• Journal of Plant Biotechnology
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• 제30권2호
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• pp.135-141
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• 2003

Peroxiredoxin(Pix) are large family of peroxidases that reduce alkyl hydroperoxides and hydrogen peroxide. A cDNA clone (referred to as swPrxl) encoding Pix was from a sweetpotato cDNA library constructed from suspension-sultured cells, and its expression was investigated in terms of stress. The swPrxl contained an open reading frame (ORF) encoding mature protein of 193 amino acids with calculated molecular mass of 20.8kDa. The predicted amino acid sequence of swPrxl has two conserved cysteines that are essential resicues for the reduction of peroxides. It showed high amino acid sequence homology ot PixIIF of Arabidopsis (77%) and putative Prx of rice(72%). RNA gel-blot analysis showed that swPrxl gene was expressed dominantly in leave among intact tissues, and also highly detect in suspension-cultured cells. Interestingly, the level of swPrxl transcripts was almost the same regardless of the growth stage in suspension culture. Furthermore, the transcription level of swPrxl gene was not significantly changed in response to various stress treatments such as wounding, extreme temperature and stress-related chemicals RT-PCR analyses.

• 식물조직배양학회지
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• 제21권5호
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• pp.309-314
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• 1994

간편하면서도 효율적인 단자엽 식물의 형질전환 기법을 개발하기 위하여 배발생 세포를 직접 electroporation하여 DNA를 도입하는 실험을 벼와 잔디에서 실시하였다. 잔디는 수정 후 3주된 미숙배에서 캘러스를 유도하였으며, 2.4-D가 1 mg/L 함유된 액체 MS배지로 옮겨 진탕배양한 것을 electroporation 실험에 이용하였다. 벼는 20 mm 정도의 미숙화서 유래의 캘러스를 액체 N$_{6}$배지(1 mg/L 2.4-D 함유)에서 진탕배양하여 획득한 세포주를 사용하였다. 액체 진탕배양한 세포괴를 GUS expression vector인 pGA1074 (30 $\mu\textrm{g}$/ml)와 함께 MS 액체 배지에서 Electroporation하였다. 세포벽과 세포막을 통한 세포로의 DNA 전이는 GUS 유전자의 발현 여부 및 정도에 따라 결정하였다. 400 volt, 800 $\mu$F capacitance로 electroporation 처리된 벼와 잔디의 세포괴들은 200 ${\mu}\ell$ (packed cell volume)의 세포괴 당 25 unit (1 unit=파란색을 띤 독립된 세포군) 이상의 빈도로 GUS 활성을 나타내었다. 반면에 무처리 세포주 및 처리한 비배발생 세포주에서는 GUS 발현이 일어나지 않음을 반복적으로 확인차였다. 따라서 electroporation에 의한 벼와 잔디의 형질전환실험에서 원형질체 대신 intact한 배발생 세포가 이용될 수 있음을 의미한다

• 식물조직배양학회지
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• 제27권2호
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• pp.133-136
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• 2000

미생물에서 분리한 dykellic acid가 식물세포에 미치는 생리적 영향을 평가하기 위하여, 담배 광혼용영양배양세포(photomixotrophic cultured cells, PM세포)에 dykellic acid를 다양한 농도로 처리하여 세포의 생장과 단백질 함량 및 superoxide diamutase (SOD)활성에 미치는 영향을 조사하였다. 담배 PM세포는 0.7 mg/L 2,4-D, 0.3 mg/L kinetin, 30g/L sucrose, 200 mM NaCl를 함유한 MS배지에서 $25^{\circ}C$, 광조건에서 현탁배양 (100 rpm) 하였다. 계대배양시 화합물을 처리한 후 12일째의 세포생장 억제와 배지의 이온 전도도를 측정한 세포막손상의 결과는 일치하였으며, 화합물은 세포생장을 강하게 억제시켰다 ($IC_{50}$/, 약 20 $\mu$M). Dykellic acid 처리농도가 증가함에 따라 단위세포 무게당 단백질 함량과 SOD 비활성도를 현저히 증가시켰다. 이상의 결과로 dykellic acid는 식물세포 생장을 저해하는 활성을 가지고 있으며, 담배 PM세포는 적은 양으로도 천연물의 생리활성을 평가할 수 있는 유용한 생물소재임이 확인되었다.

• 한국약용작물학회지
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• 제12권6호
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• pp.494-499
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• 2004

체세포배발생을 이용한 가시오갈피 대량증식체계 확립을 위하여 저온처리에 의한 체세포배의 장기저장 실험을 수행하였다. 현탁배양 체세포배의 $4^{\circ}C$에서의 저온저장에는 구형배 이전의 조기단계의 체세포배가 적합하였고 $2\;g/{\ell}$ 이하의 낮은 접종밀도에서는 36개월 이상 저장이 가능하였다. 장기간 저온 저장한 체세포배는 상온에 옮긴 후 2,4-D를 첨가한 배지에서만 성장을 회복하여 배발생캘러스를 형성하였으며 배발생캘러스의 증식속도는 배양온도를 $32^{\circ}C$로 높였을 때에 가장 효율적이였다.

• Journal of Plant Biology
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• 제32권4호
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• pp.227-233
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• 1989

Single cells obtained from suspension culture of mature embryo-derived callus in wheat(Triticum aestivum L. cv Jang Kwang) were cultured to regenrated into the plantlet. Cell clusters and embryogenic calluses were efficiently developed from when the single cells clutured on the MS medium supplemented with 10${\mu}{\textrm}{m}$ 2,4-D. Upon transfer to hormone-free MS medium containing 10 mg/I AgNO3, embryogenic calluses gave rise to shoots, probably through somatic embryogenesis.

• 한국환경보건학회지
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• 제36권4호
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• pp.271-278
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• 2010

The appearance of Asian Dust (AD) originating from China and Mongolia during spring each year is a meteorological phenomenon periodically observed in extensive regions of East Asia. According to a previous epidemiological study, AD has adverse effects on both human beings and ecosystems. In this study, we collected total suspension particles (TSP) in the AD period and Non-AD (NAD) period. We extracted organic components from TSP using dichloromethane (DCM), and the polyaromatic hydrocarbons (PAHs) were analyzed. The DCM extracts contained PAHs such as benzo(b)fluoranthene, benzo[g,h,i]perylene, benzo(k)fluoranthene, benzo(a)pyrene, and pyrene. No significant difference was observed in cytotoxicity of the DCM extracts from AD versus NAD when tested on the human bronchial epithelial cells, BEAS-2B. e also examined the toxic mechanisms of AD extracts in cultured BEAS-2B cells and RAW264.7 cells, and in BEAS-2B cells observed increased levels of reactive oxygen species (ROS), decreased glutathione (GSH), and induced caspase-3 activity. Increased expression of oxidative stress-related and inflammation- related genes were also observed in BEAS-2B cells, while nitric oxide (NO) levels were increased in RAW264.7 cells. Taken together, the results suggest that in these cultured cells, AD may induce cytotoxicity through oxidative stress and pro-inflammatory signals.

• 한국정보통신학회논문지
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• 제21권6호
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• pp.1212-1217
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• 2017

척수신경절의 신경 세포와 슈반세포의 공동 배양으로 수초화 형성 세포 집단이 제조되었다. 슈반세포와 뉴런 세포가 쥐의 배아의 척수신경절로 부터 각각 in vitro에서 분리되었다. 배양된 슈반세포와 뉴런 세포는 동일한 평판접시에서 공동배양 되었다. 본 실험과정은 다음과 같은 4 단계로 구성되어 있다 : 첫 번째 단계는 배아의 척수 신경절 세포의 현탁 과정, 두 번째 단계는 안티 mitotic cocktail의 추가 과정, 세 번째 단계는 척수신경절 세포의 정제 과정, 및 네 번째 단계는 척추 신경절 세포에 슈반 세포의 추가 과정이다. 이들 세포들은 때 수초화가 진행되었다. 이렇게 수초화된 공동 배양은 Semliki forest virus에 의해 감염되었고 그 때 탈수초화 과정을 유발시켰다. 우리는 수초화된 뉴런에 존재하는 peripheral myelin protein 22의 항체를 이용하여 수초화 과정과 탈수초화 과정을 확인하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제6권3호
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• pp.209-212
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• 1996

A two-step cooling technique has been developed for cryopreservation of suspension cultured Scutellaria baicalensis cells. Efficient regrowth of cryopreserved cells was obtained in cryoprotected cells with a mixture of 1.5 M glycerol and 0.4 M sucrose in Schenk and Hildebrandt medium without pretreatment in high osmotic medium. Optimum freezing conditions were found to be a cooling rate of $0.5^{\circ}C$ min from $4^{\circ}C$ to $-40^{\circ}C$, and then retaining samples at $-40^{\circ}C$ for 30 min prior to plunging into liquid nitrogen. A regrowth rate of approximately 95$%$ was obtained after three month storage in liquid nitrogen. Callus cultures established from the cryopreserved cells were found to produce the same patterns of flavonoid accumulation and retain their baicalin producing activity.

• 식물조직배양학회지
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• 제24권1호
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• pp.57-61
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• 1997

Superoxide dismutase (SOD) 고생산세포주로 선발된 토마토(Lycopersicun esculentum) 배양세포를 사용하여 현탁배양에 따른 SOD 활성과 isoenzyme변화를 조사하고 토마토 식물체의 것과 비교하였다. 현탁배양은 세포생중량 2 g을 1 mg/L 2,4-D, 30 g/L sucrose를 함유한 MS 배지 50 mL과 함께 mL flask에서 $25^{\circ}C$암상태로 배양(100 rpm)하였다. 세포생장은 계대배양후 20일에 최고점에 도달한 후, 급격히 감소하며 배양 후 23일부터 세포가 검게 변하였다. 세포 단위무게당 SOD활성(unit/g dry cell wt)은 배양 후 23일부터 증가하여 28일째에 최고활성(52,400 unit)을 나타낸 후 급격히 감소하였다. 세포 밖으로 분비되는 extracellular SOD활성은 배양 후 25일에 최고치(27,800 unit/so mL medium)를 나타낸 후 감소하였다. Flask 전체의 SOD활성은 배양 후 25일에 최대치(35,700 unit)를 나타내었으며 extracellular SOD 활성이 약 75%을 차지하였다. 토마토 배양세포에는 4개의 SOD isoenzyme이 존재하며, isoenzyme의 패턴변화는 세포생장에 따른 효소활성의 변화와 일치하였다. 토마토 식물체는 배양세포에 없는 CuZnSOD가 존재하며 배양세포와 식물체 조직사이에는 서로 다른 isoenzyme 패턴이 존재함을 알 수 있었다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제45권4호
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• pp.340-346
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• 2018

In this study, the effect of elicitors such as yeast extract (YE), methyl jasmonate (MeJA) and salicylic acid (SA) on the accumulation of eurycomanone in Eurycoma longifolia cell cultures were investigated. Suspension cells of E. longifolia was cultured in Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 30 g/L sucrose, 1.25 mg/L naphthaleneacetic acid (NAA) and 1 mg/L kinetin at a shaking speed of 120 rpm. Elicitors were added in the culture at different concentrations and times to stimulate eurycomanone accumulation in the Eurycoma longifolia cells. Eurycomanone content was determined by HPLC with a C18 column, flow rate of 0.8 mL/min, run time of 17.5 min, and a detector wavelength of 254 nm. The stationary phase was silica gel and the mobile phase was acetonitrile: $H_2O$. Non-elicited cells were used as the control. The study showed the effect of different elicitor concentrations, YE at 200 mg/L, MeJA at $20{\mu}M$ and SA at $20{\mu}M$ stimulated high production of eurycomanone. In which, treatment of $20{\mu}M$ MeJA after 4 days of culture resulted in the highest accumulation of this compound (17.36 mg/g dry weight), approximately 10-fold higher than that of untreated cells (1.70 mg/g dry weight).