Background: Ginsenosides are the major components responsible for the biochemical and pharmacological actions of ginseng, and have been shown to have various biological activities. In this study, we investigated the antiviral activities of seven ginsenosides [protopanaxatriol (PT) type: Re, Rf, and Rg2; protopanaxadiol (PD) type: Rb1, Rb2, Rc, and Rd)] against coxsackievirus B3 (CVB3), enterovirus 71 (EV71), and human rhinovirus 3 (HRV3). Methods: Assays of antiviral activity and cytotoxicity were evaluated by the sulforhodamine B method using the cytopathic effect (CPE) reduction assay. Results: The antiviral assays demonstrated that, of the seven ginsenosides, the PT-type ginsenosides (Re, Rf, and Rg2) possess significant antiviral activities against CVB3 and HRV3 at a concentration of $100{\mu}g/mL$. Among the PT-type ginsenosides, only ginsenoside Rg2 showed significant anti-EV71 activity with no cytotoxicity to cells at $100{\mu}g/mL$. The PD-type ginsenosides (Rb1, Rb2, Rc, and Rd), by contrast, did not show any significant antiviral activity against CVB3, EV71, and HRV3, and exhibited cytotoxic effects to virus-infected cells. Notably, the antiviral efficacies of PT-type ginsenosides were comparable to those of ribavirin, a commonly used antiviral drug. Conclusion: Collectively, our findings suggest that the ginsenosides Re, Rf, and Rg2 have the potential to be effective in the treatment of CVB3, EV71, and HRV3 infection.
Park Seung-Joung;Yoo Hyun-Ju;Choi Hee-Seok;Seo Byeong-Yun;Yang Seon-Ho;Kim Yeong-Hun;Jeong Jae-Yeal;Lee Ki-Nam
Journal of Society of Preventive Korean Medicine
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v.8
no.2
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pp.81-98
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2004
1. The cell viability was determined by MTT method. Their cytotoxic activities against three cancer cell lines such as A549, MDA-MB-231 and SNU-C4 cell line were tested. Among them, The methanol extract of Saururus chinensis Baill. showed the strongest cytotoxic effect against SNU-C4 cells. These results suggest that the methanol extract of Saururus Chinensis Baill. possessed a potential antitumorous agent. 2. In vitro the antitoxic activity of ethanol extract of Saururus Chinensis Bail on NIH 3T3 fibroblasts was evaluate by the MTT (3-(4,5-dimethyl- thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetra캐lium bromide) and SRB (sulforhodamine B protein) assays. The number of NIH 3T3 fibroblasts were increased and tend to regenerate. These results suggest that Saururus Chinensis Bail extract retains a potential antitoxic activity. 3. Complexation of Cd (II) ion with ligands such as quercetin has been determined by UV-vis spectrophotometric method in tris buffer solution at various pH. It was found that only 1 : 1 Cd-complex is formed by the interaction between catechol moiety in ring B and cadmium [Cd(II)] in aqueous solution. The spectral parameters for Cd-complex were determined by Beer's law at various pH. It has shown that 1 : 1 Cd-complex has a maximum absorbance and red shift by the alkaline pH.
We evaluated the effects of various factors (e.g., serum, inhibitors of protein synthesis, and cytoskeleton and protein kinases) on early PMA-induced THP-1 cell adhesion using an adhesion assay with Sulforhodamine B (SRB) staining, which was used to assess the proliferation of the attached cells. THP-1 cell adhesion to a plastic substrate was detected 1 hr after exposure to Phorbol 12-Myristate 13-Acetate (PMA) and peaked after 18 hr. At concentrations > 25 nM PMA, the level of adhesion did not change. Based on our preliminary results, we used 25 nM PMA and 5 hr of culture as standard assay conditions. Early PMA-induced cell adhesion was not affected by the presence of serum or PD 98059 in the culture medium, but was affected by the addition of PKC inhibitors and cycloheximide. In the presence of actin inhibitor with PMA, the cell adhesion increased when comparing with PMA treatment only. Thus, early PMA-induced adhesion of THP-1 cells does not require serum in the culture medium, MAP-kinase activation, or actin polymerization, but does require de novo protein synthesis and PKC activation. Our SRB-based cell adhesion assay may be used to screen other PKC inhibitors.
Efficient extraction method of crude protein-bound polysaccharide (CPBP) from Agaricus blasei Murill was established. CPBP yields by ultrasonic and hot water extractions were 13.0 and 7.8%, respectively. Pressure extraction for 3 hr gave the highest ${\beta}-glucan$ content; no significant difference was observed between 2 and 3 hr extraction. Four volumes added ethanol gave the highest yields of CPBP and ${\beta}-glucan$ contents at 10.89 and 35.97%, respectively. Decomposition temperature of CPBP was $240-365^{\circ}C$, showing relatively good thermal stability. In SRB (sulforhodamine B) assay, CPBP treatment at $1,000\;{\mu}g/mL$ for 72 hr inhibited proliferations to A549, MCF-7, and AGS cancer cells by 43.9, 21.4, and 32.5%, respectively.
Geraniol (1), olivetol (2), cannabinoids (3 and 4) and 5-fluorou.a.il (5). were tested for their growth inhibitory effects against SK-MEL-3 cell lines using two different 3-(4,5-dimethylthiazol- 2yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) assay and sulforhodamine B protein (SRB) assay. These compounds showed inhibitory activity in vitro in the micromolar range against SK-MEL-3 cell lines. In general, the antitumor activity of these compounds (1, 2, 3, 4 and 5) was in a dose-dependent over the micromolar concentration range $1\;to\;100{\mu}M$. The comparison of $IC_{50}$ values of these compounds in tumor cell lines shows that their susceptibility to these compounds decrease in the following order : OLVTL > CBG > CBD > 5-FU > CRNL in MTT assay, CBG > OLVTL > CBD > GRNL > 5-FU in SRB assay. Cannabinoids (3 and 4) and 5-fluorouracil (5) were tested for their cytotoxic effects on NIH 373 fibroblasts using two different MTT assay and SRB assay. These compounds exhibited potent cytotoxic activities in vitro in the micromolar range against NIH 373 fibroblasts. In general, the cytotoxic activities of these compounds (3, 4 and 5) were in a dose-dependent over the micromolar concentration range $1\;to\;100{\mu}M$. The comparison of $CD_{50}$ values of these compounds on NIH 373 fibroblasts shows that their susceptibility to these compounds decrease on the following order ; CBD > 5-FU > CBG in MTT assay and SRB assay. Cannabigerol (3) was shown the least cytotoxic activity on NIH 373 fibroblasts. Cannabigerol (3) exhibited the most growth-inhibitory activity against SK-MEL-3 cell lines.
Di-(2-ethylhexyl) adipate(DEHA) has been used extensively as a plasticizer in the manufacture of plastic products such as PVC films. Though, phthalate esters plasticizers have been known to induce endocrine system-mediated responses, few studies have been conducted for the screening of estrogenic activity of DEHA, an adipate plasticizer. This study was initiated to evaluate the estrogenic activity of DEHA by in vitro E-screen assay and in vivo uterotrophic assay. MCF-7 human breast cancer cells were treated with $DEHA(5{\times}10^{-9}{\sim}5{\times}10^{-4}\;M)$, for 144 hr, and cell proliferation was determined by sulforhodamine B(SRB) assay. DEHA dissolved in corn oil was administered subcutaneously to ovariectomized(OVX) female Sprague-Dawley rats at dosage levels of 0, 2, 20 and 200 mg/kg/day for three consecutive days. Rats were sacrificed 24 hr after final treatment and vagina and uterus(wet and blotted) weights were obtained. E-screen assayed DEHA did not generate cell proliferation at treated concentrations$(5{\times}10^{-9}{\sim}5{\times}10^{-4}\;M)$, whereas 17 ${\beta}-estradiol$(E2), the positive control, induced cell proliferation at low concentrations$(5{\times}10^{-14}{\sim}5{\times}10^{-9}\;M)$. In the uterotrophic assay, DEHA did not change vagina and uterus(wet and blotted) weights at dosage levels up to 200 mg/kg/day treatment. These results demonstrated that DEHA did not exhibit the estrogenic activity as determined by in vitro E-screen assay and in vivo uterotrophic assay.
The antioxidant activity and cytotoxic effect of an ethanol extract from Seoritae were analyzed to develop new functional food materials. The antioxidant activity of Seoritae was determined by measuring electron donating ability with 1,1-diphenyl-2picrylhydrazyl (DPPH) and 2-2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS) assays, as well as the ferric reducing antioxidant power (FRAP) assay. The cytotoxic effect of the Seoritae ethanol extract was measured with the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-dipheltetrazolium (MTT) and sulforhodamine B (SRB) assays. As a result, the electron donating abilities of Seoritae against the DPPH and ABTS radicals were 63.75% and 87.68% at 500 ${\mu}g$/assay, respectively. The $IC_{50}$ values of Seoritae in the DPPH and ABTS assays were 385.39 ${\mu}g$/assay (128.46 ${\mu}g/mL$) and 209.39 ${\mu}g$/assay (51.83 ${\mu}g/mL$). Additionally, the FRAP value of Seoritae was 0.84 $FeSO_4$ eq. mM at 800 ${\mu}g$/assay. The total amounts of polyphenols and flavonoids, which indicate the antioxidant capability of Seoritae extract were 1.65 mg/g and 0.59 mg/g, respectively. Moreover, Seoritae extract showed a high cytotoxic effect of up to 81% against human cancer cells, particularly A-549 and HeLa cells. The growth inhibition rate of Seoritae extract against A-549 and HeLa cells was up to 76.48% and 75.67% in the MTT assay, and 78.98% and 80.54% in the SRB assay, respectively. The results of this study suggest that an ethanol extract of Seoritae is a potentially good natural antioxidant.
Hwang, Sung-Jin;Kim, Jae-Hun;Ra, Myung-Suk;Hwang, Baik
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.9
no.1
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pp.8-14
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2001
The purpose of this research was to investigate the effects of extracts from cultured hairy roots of R. undulatum on human kidney epithelial cells. The cytotoxicity was measured by colorimetric assay using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT), neutral red (NR) and sulforhodamine protein B (SRB) with human kidney epithelial cell lines A498. MTT, NR and SRB quantities decreased propotionally in cultured A498 cells treated with the water or chloroform extracts of cultured hairy roots at increasing concentrations. These results suggest that extracts of cultured hairy roots are cytotoxic on human epithelial cells. The cytotoxicity of chloroform fraction was stronger than that of water fraction. The values of $MTT_{50},\;NR_{50}\;SRB_{50}$ of the extracts of chloroform fraction and those of water fraction were measured to be $289.3{\mu}g/ml,\;302.7{\mu}g/ml,\;433.8{\mu}g/ml\;and\;475.8{\mu}g/ml,\;428.3{\mu}g/ml,\;549.5{\mu}g/ml$, in A498 cell line.
The interaction of cell adhesive protein and polypeptide with bone marrow stromal stem cells (BMSCs) grown in tissue engineered films and scaffolds were examined. Several proteins or polypeptide known as cell-adhesive were coated adsorption on poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) films and scaffolds and adhesion and proliferation behavior of BMSC on those surfaces were compared. The protein and polypeptide used include collagen IV, fibrinogen, laminin, gelatin, fibronectin, and poly(L-lysine). The protein and polypeptide were adsorbed on the PLGA film surfaces with almost monolayer coverage except poly(L-lysine). BMSCs were cultured for 1, 2, and 4 days on the protein- or polypeptide-adsorbed PLGA films and scaffolds. The cell adhesion and proliferation behaviors were assessed by sulforho damine B assay. It was observed that the protein- or polypeptide-adsorbed surfaces showed better cell adhesion and proliferation than the control.
In this study, we investigated the in vitro anti-obesity, anti-cancer activity and single oral dose toxicity of Inonotus xeranticus extracted by methanol (INXM) or ethyl acetate (INXE). In order to investigate anti-obestity effect of Inonotus xeranticus extracts, the 3T3-L1 cells were treated with these extracts at various concentrations(1, 10, 100 and $300{\mu}g/ml$). It was observed that 3T3-L1 cells treated with $100{\mu}g/ml$ of Inonotus obliquus ethyl acetate extract (INOE), INXM and INXE, in the absence of differentiation cocktail (0.5mM isobutylmethylxanthine (IBMX) $1{\mu}M$ dexamethasone, $1{\mu}M$ insulin), differentiated at a rate of 78.5, 80.9, and 76.4% respectively. Differentiation rates of 86.6% and 83.4% were observed in 3T3-L1 cells which were treated with differentiation cocktail at $100{\mu}g/ml$ of INXM and INXE, respectively. The anti-cancer effect of Inonotus xeranticus extracts was investigated using a method of sulforhodamine B in sarcoma 180 cell line. The cells were treated with these extracts (1, 10, 100 and $300{\mu}g/ml$) for 48 hours. The growth of cells which were treated with $300{\mu}g/ml$ of INXM was inhibited by 80.1%. The growth of sarcoma 180 cells which were treated with 100 and $300{\mu}g/ml$ of INXE was inhibited by 74.7% and 64.5%, respectively. In single oral dose toxicity study, no differences were observed between control and treated groups in clinical signs, body weight gains, and feed and water consumptions. The results indicated that Inonotus xeranticus extracts did not show any toxic effects at 2,000mg/kg in mice, and the $LD_{50}$ of these extracts was found to be higher than 2,000 mg/kg in this experiment. From the above results, Inonotus xeranticus methanol and ethyl acetate extracts might have useful clinical applications in the management of cancer and obesity and may also be useful as a medicinal food.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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