Diarrhea is a major public health concern associated with pathogenic Escherichia coli infections. Food-borne pathogenic E. coli can lead to large diarrheal outbreaks and hence, there is a need to estimate the frequency of pathogenic E. coli load in the various types of meat available in markets. In the present study, we classified and characterized diarrheagenic E. coli isolates collected from 399 raw meat samples from retail sources in Korea. Shiga toxin-producing E. coli (STEC) were detected in 11 (9.7%) samples, including nine strains (8.0%) in beef and two strains (1.8%) in chicken. The frequency of the detected virulence markers were as follows: astA, 28.3%; escV,18.6%; eaeA,17.7%; ent, 7.0%; EHEC-hly, 4.4%; stx1, 3.5%; and stx2, 3.5%. We did not observe any typical EPEC, EIEC, or ETEC virulence determinants in any of the samples. The STEC serotype O26 was detected in one sample, but no other serogroups (O91, O103, O128, O157, O145, O111, and O121) were found. Further research is needed to better understand the virulence mechanism of STEC serotypes, their ecology, and prevalence in animals, food, and the environment. These results will help improve risk assessment and predict the sources of food poisoning outbreaks.
마비성 패류 독소(Paralytic shellfish poisoning, PSP)는 유해 조류에 의해 생성되며, 독소에 노출된 수산물을 섭취하였을 때 중독이 발생한다. 수산물 중 PSP를 검출하는 표준 시험법인 Mouse bioassay (MBA)는 낮은 검출한계와 동물 윤리 문제로 대체 시험법의 개발 필요성이 대두되고 있다. 이러한 대체 시험법 중, PSP가 신경 세포막의 Na+ 채널을 차단하는 기전을 이용한 마우스 뇌신경 모세포종 세포 기반 시험법(Neuro-2a assay)의 표준화를 위한 노력이 대두되고 있다. Neuro-2a assay의 원리는 Neuro-2a 세포주에 Na+/K+ ATPase 억제제인 Ouabain(O)과 Na+ 채널 활성화제인 Veratridine (V)을 처리하여 과도한 Na+ 유입으로 인한 세포사멸을 유도한 상태에서, Na+ 채널 억제제인 PSP를 처리하게 되면 Na+ 유입이 차단되어 세포가 생존하는 것을 측정하는 것이다. 본 연구에서는 PSP 검출을 위한 Neuro-2a assay를 국내 연구 환경에 맞게 다양한 매개변수를 개선하여 최적 시험법을 확립하고자 하였다. 고려한 매개변수들은 세포밀도, 배양 조건 및 PSP 처리 조건 등으로, 그 결과는 아래와 같다. 초기 세포밀도는 40,000 cells/well로, 세포 배양시간 및 처리시간은 각각 24시간으로 설정하였다. 또한 최적 O/V 농도는 500/50 μM로 설정하였다. 본 연구에서 PSP 중 Saxitoxin (STX)에 대해서 O/V 처리가 된 상태에서 S자형 용량-반응 그래프가 도출되는 8가지 농도(368~47,056 fg/μl)를 확인하였고, Neuro-2a assay의 실험실 간 변동성 비교를 통해, 실험의 적정성 확인을 위한 5가지 Quality Control Criteria와 실험 데이터의 신뢰가능 범위(Data Criteria) 6가지를 설정하였다. 확 립된 조건으로 Neuro-2a assay를 진행한 결과 반수영향농도(EC50) 값은 약 1,800~3,500 fg/μl로 나타났다. 실험실 간 변동성 비교 결과, Quality Control Criteria 값 및 Data criteria 값의 변동계수(coefficients of variation (CVs))가 1.98~29.15% 범위로 산출되어 실험의 적정성 및 재현성이 확인되었다. 본 연구를 통해 우리나라에서 활용할 수 있는 PSP 검출용 Neuro-2a assay 시험법의 최적 조건 및 5가지 Quality control 기준을 제시하였고, PSP 중 대표적인 독소인 STX을 대상으로 Neuro-2a assay를 실시한 결과 유의한 EC50 값을 산출할 수 있었으며, 향후 국내 수산물을 대상으로 MBA를 대체할 수 있는 PSP 검출법으로 활용될 것으로 기대된다.
$Na^+$ 전극도 개구리 방광막으로 만들어진 조직센서를 이용하여 복어독 (TTX), 조개독 (STX), 마비성조개독 (PSP) 등의 $Na^{+}$ 챈널 차단물질을 측정하였다 본 연구는 연속적으로 $Na^{+}$ 챈널 차단물질을 측정할 수 있는 조직 센서를 이용하여 한국산 한방약의 재료와 건조 및 생김 (Porphyra yezoensis)의 $Na^+$ 챈널 차단물질의 존재여부를 측정하였다. 본 센서는 한방약 재료 및 해조류 (김 등)와 같이 현재 일반적으로 사용되고 있는 마우스법으로 측정이 불가능한 fg 단위의 매우 적은 양의 $Na^{+}$ 챈널 차단물질까지 측정이 가능하였다. 본 바이오센서는 $Na^{+}$ 챈널 차단물질의 모니터링 및 해양환경감시에 응용 가능하리라 기대된다.
Lee, Ji Hyen;Kim, Hae Soon;Kim, Gu-Hwan;Yoo, Han-Wook
Journal of Genetic Medicine
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제14권1호
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pp.18-22
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2017
Pseudohypoparathyroidism type 1b (PHP 1b) is the result of end organ resistance to parathyroid hormone (PTH) in the absence of any features of Albright's hereditary osteodystrophy. There are two subtypes of PHP 1b with different genetic mechanisms. One subtype is related to a maternally derived 3kb microdeletion involving STX 16 gene, and is inherited in an autosomal dominant mode. Familial autosomal dominant inheritance of PHP 1b is relatively rare. The other subtype is associated with more extensive loss of imprinting at the GNAS locus that affects at least one additional differential methylated (hypermethylation at neuroendocrine secretory protein and hypomethylation at antisense transcript and or extra-large stimulatory G protein region) without microdeletion of the STX 16 or AS gene. It can be sporadic due to an imprinting defect in the GNAS gene. In our case, an 8-year-old girl was referred for suspected PHP with no feature of Albright hereditary osteodystrophy. Blood test results revealed hypocalcemia and hyperphosphatemia. Elevated PTH was also checked. There was no family history of endocrine or developmental problem. Her intelligence was normal, but she had inferior sociability at that time. Based on above, we diagnosed a rare case of paternal uniparental disomy of the long arm of chromosome 20 as the cause of PHP 1b by microsatellite marker test of chromosome 20.
The annually outbreak of paralytic shellfish poisoning (PSP) were caused by toxic dinolagellate A. tamarense and A. catenella in Korea. The purpose of this study were to investigate the distribution of PSP-causative organisms, A. tamarense and A. catenella and their species classification. Sediment (Saemangeum, the south open sea) and water samples (southeastern coast) were sampled to establish clonal isolates in 2003. After isolation and purification, strains were cultured under $17^{\circ}C$, f/2 media, 14:10=L:D cycle. PST analysis and species identification were performed by HPLC-FD method and specific DNA probe, respectively. Thirty-ons strains were isolated from the Saemangeum reclamation, southeastern coast including Jinhae Bay and south open sea. PSTs were detected in all cultured strains. In eight strains from south offshore, major toxin components are GTX5, C1/2 and minors are GTX3/4, dcGTX3, neoSTX. Sixteen strains from south coastal area have GTX1/4, neoSTX, C1/2 as major toxin components and GTX2/3 as minors. Seven strains from the Saemangeum reclamation have GTX5, C1/2 as major toxin components and GTX1/2/3/4 as minors. Thus, among eight south offshore isolates, four A. tamarense have more toxic (38.31~l19.16 fmol.$cell^{-1}$) than A. catenella (3.78~13.13 fmol.$cell^{-1}$). With the previous results of different toxin composition, toxin components and toxin contents, .it is toxin profile that could used to diagnosis of regional toxic population and geographical distribution of both A. tamarense and A. catenella and their toxigenic strains.
저자들은 stx2 유전자 양성인 E.coli O114 에 의한 용혈성 요독 증후군 2례를 경험하여 보고하는 바이다. 두 환자 모두 설사와 구토가 1-2일 지속된 후 급작스럽게 요량 감소와 빈혈, 혈소판감소증을 보였으며 10일 간의 복막 투석 치료를 받았으며 급성기에 혈압 증가와 함께 전신성 강직 간대성의 경련이 15-20분 간 있었다. 15여 일 경과 후 후유증 없이 회복되었다. 대변 배양액의 PCR에거 eae와 stx2 유전자를 확인하였고 colony hybridization을 시행하여 O114 혈청형으로 진단하였다. 본 증례는 E.coli O114에 의해 유발된 용혈성 요독 증후군의 첫 국내 보고이다.
자동차 운반용 선박(PCTC) 건조 시, 자동차를 고정시키기 위해 약 5 만 여개의 Lashing Socket(6,700 Units PCTC 기준)이 소요되는데, 이때 사용되는 Lashing Socket 은 용도 및 형태에 따라 Hole Cup, Flush Cloverleaf Type Pot, Raised Cloverleaf Type Pot, D-Ring, Crinkle Bar 등으로 구분된다. 이와 같이 다양한 종류 중에서 Hole cup 타입이 전체 적용되는 Lashing Socket 의 약 80%에 이른다. 기존에 사용되고 있는 자동용접장치는 Hole Cup 이외에는 적용이 불가능하고, 자석을 이용하여 Hole Cup 의 상부에 위치시키는 방식이었기 때문에 경량화 및 다양한 종류 및 크기의 Lashing Socket 에 적용이 가능한 자동용접장비의 개발이 요구되었다. 본 연구에서는 두께가 다른 $\phi$140 Hole Cup 및 Flush Cloverleaf Type Pot, Raised Cloverleaf Type Pot 에 적용 가능하며, 분리형 용접캐리지와 Centering Template, Magnet Jig 로 구성된 연속 및 단속 용접이 가능한 자동용접장치를 연구 개발하였다. 이를 통해 종래 Hole Cup 전용 자동용접 캐리지의 문제점을 개선하여, 작업자가 Centering Template 과 Magnetic Jig 을 이용하여 캐리지를 Hole Cup 의 중앙에 위치시키기 용이하게 하였다. 이 같은 분리형 장치 구성을 통해 Hole Cup 중앙에 캐리지 고정 작업과 용접 작업을 분리함으로써 자동용접이 진행되는 도중에 여분의 Jig를 이용하여 다른 Hole Cup 에 용접 준비를 하여 연속적인 작업이 가능하도록 하였다. 본 연구는 종래의 Hole Cup 전용 자동용접 캐리지의 문제점을 개선한 분리형 용접 캐리지를 개발함으로써 아래와 같은 결과를 얻었다. 1. 용접 캐리지를 포함하여 각 부분별 분리를 통해 작업자가 1 회 이동 시 필요로 하는 중량을 감소시켜 장비의 이동 및 제어가 쉽다. 2. Magnetic Jig 를 Centering Template 에 결합하고, Template 의 Jig 를 Lashing Socket 에 결합함으로써 손쉽게 Lashing Socket 의 중심부를 찾을 수 있으므로 용접 캐리지의 정확한 센터 고정이 가능하다. 3. 엔코더에 의한 1 회전을 검출함으로써, 작업 종료 후, 어떤 위치에서나 작업 재개가 가능하며 원점 복귀 작업이 불필요하다. 또한 엔코더에 의한 거리 설정으로 용접 속도에 상관없이 동일한 거리만큼 오버랩 용접이 가능하다. 4 디지털 방식으로 용접 조건의 입력이 가능하고, 용접 조건을 D/B 화 함으로써 Control Panel 상에서의 자동 제어가 가능하다. 이를 통해 연속 용접 또는 단속 용접이 가능하므로 다양한 형태의 Lashing Socket 을 자동 용접할 수 있는 효과가 있다. 이상의 결과를 통해 본 장비가 Fig.2 의 3 가지 종류의 Lashing Socket 용접에 효과적인 장비임을 확인할 수 있었다.
Diao, Chun-Yu;Guo, Hong-Bing;Ouyang, Yu-Rong;Zhang, Han-Cong;Liu, Li-Hong;Bu, Jie;Wang, Zhi-Hua;Xiao, Tao
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권4호
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pp.1817-1822
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2014
Objective: The aim of this study was to screen for possible biomarkers of metastatic osteosarcoma (OS) using a DNA microarray. Methods: We downloaded the gene expression profile GSE49003 from Gene Expression Omnibus database, which included 6 gene chips from metastatic and 6 from non-metastatic OS patients. The R package was used to screen and identify differentially expressed genes (DEGs) between metastatic and non-metastatic OS patients. Then we compared the expression of DEGs in the two groups and sub-grouped into up-regulated and down-regulated, followed by functional enrichment analysis using the DAVID system. Subsequently, we constructed an miRNA-DEG regulatory network with the help of WebGestalt software. Results: A total of 323 DEGs, including 134 up-regulated and 189 down-regulated, were screened out. The up-regulated DEGs were enriched in 14 subcategories and most significantly in cytoskeleton organization, while the down-regulated DEGs were prevalent in 13 subcategories, especially wound healing. In addition, we identified two important miRNAs (miR-202 and miR-9) pivotal for OS metastasis, and their relevant genes, CALD1 and STX1A. Conclusions: MiR-202 and miR-9 are potential key factors affecting the metastasis of OS and CALD1 and STX1A may be possible targets beneficial for the treatment of metastatic OS. However, further experimental studies are needed to confirm our results.
To understand critical aspects of paralytic shellfish poisoning (PSP) in a chief area of bivalve production in Korea, seasonal variation in PSP toxins in bivalves collected from Jinhae Bay, Korea in 2009 was surveyed by the pre-column high-performance liquid chromatography oxidation method. We also confirmed the profiles of major bivalves such as oysters Crassostrea gigas and mussels Mytilus galloprovincialis in Jinhae Bay. PSP toxins in the bivalves showed remarkable seasonal variation. PSP toxin levels were detected from April to May in 2009, and the highest total toxin levels at all stations were recorded in May. The major toxins in bivalves were gonyautoxin [GTX] 1&4 and C 1&2; in oysters GTX 2&3 were also detected as major components. GTX 1&4, which showed the highest PSP toxin levels at each station, accounted for the highest proportions of toxin components in mussels and oysters (64.5-71.3% and 41.4-42.4%, respectively). It was also confirmed that the highest toxicity (in ${\mu}g$ saxitoxin [STX] eq/g) was derived from GTX 1&4. The highest total toxicity (in ${\mu}g$ STX eq/g) was approximately 2-8-fold higher in mussels than in oysters collected from the same station. PSP toxin levels in bivalves differed significantly according to the sample collection station. However, the profiles of toxins in the bivalves did not show significant differences during the survey period according to sample collection station. This study shows that PSP toxin levels in some samples from Jinhae Bay were above the regulatory limit in Korea during a specific period in spring.
In this study, a total of 2,119 samples was taken from bovine feces and carcass from March 2002 to December 2003. And those were examined for the presence of enterohemorrhagic E coli O157:H7. The properties of the isolates were characterized for biochemical features, serotypes, virulence genes and antimicrobial susceptibility. Forty five strains($3.7\%$) of E coli O157:H7 were isolated from 1,208 fecal samples and were not detected in carcass using immunomagnetic separation technique and selective media. In multiplex PCR using stx1, stx2, eaeA and hlyA primers, the amplified bands at 180 bp, 255bp, 384bp and 534bp were observed, respectively. In antimicrobial susceptibility test, all isolates were susceptible to amoxicillin/clavulanic acid and cefazolin. The isolates were most resistant to sulfisoxazole($24.4\%$), followed by streptomycin($22.2\%$), tetracycline($20.0\%$). Eight strains($17.8\%$) of 45 isolates showed the multi-resistant patterns with over 3 drugs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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