Cho, Jae Min;Gi Bum Nam;Soon Bok Hong;Myung Hwan Cho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.5
no.6
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pp.359-363
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1995
The antigenic variation of B. thuringiensis subsp. satto have been investigated for 120 hours during sporulation and crystallization by using SDS-PAGE and Western blot. Most antigens of a vegetative cell were found to disappear as it was in sporulation and crystallization, but protein antigens of 46, 29, 27, and 21 kDa continued to be expressed. The new protein bands of 293, 138, 119, 75, and 68 kDa appeared on days 2 through 5 in modified GYS medium. They were thought to be involved in sporulation and crystallization. The protein of 138 kDa was found to be a major protein of both crystal and spore. The expression patterns were immunologically analyzed by Western blot. The polyclonal antisera against the intact crystal showed strong immunoreactivity to proteins with molecular masses of 293, 138, 68, and 46 kDa. The polyclonal antisera against the spore recognized proteins of 293, 138, 68, and 46 kDa. Both crystals and spores appeared to express the common protein antigens.
During the sporulation stage in Saccharomyces cerevisiae J170, the incorporation of $D^{14}$ C-glucose into starved cells of sporulation stage as well as the vegetative one is appeared higher at pH 6.0. Glucose transport system, in both the vegetative and sporulation stage, is associated with "energy dependent" as the result of repression by such a respiratory inhibitor as 2, 4-dinitrophenol. The Km value of glucose uptake in vegetative stage and sporulation stage was 2.1 mM and 2.5 mM respectively, indicating that the glucose is considerably reuqired for vegetative growth. Competition and countertranspoer of glucose by frutose and galactose are more distinct in vegetative stage, comparing with sporulation stage. The main sugar components of yeast cells consists of ribose, mannose, and ${\alpha}, \;{\beta}-glucose$. Amounts of mannose is lower in the aporulation stage than that in the vegetative stage.
The effects of carbon and nitrogen sources on the mycelial growth and sporulation of microconidia and chlamydospores of five isolates of Cylindrocarpon destructans (Zinssm.) Scholten causing root rot of Panax ginseng were studied. For the carbon sources, fructose, glucose, maltose, and sucrose in Czapek-Dox broth showed good mycelial growth of 178∼201 mg in dry weight compared with 64 mg of the control. The best carbon sources tested for conidial formation were sucrose and maltose with 2.75 and 3.03 log conidia/ml, respectively. For the nitrogen sources, aspartic acid, NaNO3, KNO3, arginine, threonine, and leucine increased mycelial growth of the fungi to 208∼231 mg in dry weight without significant difference (p=0.05) among them. Meanwhile the growth with cystine was poor (26.3 mg dry weight), and no conidium and chlamydospore were formed. Maximum microconidial formation was observed in the media with NaNO3 and KNO3 as 3.37 and 3.35 log conidia/ml, and for the chlamydospore formation the (NH4)2SO4-containing medium and the nitrogen-absent medium were the best as 3.40 and 3.57 log chlamydospores/ml, respectively. No conidium was found in the medium without nitrogen sources, in which chlamydospore formation increased 6 times more than in the nitrogen-amended medium. However, deletion of carbon source in the medium did not affect on the formation of conidia and chlamydospores of C. destructans.
This study was undertaken to investigate the differentiation, from spore germination to hyphae growth and phialide formation, of Aspergillus niger through the method of synchronous and submerged culture. Through continuous experiments by shake culture with potassium acetate medium, we observed the formation of spores at appropriate concentration and pH. Potassium acetate medium was set pH 5.5, 6.0, 6.5 and 7.0 on each scale, and control, 20 mM, and 40 mM, 80 mM and 160 mM concentrations on the other scale. Aspergillus niger was cultured in the defined media at $28^{\circ}C$, and mycelial dry weight, changes of pH and the onset of sporulation were checked. The mycelial dry weight, increased in potassium acetate medium, and pH increased during mycelial growth and gradually decreased after the spore formation. When pH increased excessively in Potassium acetate medium with pH 7.0, the mycelia could not adapt and mycelial dry weight decreased gradually. At pH 5.5, the onset of sporulation was done within one day at 20 mM it took, at 80 mM three days and at 160 mM concentration. in two days, at 40 mM one to four days were taken, 80 mM concentration respectively. At pH 6.5, the onset of sporulation was done in three days and four days at 80 mM concentrations respectively. Spore formation was not shown at pH 7.0. In controlled medium with all levels of pH, spore formation was not shown.
Culture conditions affecting mycelial growth and sporulation of P. theae, SP2, SP3 and P. longiseta which causing leaf blight on oriental persimmon leaf blight have been investigated. The optimum temperature for the mycelial growth and sporulation on potato dextrose agar was $25{\sim}30^{\circ}C$ in all the fungi, but was inhibited and finally arrested at 10 and $30^{\circ}C$. The optimum pH for mycelial growth and sporulation were ranged at pH 4.5~5.0 and 5.0~6.0 in all the fungi. Lenonian agar, potato sucrose agar and oatmeal medium were good culture media for the mycelial growth and sporulation of all the fungi. The effective sources of nitrogen and carbon for the mycelial growth were tryptone, glycine, starch, dextrose, galactose and lactose. Glutamic acid, peptone and tryptone were good nitrogen sources for sporulation of the fungi. Sucrose, starch and galactose were also good carbon sources for sporulation. Generally, vitamins had no effect on mycelial growth and sporulation. The pH of the potato dextrose broth inoculated with SP2, SP3 and P. theae and P. longiseta was changed from 7.0 to 4.5~4.7 and 5.0~5.4 after incubating for 10 days, respectively. But, the initial pH of the medium adjusted to 5.0 was lowered to 4.5~4.7 after incubating for 10 days.
The Aspergilli can be isolated from many of damaged domestic fowl's lung which were collected at fowl slaughter house from July to August 1973, during two months at Dapsimri, Dongdaemoon-ku, Seoul city. The survey of incubation condition for carbon source and nitrogen source were summerized as follows: 1. One of the Aspergillius fumigatus group were isolated from damaged domestic fowl's lung. 2. In the preparation of isolation media, adding the 4 gs of silkworm pupa and Meju to Czapek's agar medium is more preferable than Austick's media (2% malt extract agar) 3. In survey of incubation condition, the growth rate and sporulation shown that higher differences according to varieties and amounts of C-source. And in the case of 20% C-source concentration shown that low growth rate than lower concentration of C-source. 4. In N-source, the growth rate indicated that some difference according to varieties of N-source, difference of growth rate demonstrated almost not shown at various amounts differences of mycelium and sporulation was only detected reversely.
In order to examine the pathogenicity of Alternaria dauci, the causal agent of carrot leaf blight, it is necessary to standardize sporulation conditions to ensure the optimal quantity and quality of spore inoculum. Therefore, in this study, the effects of the growth medium, aeration treatment, and UV treatment with 12-hr photoperiod on the sporulation of A. dauci KACC42997 were investigated. A. dauci KACC42997 was pre-cultured for 7 days in a potato dextrose agar medium at 25℃ in the dark condition. When the pre-culture, after removing aerial mycelia, was re-incubated for 5 days, with simultaneous aeration treatment and 12-hr cycle UV treatment at 20℃, the largest number of spores was produced. One hundred seventy isolates of A. dauci were isolated from major carrot growing regions such as Pyeongchang, Gumi and Jeju and tested for sporulation under the conditions established in this study. Except for 20 strains, all strains produced spores. Statistically significant differences in the extent of sporulation were found among local populations of A. dauci isolates, but no difference was observed in their pathogenicity on carrots.
During the sporulation stage in Saccharomyces cerevisiae J170, the incorporation of D$^{14}$ C-glucose into starved cells of sporulation stage as well as the vegetative one is appeared higher at pH 6.0. Glucose transport system, in both the vegetative and sporulation stage, is associated with "energy dependent" as the result of repression by such a respiratory inhibitor as 2,4-dinitrophenol. The Km value of glucose uptake in vegetative stage and sporulation stage was 2.1 mM and 2.5 mM respectively, indicating that the glucose is considerably reuqired for vegetative growth. Competition and countertranspoer of glucose by frutose and galactose are more distinct in vegetative stage, comparing with sporulation stage. The main sugar components of yeast cells consists of ribose, mannose, and .apha., .betha.-glucose. Amounts of mannose is lower in the aporulation stage than that in the vegetative stage.ive stage.
As a basic study for the application of the spore-tearing lactic acid bacteria to foods, the effects of the sporulating conditions on the growth and sporogenesis were studied were observed. The results obtained are as follow. 1. All carbohydrates added to sporulation media except dextrin decreased the sporulation rate and the thermal resistance of spores. Dextrin stimulated the growth, however, there in no effect on the thermal resistance. 2. As nitrogen source, the protein hydrolysates such as peptone, casamino acid were effective to obtain were spores of the increased thermal resistance. 3. Ca$\^$++/, Mn$\^$++/ of the metal ions added to casamino acid containing medium validly increased the total growth, sporulation rate and thermal resistance. Its optimum concentration was 40 ppm each. 4. Biotin of vitamines had an effect on the total growth, sporulation and thermal resistance of spores. Its optimum concentration was 30${\gamma}$/ml. 5. The resistant spores required the adequate maturation period, more than 36 hours, sufficient aeration. and optimum temperature, 37∼45$^{\circ}C$.
High sporulation method and cultural characteristics of Cercospora capsici causing Cercospora leaf spot of pepper were examined. Optimum temperature for mycelial growth of Cercospora capsici was $25^{\circ}C$. The fungus did not grow below $5^{\circ}C$ and over $35^{\circ}C$. Optimum pH for mycelial growth was pH 4.0~pH 8.0. Mycelial growth was not influenced by light. C. capsici sporulated well on pepper leaf agar (5g/l). A standard method of sporulation established was as follows. The mycelial plugs were ground with some water in motar with pestle. The mycelial suspension was smeared on the surface of medium and incubated for 2~3 days at $20^{\circ}C$. The culture surface was lightly scraped with a brush after adding 1 ml of sterile water to stimulate sporulation and further incubated for 2~3 days.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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