The analysis of condensation and cleavage reaction was carried out at $30^{\circ}C$ and pH 7.0 with purified isocitrate lyase from Saccharomycopsis lipolytica ATCC 44601. The Km values for condensation reaction of glyoxylate and succinate were 0.06 and 0.21 mM, respectively. In the cleavage reaction, glyoxylate was a linear competitive inhibitor with a Ki of 0.22 mM and succinate was a linear noncompetitive inhibitor with a Ki of 0.82 mM. Therefore, these kinetic analyses showed that the enzyme functioned in a ordered reaction with glyoxylate binding before succinate in the condensation reaction. 3-Bromopyruvate(BrP) was found to be irreversibly inactivation showing saturation kinetics, the inactivation half-time was 0.15 min and $K_{BrP}$ was 0.032 mM, and substrate or reactant protected against the inactivation.
Regulation mechanism of apoptosis has been known to be important for understanding the pathogenesis of a number of human diseases including cancers. The effects of $RRR-{\alpha}-tocopheryl$ succinate(vitamin E succinate, VES) on the cell viability, generation of ROS, expression of proteins involved in apoptosis, and growth of human chronic myelogenous leukemia K562 cells were analyzed in this study. VES treatment not only induced the generation of the ROS but also increased the levels of $NF-{\kappa}B$, COX-2, and $p21^{WAF1/CIP1}$ in K562 cells. It modulates the levels of pro-apoptotic proteins such as Bax provoking the apoptosis in K562 cells. The cleavage of PARP into 89 kDa was also increased upon VES treatment in a dosage-dependent manner. Induction of an apoptosis was evident by the increase of sub-Gl peak and cell shrinkage condensed chromatin in K562 cells treated with VES. It also resulted in an inhibition of tumor growth by 50% and prolonged survival of the Iymphoma-induced mice. This potentiation of VES obtained in vitro and in vivo may indicate the feasibility of more effective chemotherapy in chronic myelogenous leukemia.
The production of E. coli WC7 phytase from a recombinant E. coli strain was optimized using a statistical experimental design approach. Two-level complete factorial designs with seven variables were used for the media optimization. In the first optimization step, the influence of disodium succinate, yeast extract, $K_2HPO_4,\;NH_4H_2PO_4,\;MgSO_4$, NaCl, and trace elements on phytase production was evaluated. As a result, disodium succinate, yeast extract, $NH_4H_2PO_4$, NaCl, and the trace elements were found to have a positive influence on the phytase production, while $K_2HPO_4\;and\;MgSO_4$ had a negative influence. In the second step, the concentrations of disodium succinate and yeast extract were further optimized using central composite designs. The maximum phytase activity obtained was 234 U/ml using 15.9 g/1 disodium succinate, 20 g/1 yeast extract, 5 g/1 K_2HPO_4,\;10 g/1 NH_4H_2PO_4,\;1.5 g/1 MgSO_4$, 4 g/1 NaCl, and 1.5 m1/1 trace elements, which was about a 14-fold increase in comparison with that obtained using the basal medium.
An actinomycete, AS-568, which produced an inhibitory substance against succinate dehydrogenase of Ehrlich ascites carcinoma and Sarcoma-180 cells of mouse, was isolated. The inhibitory activity was determined by SDI (Succinate Dehydrogenase Inhibition) method. The active substance was specific against carcinoma cells compared to normal cells in mouse; liver, kidney and brain. The inhibitory ratio was about 50% after one hr treatment at 37$^{\circ}C$ in vitro. Maximal productivity of active substance was recognized by 5 days culture in glucose-asparagine. The active component in cultural liquid was stable in neutral pH range and heat treatment reasonably, add it was recovered from precipitate by ammonium sulfate or non-dialyrable fraction in cellophane membrane as showing the behavior of high molecular substance.
Biodegradable Poly(butylene succinate), PBS, was photooxidized by UV/ozone irradiation and the effect of UV energy on the surface properties of the UV-irradiated PBS film were investigated by the measurement of reflectance, surface roughness, contact angles, chemical composition, and zeta potential. With increasing UV energy, reflectance decreased in the visible and ultraviolet regions particularly at the wavelength of 380nm. The irradiation produced nano-scale surface roughness including the maximum peak-to-valley roughness increased from 106nm for the unirradiated sample to 221nm at the UV energy of $10.6J/cm^2$. The improved hydrophilicity was due to the higher $O_{1s}/C_{1s}$ resulting from the introduction of polar groups such as C-O and C=O bonds. The surface energy of the PBS increased from $42.1mJ/m^2$ for the unirradiated PBS to $56.8mJ/m^2$ at the irradiation of $21.2J/cm^2$. The zeta potentials of the UV-irradiated PBS also decreased proportionally with increasing UV energy. The cationic dyeability of the PBS increased accordingly resulting from the improved affinity of the irradiated PBS surfaces containing photochemically introduced anionic and dipolar dyeing sites.
The effects of x-irradiation on the utilization of glucose, succinate, citrate and $\\alpha$-ketoglutarate, on the response of the cell metabolism to $NaN_3$ and DNP, and on the uptake of lysine in the presence or absence of the metabolitesor the inhibitors were studied using HeLa cells and the results are summarized as follows: 1. 200r of x-irradiation had no immediate effect on the oxygen consumption of cells. 2. The oxygen consumption was greatly stimulated by succinate, $\\alpha$-ketoglutarate and citraed and in decreasing order and x-irradiation caused no remarkable change in this order. 3. The respiratory response of the cell to the metabolic inhibitors seems to be altered by x-irradiation. 4. The initial rate of the uptake of lysine was markedly retarded and the accumulation of lysine in the cell was decreased by irradiation. 5. Glucose increased the lysine uptake whereas succinate had no effect and citrate and $\\alpha$-ketoglutarate reduced the absorption. X-irradiation did not alter this tendency. 6. The inhibitory effects of $NaN_3$ and DNP on the lysine uptake were quite different from those seen in the oxygen consumption.
Kim, Mal-Nam;Lee, Sun-Hee;Kim, Wan-Gyu;Weon, Hang-Yeon
Korean Journal of Environmental Biology
/
v.25
no.3
/
pp.267-272
/
2007
Microorganisms capable of degrading poly(butylene succinate-co-butylene adipate) (PBSA) were isolated from 40 soil samples such as landfill site soil, cultivating soil and activated sludge soil from 20 different sites in Korea by using the enrichment culture and the clear zone test at $37^{\circ}C$. Based on the 16S rDNA sequences, the isolated bacterium was identified to be Streptomyces sp. PBSA-1. Morphological and cultural characteristics were employed for the identification of the isolated fungi and they were proved to be Aspergillus fumigatus PBSA-2 and Aspergillus fumigatus PBSA-3. The PBSA degradation activity of the isolated microorganisms was enhanced through the serial acclimation in PBSA plate medium. The PBSA degrading microorganisms appeared to be highly active for the PBSA degradation in that 83% of PBSA was degraded by Streptomyces sp. PBSA-l, and 65% and 75% of PBSA was mineralized by A. fumigatus PBSA2 and A. fumigatus PBSA-3 respectively during 40 days of the modified Sturm test.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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