Sprague-Dawley male rats (150 g) were chronically treated with 5 v/v % ethanol admixed with nutritionally complete liquid diet and fed ad libitum for 3 weeks. Controls were pair fed with the isocaloric sucrose liquid diet. One half of each group was exposed to cold stress at $4^{\circ}C$ either for 24 h (for determination of mRNA by in situ hybridization) or for 48 h (for determination of enzyme activity). Chronic ethanol treatment (ethanol) did not affect tyrosine hydroxylase (TH) mRNA level in locus coeruleus (LC) of brain and adrenal medulla (AM) compared to controls. Cold stress showed strong increase of TH mRNA level in LC and AM compared to controls. Pretreated ethanol reduced the increased TH mRNA level by cold stress in LC and AM. Ethanol did not affect TH activity in LC and adrenal glands (adrenals). Cold stress increased TH activity in LC but not in adrenals. Pretreated ethanol did not reduce the increased TH activity by cold stress in LC but this result was not shown in adrenals. It is suggested that ethanol does not affect the message level and enzyme protein level for TH in LC and AM in normal rat. It is also hypothesized that pretreated ethanol reduces the magnitude of acute cold stress response, that is induction of TH mRNA in LC and AM, and does not reduce the increased TH enzyme protein that is also acute cold stress response in LC.
The 94 KDa glucose-resulsted Protein (SH 94), one of stress Proteins, is a Ca2+-binding protein in the endoplasmic reticulum (ER). In this study, the possible effect of Ca2+ on the native conformation of grp 94 was examined. When the purified grp 94 was analyzed by Sel filtration in the presence of either EGTA or CaCl2, it was eluted with apparent molecular weight (MW) of 100 KDa in both cases. When similarly analyzed with microtome or cell Ivsate, however, srp 94 was eluted with apparent IW of 200 KDa in the presence of E6TA, while with apparent MW of 100 KDa in the presence of CaCl2, indicating possible association of grp 94 with one or more other proteins in the absence of CaCl2. Consequently, immunoprecipitation with anti-grp 94 was carried out to determine which proteins specifically interact with grp 94. It is sho%un that srp 94 may interact, in a Ca2+_dependent manner. with other proteins including BiP (grp 78) which is also a stress protein in the ER.
Dehydrins (LEA Dll proteins) are one of the typical families of plant proteins that accumulate in response to dehydration, cold stress, abscisic acid, or during seed maturation. A 1.3-kb cDNA was cloned from a cDNA expression library of 5-day-old germinating maize scutellums under drought stress. The deduced protein sequence indicated a dehydrin gene encoding SK$_3$ LEA protein typically expressed during cold acclimation, but not by drought stress in barley and wheat. Thus, it was named maize DEHYDRIN2 (ZmDhn2). It accumulates rapidly and highly in drought-stressed scutellum and leaf tissues at any stage, but not under cold stress. ZmDhn2 gene was transformed into Arabidopsis thaliana for functional analysis under drought condition. From electrolyte leakage test, no significant difference showed between wild type and transformants under normal growth condition, but the leakage level of electrolyte in wild type plants was about 3 times as high as that in the transformed plants under drought stress. It suggests that ZmDHN2 playa role in increasing drought tolerance.
Background: Dietary protein requirements are dependent on a variety of factors and water temperature is one of the most important abiotic factors affecting protein requirement of fish. This study was, therefore, conducted to investigate effects of water temperature on dietary protein requirement of fry Heteropneustes fossilis which has high demand in most of the Asian markets. Methods: Quadruplicate groups of 30 fish per treatment (2.97 ± 0.65 cm; 5.11 ± 0.34 g) were fed seven isoenergetic diets (17.9 kJ g-1 gross energy; 14.99 kJ g-1 digestible energy) containing dietary protein levels ranging from 28 to 52% at two water temperatures (18 and 26 ℃). Experimental diets were fed to apparent satiation as semi-moist cakes thrice daily at 17:00, 12:00, and 17:30 h for 12 weeks. For precise information, various growth parameters, protein deposition, hematological parameters, metabolic enzymes, and stress response were analyzed, and effects of water temperature on dietary protein requirement was recommended on the basis of response from above parameters. Results: Groups held at 26 ℃ attained best growth, feed conversion, and protein deposition at 44% dietary protein indicating that temperature affected dietary protein requirement for optimum growth of H. fossilis fry and protein requirement seems to be satisfied with 44% dietary protein. Interestingly, interactive effects of both dietary protein levels and temperature were not found (P > 0.05). Fish reared at 18 ℃ had comparatively higher values for aspartate and alanine transferases than those reared at 26 ℃ water temperature which exhibited normal physiological value for these enzymes indicating that body metabolism was normal at this temperature. Hematological parameters also followed same pattern. Furthermore, fish reared at 26 ℃ water temperature exhibited more resistant to thermal stress (P < 0.05). The 95% maximum plateau of protein deposition data using second-degree polynomial regression analyses exhibited dietary protein requirement of fry H. fossilis between 40.8 and 41.8% of diet at 26 ℃ water temperature. The recommended range of dietary protein level and protein/digestible energy ratio for fry H. fossilis is 40.8-41.8% and 27.21-27.88 mg protein kJ-1 digestible energy, respectively. Conclusions: Information developed is of high significance for optimizing growth potential by making better utilization of nutrient at 26 ℃ and, to develop effective management strategies for mass culture of this highly preferred fish species.
Kim, Ji-Eun;Kim, Tae-Gun;Lee, Young-Hee;Yi, Ho-Keun
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.50
no.5
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pp.291-302
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2020
Purpose: The objective of this study was to investigate whether phelligridin D could reduce glucose-induced oxidative stress, attenuate the resulting inflammatory response, and restore the function of human periodontal ligament cells (HPDLCs). Methods: Primary HPDLCs were isolated from healthy human teeth and cultured. To investigate the effect of phelligridin D on glucose-induced oxidative stress, HPDLCs were treated with phelligridin D, various concentrations of glucose, and glucose oxidase. Glucose-induced oxidative stress, inflammatory molecules, osteoblast differentiation, and mineralization of the HPDLCs were measured by hydrogen peroxide (H2O2) generation, cellular viability, alkaline phosphatase (ALP) activity, alizarin red staining, and western blot analyses. Results: Glucose-induced oxidative stress led to increased production of H2O2, with negative impacts on cellular viability, ALP activity, and calcium deposition in HPDLCs. Furthermore, HPDLCs under glucose-induced oxidative stress showed induction of inflammatory molecules (intercellular adhesion molecule-1, vascular cell adhesion protein-1, tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1-beta) and disturbances of osteogenic differentiation (bone morphogenetic protein-2, and -7, runt-related transcription factor-2), cementogenesis (cementum protein-1), and autophagy-related molecules (autophagy related 5, light chain 3 I/II, beclin-1). Phelligridin D restored all these molecules and maintained the function of HPDLCs even under glucose-induced oxidative stress. Conclusions: This study suggests that phelligridin D reduces the inflammation that results from glucose-induced oxidative stress and restores the function of HPDLCs (e.g., osteoblast differentiation) by upregulating autophagy.
This study was performed to investigate the stress level, dietary attitudes and nutrient intakes of Food and Nutrition major female students at a university located in Changwon. A total of 122 female students taking the course 'Meal Management' during 2001-2004 participated in this study. The general characteristics, stress level and dietary attitudes of the subjects were surveyed using a self-administered questionnaire. The nutrient intake data collected from 3-day food-record method were analyzed by the Computer Aided Nutritional Analysis Program. The symptoms by stress showed that 'eye strain', 'physically exhausted or get tired' and 'pains on neck or shoulders' were high in 59.4-81.8%. The mean scores of stress in 2001-2004 were 8.5-12.0 out of 30 points and the subjects in 2002 and 2004 scored significantly higher on stress level than the subjects in 2001 did (p < 0.00. The mean scores of dietary attitudes were 58.7-66.6 out of 100 points, most of the subjects are belonged to the 'fair' group in terms of dietary habits level. The stress level had a negative correlation with dietary habits (p < 0.001). About 1/3 of the subjects, the intake of calcium, vitamin $B_2$, vitamin A and iron were less than 75% of Korean RDA, whereas more than half of the subject, protein, vitamin C and phosphorus intake were more than 125% of RDA, and intake ratio of Ca and P showed an unbalance of 1 : 2. The animal protein intake was higher than the plant protein, whereas the animal vitamin A and iron intake were lower than vegetable food source. In 2001-2004, the index of nutritional quality (INQ) of vitamin $B_2$ and niacin was 0.56-0.98, and in 2003, the INQs of vitamin $B_2$ was 0.56, and that of niacin was 0.67, which was extremely low when compared to that of the other nutrients. Therefore, nutritional education is necessary if female university students are to practice optimal nutrition, including well-balanced diets of high nutritional quality.
Kwon, Min-Young;Hwang, Narae;Lee, Seon-Jin;Chung, Su Wol
BMB Reports
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v.52
no.11
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pp.665-670
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2019
Nucleotide-binding oligomerization domain protein 2 (NOD2), an intracellular pattern recognition receptor, plays important roles in inflammation and cell death. Previously, we have shown that NOD2 is expressed in vascular smooth muscle cells (VSMCs) and that NOD2 deficiency promotes VSMC proliferation, migration, and neointimal formation after vascular injury. However, its role in endoplasmic reticulum (ER) stress-induced cell death in VSMCs remains unclear. Thus, the objective of this study was to evaluate ER stress-induced viability of mouse primary VSMCs. NOD2 deficiency increased ER stress-induced cell death and expression levels of apoptosis mediators (cleaved caspase-3, Bax, and Bak) in VSMCs in the presence of tunicamycin (TM), an ER stress inducer. In contrast, ER stress-induced cell death and expression levels of apoptosis mediators (cleaved caspase-3, Bax, and Bak) were decreased in NOD2-overexpressed VSMCs. We found that the $IRE-1{\alpha}-XBP1$ pathway, one of unfolded protein response branches, was decreased in NOD2-deficient VSMCs and reversed in NOD2-overexpressed VSMCs in the presence of TM. Furthermore, NOD2 deficiency reduced the expression of XBP1 target genes such as GRP78, PDI-1, and Herpud1, thus improving cell survival. Taken together, these data suggest that the induction of ER stress through NOD2 expression can protect against TM-induced cell death in VSMCs. These results may contribute to a new paradigm in vascular homeostasis.
Stress coping mechanisms are critical to minimize or overcome damage caused by ever changing environmental conditions. They are designed to promote cell survival. The unfolded protein response (UPR) pathway is mobilized in response to the accumulation of unfolded proteins, ultimately in order to regain endoplasmic reticulum (ER) homeostasis. Various elements of coping responses to ER stress including Perk, Ask1, Bip, Chop, Gadd34, Ire1, Atf4, Atf6, and Xbp1 have been identified and were found to be inducible in oocytes and preimplantation embryos, suggesting that, as a normal part of the cellular adaptive mechanism, these coping responses, including the UPR, play a pivotal role in the development of preimplantation embryos. As such, the UPR-associated molecules and pathways may become useful markers for the potential diagnosis of stress conditions for preimplantation embryos. After implantation, ER stress-induced coping responses become physiologically important for a normal decidual response, placentation, and early organogenesis. Attenuation of ER stress coping responses by tauroursodeoxycholate and salubrinal was effective for prevention of cell death of cultured embryos. Further elucidation of new and relevant ER stress coping responses in periimplantation embryos might contribute to a comprehensive understanding of the regulation of normal development of embryonic development and potentiation of embryonic development in vitro.
Cells show various stress signs when they are challenged with severe physiological problems. Majority of such cellular stresses are conveyed to endoplasmic reticulum (ER) and unfolded protein response (UPR) serves as typical defense mechanism against ER stress. This study investigated an interaction between ER stress agents using macropage cell line Raw 264.7. When activated by lipopolysaccharide (LPS), the cell lines showed typical indicators of ER stress. Along with molecular chaperones, the activation process leads to the production of additional inflammatory mediators. Following activation, the macrophage cell line was further treated with TUN and characterized in terms of chaperone expression and cytokine secretion. When treated with TUN, the activated macrophage cell leads to increased secretion of IL-6 although expression of ER stress markers, GRP94 and GRP78 increased. The secretion of cytokines continued until the addition of BFA which inhibits protein targeting from ER to Golgi. However, secretion of cytokines was ceased upon dual treatments with BFA and TG. This result strongly implies that cells may differently deal with various polypeptides depending on the urgency in cellular function under ER stress. Considering IL-6 is one of the most important signal molecules in macrophage, the molecule might be able to circumvent ER stress and UPR to reach its targeting site.
Kim, Yu-Jin;Lee, Jung-Hye;Jung, Dae-Young;Sathiyaraj, Gayathri;Shim, Ju-Sun;In, Jun-Gyo;Yang, Deok-Chun
The Plant Pathology Journal
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v.25
no.4
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pp.400-407
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2009
A pathogenesis-related protein (PgPR5) gene that isolated from the leaf of Panax ginseng was characterized. The ORF is 756 bp with a deduced amino acid sequence of 251 residues. The calculated molecular mass of the matured protein is approximately 27.5 kDa with a predicated isoelectric point of 7.80. A GenBank BlastX search revealed that the deduced amino acid of PgPR5 shares highest sequence similarity to PR5 of Actinidia deliciosa (80% identity, 87% similarity). PgPR5 has a C-terminal and N-terminal signal peptide, suggesting that it is a vacuolar secreted protein. The expression of PgPR5 under various environmental stresses was analyzed at different time points using real-time PCR. Our results reveal that PgPR5 is induced by salt stress, chilling stress, heavy metal, UV, and pathogen infection. These results suggest that the PgPR5 could play a role in the molecular defence response of ginseng to abiotic and pathogen attack. This is the first report of the isolation of PR5 gene from the P. ginseng.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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