• 미생물학회지
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• 제42권2호
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• pp.131-134
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• 2006

Clavicorona pyxidata DGUM 29005의 균사 생육을 위한 최적 배양조건 및 효소 활성을 조사하였다. 균사 생육을 위한 최적 온도 및 pH는 각각 $24^{\circ}C$ 및 5.0이었다. 사용된 복합배지 중 malt extract medium (MEM)에서 가장 좋은 균사 생육을 나타내었다. 최소배지로 Czapek-Dox 한천배지를 사용하고 탄소원으로 trehalose, mannitol, sucrose 및 maltose 첨가시 균사생육이 우수하였다. 전반적으로 무기질소원이 유기질소원 보다 균사 생육을 더 촉진하였으며, 무기질소원으로 calcium nitrate를 사용하였을 때 균사 생육이 가장 우수하였다. 인산원으로 $Na_2HPO_4$를 사용했을 때 균사생육이 촉진되었으며, 가장 우수한 비타민원은 p-aminobenzoic acid이었다. MEM 액체배지를 사용하여 $24^{\circ}C$에서 20일간 C. pyxidata DGUM 29005를 배양하여 균사외 분비효소 및 균사내 효소의 활성도를 측정한 결과, 균사외 분비 효소 중 laccase의 활성도가 다른 효소에 비해 높았으며, ${\alpha}$-amylase, chitinase, lipase 및 pretense의 활성도는 낮거나 없었다.

• 미생물학회지
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• 제30권2호
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• pp.78-82
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• 1992

담자성 효모인 Trimorphomyces papilionaceous 는 생장에 thiamine 을 요구하는 최적배양온도는 25.deg.C 이며 넓은 범위의 pH (4.0-7.0) 에서 잘 자랐고 최소배지네 여러가지 탄소원을 가하고 (1%) 배양하여 균의 생장과 laccase 의 역가를 조사하였다. Glucose, frutose, mannose, sucrose 와 xylose 배지에서 OD 0.8 이상으로 자랐고 (A group), galactose 와 gluconate 의 경우 OD 0.3-0.6 (B group), 그리고 arbinose, lactose 와 pyruvate 배지에서 CD0.1-0.2 를 보였다. (C-group), Ribose, acetate, citrate, lactate 와 oxaloctate 는 이용하지 못하였다. Laccase 는 C group 배지에서 가장 높은 역가를 보였고 (8 u 이상), B group 배지에서 4-6 unit, A group 배지의 경우 가장 낮은 1.5 unit 이하를 보였다. 이균을 glucose 와 arabinose 가 혼합된 배지에 배양할 경우 laccase 는 catabolite repression 에 의하여 조절되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제8권3호
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• pp.214-221
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• 1998

A Brevibacterium ammoniagenes gene coding for glucose/mannose-specific enzyme II ($EII^{Glc}$) of the phosphoenolpyruvate-dependent phosphotransferase system (PTS) was cloned by complementing an Escherichia coli mutation affecting a ptsG gene, and the complete DNA nucleotide sequence was determined. The cloned gene was identified to be a ptsG, which enables the E. coli transportment to use glucose more efficiently than mannose as the sole carbon source in an M9 minimal medium. The ptsG gene of B. ammoniagenes consists of an open reading frame of 1,983 nucleotides putatively encoding a polypeptide of 661 amino acid residues and a TAA stop codon. The deduced amino acid sequence of the B. ammoniagenes $EII^{Glc}$ shows, at $46\%$, the highest degree of sequence similarity with the Corynebacterium glutamicum EII specific for both glucose and mannose. In addition, the $EII^{Glc}$ shares approximately $30\%$ sequence similarities with sucrose-specific and ${\beta}$-glucoside-specific EIIs of the several bacteria belonging to the glucose-PTS class. The 161-amino-acid C-terminal sequence of $EII^{Glc}$ is also similar to that of E. coli enzyme $IIA^{Glc}$, specific for glucose ($EIIA^{Glc}$). The B. ammoniagenes $EII^{Glc}$ consists of three domains; a hydrophobic region (EIIC) and two hydrophilic regions (EIIA, EIIB). The arrangement of structural domains, IIBCA, of the $EII^{Glc}$ is identical to those of EIIs specific for sucrose or ${\beta}$-glucoside. While the domain IIA was removed from the B. ammoniagenes $EII^{Glc}$ the remaining domains IIBC were found to restore the glucose and mannose-utilizing capacity of E. coli mutant lacking $EII^{Glc}$ activity with $EIIA^{Glc}$ of the E. coli mutant. $EII^{Glc}$ contains a histidine residue and a cysteine residue which are putative phosphorylation sites for the protein.

• 원예과학기술지
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• 제33권4호
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• pp.492-500
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• 2015

본 연구는 한국잔디에 발생하는 주요 병해인 갈색퍼짐병 억제능력을 보인 3가지 길항 미생물의 길항기작과 미생물제제의 개발에 필요한 배양 조건을 밝히는 것이다. 길항미생물들의 길항작용 기작인chitinase, cellulase 및 siderophore생산능 조사에서 선발 길항미생물 모두 chitinase 활성은 없었으나, I-009균주와 FRIN-001-1균주에서 cellulase와 siderophore의 활성이 있어 진균의 외막가수분해 및 경쟁적 길항작용이 있다고 판단하였다. 그러나 YPIN-022균주는 siderophore의 생산능은 확인하였으나, chitinase와 cellulase의 생산능은 없는 것으로 확인되었다. 선발 길항미생물의 실용화를 위해서는 대량 배양이 필수적이므로 배양학적 특징을 탐색하고자 배지, 온도, pH, 배양시간, 탄소원, 질소원, 무기화합물 등의 영향을 조사한 결과 세 균주 모두 LB 배지에서 생육이 가장 왕성하였다. 최적 배양 온도는 I-009와 FRIN-001-1균주는 pH 5-8범위에서 $35^{\circ}C$와 $30^{\circ}C$ 온도로 32시간 및 28시간 배양할 때 각각 균체의 생장이 가장 높았다. Pseudomonas 속의 YPIN-022균주는 $35^{\circ}C$ 배양 온도로 pH 5-9 배지위에서 24시간 배양시킬 때 생육이 가장 높았다. 탄소원으로 1% sucrose, 질소원으로 0.5% 효모추출물, 무기화합물로 0.1% 염화칼륨을 첨가한 배지에서 I-009와 YPIN-022균주의 생육이 가장 좋았으나, FRIN-001-1균주는 탄소원으로 mannitol, 무기화 합물로 인산칼륨 첨가배지에서 생육이 더 양호했다.

• 미생물학회지
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• 제28권1호
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• pp.55-64
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• 1990

원형질체 융합을 통하여 killer 효모의 유전형질을 기존의 ethanol 발효효묘에 도입하므로서 야생의 killer 효모에 저항성을 가지고, 오염효모를 치사시킬 수 있으며, ethanol 발효능도 유지하는 새로운 효모균주를 개발하였다. 먼저 융합주의 생리적인 특성을 검토한 바, 융합주는 양천주에 비하여 세 적이 크고, DNA 함량이 높았으며, 증식도는 친주와 유사한 경향이었다. 또 융합주를 최소배지에서 보존하는 것이 안정성을 높이는 방법이었고, 7일 간격으로 7회 계대배양하므로서 유전적으로 안정화시킨 융합주를 6개월 간 계속 사용한 결과 segregant가 전혀 나타나지 않았으므로 매우 안정하였다. 또한 융합주는 핵 및 포자를 형성함을 관찰 할 수 있었고, TTC 정색반응에서 적색 및 pink 색을 띄었으며, 탄소원의 자화성 및 발효능은 천주와 유사하였는데, KCI, NaCl, sodium propionate alc cycloheximide 등에 대한 내성도 양친주의 한쪽을 따랐다. 그리고, 융합주를 20% glucose와 sucrose에서 72시간 및 60시간 배양했을 때, FWKS 260의 경우 각각 9.6v/v% 및 9.8v/v%의 ethanol을 생성하였고, 감수성주와 혼합배양한 결과 FWKS260의 경우 48시간 이후에는 감수성주를 거의 발견할 수 없었으며, 전주 및 융합주의 dsRNA plasmid를 추출하여 전기 2.5kb의 L 및 M dsRNA plasmidsms는 서로 연관성이 있으며, killer toxin 분비 및 저항성을 나타내는 유전자를 지배하는 것은 M dsRNA plasmid임을 확인할 수 있었다. 수 있었다.

• 미생물학회지
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• 제40권2호
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• pp.100-103
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• 2004

Inonotus mikadoi IMSNU 32058의 최적 균사생장을 위한 배양학적 특성 및 세포효소 활성의 최적 조건을 조사하였다. 균사 생장을 위한 최적온도는 $27^{\circ}C$였고, 실험한 pH 범위중pH 4.5에서 최적균사 생장을 나타내었다. 사용된 복합배지 중 malt extract media (MEM)와Phellinus igniarius media (PIM)에서 가장 좋은 균사 생장을 나타내었다. 최소배지로써 Czapek-Dox 한천배지를 사용하여 탄소원으로 단당류, 이당류 및 다항류를 침가하였을 때 xylose, raffinose 및 carboxymethyl cellulose (CMC)에서 가장 좋은 생장을 나타내었다. 일반적으로 유기질소원이 무기질소원보다 생장을 더 촉진하였다. 유기질소원으로는 yeast extract, soytone, proteose peptone 및 bacto peptone을 사용하였을 때 균사생육이 우수하였다. 무기질소원으로는 ammonium sulfate를 사용했을 때 균사생육이 촉진되었으며, 가장 우수한 비타민원은 p-aminobenzoic acid (PABA)이었다. MEM 액체(pH 4.5) 배지를 이용하여 $27^{\circ}C$에서 5일간 배양하였을 때, I. mikadoi의 균사외 분비효소 및 균사내 효소의 활성도를 측정하였다. 균사내 분비 효소중 laccase 의 활성도가 다른 효소에 비해 상대적으로 높았다. 균사외 분비 효소도 균사내 분비효소와 마찬가지로 laccase의 활성도가 다른 효소에 비해 상대적으로 높았으며 protease, chitinase 그리고 lipase의 활성도는 낮거나 없었다.

• 미생물학회지
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• 제41권3호
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• pp.164-167
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• 2005

Lepista nuda DGUM 26501의 균사 생육을 위한 배양조건 및 세포외 분비 효소 활성을 조사하였다. 균사 생육을 위한 최적 온도는 $24^{\circ}C$였고, pH$7.0\~8.0$에서 최적 균사 생육을 나타내었다. 적정 균사생육을 위한 산소분압은 $10\%$이상이었다. 최소배지로 Czapek-Dox 한천배지에 탄소원을 변경하여 첨가시, maltose, sucrose, manitol, xylitol 등이 우수하였다. 유기산으로 gluconate가 가장 우수한 균사 생육을 보여주었다. 전반적으로 유기질소원이 무기질소원보다 균사 생육이 더 우수하였으며, 유기질소원으로 corn steep liquor(CSL), soytone, protease peptone을 사용하였을 때 균사생육이 우수하였다. 사용한 인산원 중 ammonium phosphate, 비타민원으로 pyridoxine, riboflavin, nicotinic acid 첨가시 우수한 균사 생육을 보여주었다. $24^{\circ}C$에서 10일간 배양된 L. nuda DGUM 26501의 균사외 분비효소 중 $\alpha-amylase$의 활성도가 다른 효소에 비해 상대적으로 높았으며, lipase의 활성도는 미미하게 나타났다.

• Molecules and Cells
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• 제20권1호
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• pp.74-82
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• 2005

Glutaredoxins (Grxs) are thioloxidoreductases which are required for maintaining thiol/disulfide equilibrium in living cells. The Grx3 gene, which encodes one of the three monothiol Grxs in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe, was characterized, and its transcriptional regulation studied. Genomic DNA encoding Grx3 was isolated by PCR, and a plasmid pTT3 carrying this DNA was produced. The DNA sequence has 1,267 bp, which would encode a monothiol Grx of 166 amino acids with a molecular mass of 18.3 kDa. The putative protein has 27% homology with Grx5, and contains many hydrophobic amino acid residues in its N-terminal region. S. pombe cells harboring pTT3 had increased Grx activity and enhanced survival on minimal medium plates containing aluminum (5 mM), BSO (0.05 mM), menadione (0.01 mM) or cadmium (0.2 mM). The 568 bp upstream region of Grx3 was fused into the promoterless b-galactosidase gene of the shuttle vector YEp367R to generate fusion plasmid pMJS10. Potassium chloride (KCl) and metals including aluminum and cadmium enhanced the synthesis of ${\beta}$-galactosidase from the fusion gene. The synthesis of ${\beta}$-galactosidase was also enhanced, in a Pap1-dependent manner, by fermentable carbon sources such as glucose (at low concentrations) and sucrose, but not by non-fermentable carbon sources such as ethanol and acetate. Grx3 mRNA increased in response to treatment with BSO. These observations indicate that S. pombe Grx3 is involved in the response to stress, and is regulated by stress.

• 생명과학회지
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• 제14권3호
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• pp.490-495
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• 2004

인산가용화능이 우수한 균주인 Burkholderia sp. DA23과 Klebsiella sp. DA7l-1 두 균주를 사용하여 농도별 아미노산 첨가에 따른 성장 양상과 유리인산 방출량을 조사한 결과, 두 균주의 생육과 인산가용화에 있어 아미노산이 도움이 되는 것으로 나타났다. DA23과 DA7l-1 모두 0.05%와 0.1%의 아미노산을 SM배지에 첨가하여 성장 양상을 확인한 결과 아미노산을 첨가한 배지의 균주가 아미노산을 처리하지 않은 배지의 균주에 비해 높은 세포 밀도 성장을 보여주었다. 인산가용화 균주의 아미노산 첨가의 경우 무처리보다 높은 pH 저하를 보였으며, 또한 아미노산 첨가가 아미노산 무처리구에 비해 2배이상 높은 인산가용화 효과를 보였다. DA7l-1의 아미노산 첨가의 경우는 DA23의 아미노산 첨가보다 아미노산 첨가에 의한 인산가용화 효과가 더 있는 것으로 나타났다. hydroxyapatite와 tri-calcium phosphate 의 인산염 차이에 따른 아미노산 처리 효과는 없었으며, 0.05%의 미량의 농도에서도 인산가용화로의 세포밀도 성장 및 가용화능에 효과를 나타내었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제44권4호
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• pp.251-256
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• 2001

난용성 인산염을 가용화 시킬 수 있는 경제적이고 효율적인 생물비료를 개발하기 위하여 난용성 인산염 가용화능이 우수한 미생물을 염류 집적 및 인산과다처리 재배지로부터 분리하였다. 이 분리균주의 생리 생화학적인 특성을 조사한 결과 Aeromonas hydrophila DA57로 동정되었다. Aeromonas hydrophila DA57은 hydroxyapatite, tri-calcium phosphate 와 같은 난용성 인산염을 모두 가용화한다. 난용성 인산염의 분해능이 최대가 되는 배양 온도와 배양초기 pH는 각각 $30^{\circ}C$와 5.0이었으며, 탄소원으로 glucose를 3% 첨가시 가용화능이 높았다. 배양 pH가 감소함에 따라 가용화된 유리인산의 함량이 증가하였고 gluconic acid의 생성이 확인되었다. 따라서 난용성 인산염의 분해가 우수한 새로운 Aeromonas hydrophila DA57를 분리하였고, 이는 하나의 생물비료원으로 활용이 가능하리라고 사료된다.