Kim, Joo-Young;Chung, Kun-Sub;Park, Jeon-Han;Kwak, Yi-Sub;Lee, Bong-Ki
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.1
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pp.55-64
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2009
A B cell-specific growth substance (BGS) was isolated from the slime layer of Bacillus licheniformis E1. Unlike LPS, the BGS was not affected by polymixin B, an inhibitor of LPS, or by TLR4, and resulted in the growth of B cells. When BALB/c mice were treated with the BGS, the B cell population was found to increase in both the bone marrow and the spleen, with a marked increase after 24 h in the bone marrow and after 48 h in the spleen. When using antibodies to B cell lineage-restricted surface molecules to analyze the B cell population changes resulting from treatment with the BGS, an increase in immature B cells ($IgM^+$ and $AA4.1^+$) and mature B cells ($IgM^+$ and $IgD^+$) was found in the bone marrow 24 h after treatment with the BGS, whereas a decrease in mature B cells and increase in $IgG^+$ B cells were found in the spleen. When the BGS and OVA antigen were injected into the peritoneal cavity of BALB/c mice, this resulted in a high OVA-specific antibody titer in the sera, similar to that induced by aluminum hydroxide. Therefore, it is anticipated that the mass production of the BGS by B. licheniformis E1 could be used for studies of B cells in immunology, and contribute to the development of a new adjuvant for vaccine manufacture.
Two hybridoma cell lines against Cwptosporinium possum oocysts nFRl-CN911 were produced. The isotype of these 2 monoclonal antibodies (mAbs) was IgG2b (lE7.2) and and IgM (C6). Enzyme immuno-transfer blotting analysis showed that 157.2 reacted specifically to 36 kDa protein and C6 reacted to 67 and 70 kDa proteins. C. pcnlum was bound specifically to the surface region of oocysts by these mobs. No cross-reactivity was observed with tachyzoites of ToxopLosma gonnii and oocysts of Eimeria zuernii,5. bouis and E. canadensis of bovine origin. The indirect immunofluorescence assay (IIF) using mAb C6 was successful with counterstain. With the IIF using mob C6, oocysts appeared as 3 to $5{\mu}m$ spherical objects fluorescing bright apple green against a reddish dark background. The IIF using mAb C6 was agreed in specificity and sensitivity with those of a commercial diagnostic kit. These results demonstrated that the produced mAbs were specific to C. parvum and that the mAb C6 could be used for diagnosis of cryptosporidiosis.
We previously reported that Streptococcus pneumoniae capsule attached to the surface protein (JY-Pol) was protective to systemic pneumococcal infection. The JY -Pol antigen induced IgM, IgG, and IgA in mice and provoked cell-mediated immunity. In this current study, we investigated the effect of anti JY-Pol antiserun and monoclonal antibody C2 (Mab C2) specific for the JY-Pol antigen against the pneumococcal disease. Mice that were given the antiserum survived longer than mice that received antiserum pre-absorbed with S.pneumoniae cells or DPBS as a negative control. Heat-treated anti JY-Pol antiserum resulted in survival rates similar to intact fresh JY-Pol antiserum. Mab C2 isolated from JY-Pol-immunized mice also enhanced resistance of naive mice against the pneumococcal diseaser. This protection by Mab C2 appeared to be mediated by opsonization as determined in a RAW 264.7 monocyte/macrophage cell line. Epitope analysis showed that Mab C2 epitope consisted of glucuronic acid and glucose that blocked the interaction of JY-Pol to the C2. Taken together, these data indicate that the antiserum induced by the JY-Pol, a naturally pneumococcal conjugate formula, mediated the protection by passive transfer, which was confirmed by protective effect of Mab C2.
Background: There are at least two different subsets of B cells, B-1 and B-2. The characteristic features and function of B-2 cells in addition to the effect of steroids on B-2 cells are well-known. Although B-1 cells have different features and functions from B-2 cells, the effect of steroids on B-1 cells is not completely understood. Therefore, this study examined the effects of dexamethasone on peritoneal (or B-1 cells) and splenic B cells (or B-2 cells). Methods: Purified B cells were obtained from the peritoneal fluid and the spleens of mice. The isolated B cells were cultured in a medium and after adding different concentrations of dexamaethasone. The cell survival rate was measured by flow cytometry using propidium iodide. The expression level of the B cell surface marker was analyzed by flow cytometry. During the culture of these cells, immunoglobulin secreted into the culture supernatants was evaluated by an enzyme-linked immunosorbent assay. Results: The survival rate of peritoneal and splenic B cells decreased with increasing dexamethasone concentration. However, the rate of peritofieal B cell apoptosis was lower than that of splenic B cells. CDS and B7.1 expression in peritoneal B cells and CD23 and sIgM expression in splenic B cells after the dexamethasone treatment were reduced. When B cells were treated with dexamethasone, the spontaneous IgM secretion decreased with increasing dexamethasone concentration. Conclusion: Dexamethasone induces apoptosis in peritoneal and splenic B cells. However, peritoneal B cells are less sensitive to dexamethasone. The dexamethasone suppressed expression of the surface markers in peritoneal B cells is different from those in splenic B cells.
In the present study, we exarnined anti-allergic effect of SGBHB in cultured B cells. B cells were prepared from isolated murine splenocytes and activated by co-treatment of anti-CD40 monoclonal antibody and recombinant IL-4 allergens. Anti-allergic effects of SGBHB in activated B cells were determined by measuring B cell surface activated molecules (CD23+ and CD11a+), and expression levels of IL-$1{\beta}$, IL-6, IL-10, TNF-$\alpha$, IgE, and HRF. The major findings are summarized as follows. 1. SGBHB treatment did not produce significant cytotoxic effects on mouse lung fibroblast cells. 2. SGBHB produced significant inhibitory effect on the expression of B cell surface activated molecules (CD23+ and CD11a) in activated B cells. 3. SGBHB treatment significantly inhibited expression levels of IL-$1{\beta}$, IL-6, and TNF-$\alpha$ mRNAs in activated B cells.IL-6 protein levels were significantly decreased by $100{\mu}g/m{\ell}$ of SGBHB treatrrient, and TNF-$\alpha$ protein levels were decreased compared to the control group, but statistically insignificant. 4. SGBHB treatment significantly increased IL-10 at both mRNA and protein levels in activated B cells. 5. SGBHB treatment significantly inhibited levels of IgE production. Thus, the present data suggest that SGBHB has an anti-allergic effect on activated B cells by controlling irnmune responses, and further implicates the possibility on clinical application as a therapeutic agent.
Proceedings of the Korean Institute of Surface Engineering Conference
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2007.11a
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pp.164-165
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2007
Si(중간층)/DLC(diamond-like carbon)막은 스퍼터와 이온소스(ion source)법에 의한 복합방식(hybrid method)을 이용하여 3mTorr의 반응가스 벤젠($C_6H_6$)분위기에서 Si wafer에 기판온도 $130^{\circ}C$로 180분간 증착하였다. 평가는 표면과 단면에 대해 주사전자현미경(scanning electron microscopy, SEM)과 투자전자현미경(trasmission electron microsope, TEM)으로 관찰하였다. 경도와 마찰계수는 나노인텐터(nanoindetor)와 마모시험기를 이용하였으며, 박막의 구조는 라만스펙트럼으로 분석하였다. 그 결과 박막의 두께는 약 $0.9{\mu}m$, 표면조도는 약 $0.34{\sim}1.64nm$로 평탄한 표면을 가지며 경도는 약 $35{\sim}37GPa$, 마찰계수는 약 $0.02{\sim}0.07$로 관찰되었다. 라만분광법과 전자회절패턴에 의해 IG/ID의 함량비는 $0.54{\sim}0.59$로 $sp^2$와 $sp^3$가 혼재된 전형적인 비정질 구조임을 확인하였다.
Human basophilic KU812F cells express a high affinity for IgE receptor, $Fc{\varepsilon}RI$, which plays an important role in immunoglobulin E (IgE)-mediated allergic reactions. Using the human basophilic KU812F cells, we assessed the inhibitory effects of the ethanolic extract from Chrysanthemum zawadsaki(CZ) on $Fc{\varepsilon}RI$${\alpha}$ chain expression. Flow cytometric analysis showed that cell surface $Fc{\varepsilon}RI$${\alpha}$ chain expression was suppressed when the cells were cultured with CZ extract. RT-PCR analysis showed that the mRNAs for $Fc{\varepsilon}RI$${\alpha}$ chain decreased by the treatment of CZ extract. Moreover, CZ extract was also observed to result in a reduction in the release of histamine from anti-$Fc{\varepsilon}RI$ antibody (CRA-1)-stimulated cells. These results suggest that CZ extract may exert anti-allergic activity through down-regulation of $Fc{\varepsilon}RI$${\alpha}$ chain expression and a subsequent decrease in histamine release.
Seo, Beom-Seok;Lee, Sang-Hoon;Lee, Ju-Eon;Yoo, Yung-Choon;Lee, Junglim;Park, Seok-Rae
IMMUNE NETWORK
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v.13
no.5
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pp.205-212
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2013
Dectin-1, which specifically recognizes ${\beta}$-glucan of fungal cell walls, is a non-Toll-like receptor (TLR) pattern recognition receptor and a representative of C-type lectin receptors (CLRs). The importance of Dectin-1 in innate immune cells, such as dendritic cells and macrophages, has previously been well studied. However, the function of Dectin-1 in B cells is very poorly understood. To determine the role of Dectin-1 in B cell activation, we first investigated whether mouse B cells express Dectin-1 and then assessed the effect of Dectin-1 stimulation on B cell proliferation and antibody production. Mouse B cells express mRNAs encoding CLRs, including Dectin-1, and surface Dectin-1 was expressed in B cells of C57BL/6 rather than BALB/c strain. Dectin-1 agonists, heat-killed Candida albicans (HKCA) and heat-killed Saccharomyces cerevisiae (HKSC), alone induced B cell proliferation but not antibody production. Interestingly, HKSC, HKCA, and depleted zymosan (a selective Dectin-1 agonist) selectively enhanced LPS-driven IgG1 production. Taken together, these results suggest that, during fungal infection, ${\beta}$-glucan-stimulated Dectin-1 may cooperate with TLR4 to specifically enhance IgG1 production by mouse B cells.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.2
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pp.271-277
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2004
This study was designed to evaluate the effect of Bu -Zhong-Yi-Qi-Tang extracts, a prescription of traditional oriental medicine, on development of the B cells. In the bone marrow cell cultures, progenitors viability, expressions of particular cell- surface proteins and production of immunoglobulins were investigated in the presence of Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang extracts. The administration of Bu-Zhong -Yi-Qi-Tang polysaccharide fraction increased the viable cell numbers of the precursor B cells, and elevated expression levels of CD19/CD40 specific for pre-B cells after 10 days culture were demonstrated by flow cytometry analysis. The production of immunoglobulin M in the presence of polysaccharide fraction increased progressively in the culture supernatant, and preferentially induced class switching to IgG1, IgG2a and IgG3. These results indicated that Bu -Zhong -Yi-Qi -Tang strong1y correlated with the development of precursor B cells in the bone marrow cell culture. Therefore the polysaccharide fraction of Bu-Zhong-Yi -Qi-Tang might be a useful radioprotector, especially since it is a relatively non-toxic natural product. Further studies are needed to better characterize the protective nature of Bu-Zhong-Yi -Qi -Tang extract.
Kim, Hyun-Ook;Kim, Woo-Jeong;Lee, Kap-Ho;Hon, Sun-Ig
Korean Journal of Materials Research
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v.17
no.8
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pp.408-413
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2007
Process of the hydroxyapapite(HA) precipitation on bioactive titanium metal prepared by NaOH in a modified-simulated body fluid(mSBF) was investigated by high resolution transmission electron microscope (HRTEM) attached with energy dispersive X-ray spectrometer(EDX). The amorphous titanate phase on titanium surface is form by NaOH treatment and an amorphous titanate incorporated calcium and phosphate ions in the liquid to form an amorphous calcium phosphate. With increasing of soaking time in the liquid, the HA particles are observed in amorphous calcium phosphate phase with a Ca/P atomic ratio of I.30. The octacalcium phosphate (OCP) structure is not detected in HRTEM image and electron diffraction pattern. After a long soaking time, the HA particles grow as needle-like shape on titanium surface and a large particle-like aggregates of needle-like substance were observed to form on titanium surface within needle-like shape. A long axis of needle parallels to c-direction of the hexagonal HA structure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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