choe, Jin Ho;Lee, Joong Shik;Seo, Ju Tae
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제39권4호
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pp.172-175
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2012
Objective: The aim of this study is to investigate the various causes of male infertility using multiple approaches. Methods: Nine-hundred-twenty infertile male patients were analyzed at their first visit with one physician between January 1 and December 31, 2009. All patients were subjected to physical examination and semen analysis and azoospermic patients underwent hormonal testing, chromosomal tests, and testicular biopsy. Semen analysis was based on the definition of the World Health Organization. Results: Among the 920 patients, 555 patients (60.3%) had semen results within the normal range, 269 patients (29.2%) within the abnormal range, and 96 (10.5%) were diagnosed with azoospermia. Varicoceles were diagnosed in 84 of the 555 normal-range patients (15.1%) and in 113 of the 269 abnormal-range patients (42.0%). Of the 96 patients with azoospermia, 24 patients (25%) were diagnosed with obstructive azoospermia, 68 patients (71%) with non-obstructive azoospermia, and 4 patients (4%) with retrograde ejaculation. Conclusion: Various causes of male infertility have been reported and diverse treatment methods can be adopted for each cause. In this regard, research must be conducted on a larger number of patients to accurately assess the various causes of infertility in Korean patients and to investigate various infertility treatment methods.
Since the n-6 polyunsaturated fatty acid, docosatetraenoic acid (22:4n-6), is a major functional constituent of avian spermatozoa, the effects of two dietary oils rich in fatty acids which are metabolic precursors of 22:4n-6 on the fatty acid profiles of testicular lipids were investigated during a 39 week period of supplementation from 21 to 60 weeks of age. The effects on liver lipids were determined for comparison. Dietary supplementation of male chickens with Arasco Oil, which provides a large amount of arachidonic acid (20:4n-6), increased the proportion of 20:4n-6 in liver phospholipid by almost 2.5-fold. Although liver phospholipid normally contains very little 22:4n-6, this proportion was significantly increased as a result of Arasco feeding, indicating that the conversion of 20:4n-6 to 22:4n-6 was occurring. The phospholipid of the testis contains much higher proportions of 20:4n-6 and particularly of 22:4n-6 than the liver; supplementation with Arasco Oil significantly increased the proportions of both these polyunsaturates in testis phospholipid but the magnitude of this effect was much lower than that which occurred in the liver. Dietary supplementation with Evening Primrose Oil which contains ${\gamma}-linolenic $ acid (18:3n-6) resulted in significant increases in the proportions of 20:4n-6 and 22:4n-6 in liver phospholipid, although the extent of this increase was less than that produced by the Arasco Oil. By contrast, the feeding of Evening Primrose Oil did not alter the fatty acid composition of phospholipid in the testis. The findings raise the possibility that dietary supplementation with Arasco Oil may modulate the fatty acid profile of avian spermatozoa in a way which could potentially be beneficial for fertility. Moreover, the weights of the testes were almost doubled as a result of supplementation with Arasco Oil or Evening Primrose Oil.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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