Langmuir probe was housed in the sounding rocket to test the probe's performance and to find the environmental parameters at the F layer of the ionosphere. The gold plated cylindrical probe had a length of 14㎝ and a diameter of 0.096 ㎝. The applied voltage to the probe consisted of 0.9 sec fixed positive bias followed by 0.1 sec of down/up sweep. This ensured that the probe swept through the probe's current-voltage characteristic at least once during 1 second quiescent periods enabling the electron temperature to be measured during the undisturbed times of the flight. The experimental results showed good agreement of the temperature distribution with IRI model at the lower F layer. In the upper layer, the experimental temperatures were 100-200K lower than the IRI model's because of the different geomagnetic conditions: averaged conditions were used in IRI model and specific conditions were reflected in the experiment.
식중독은 세균에 의한 발병이 대부분이다. 따라서 식품에서 식중독 원인균을 신속하게 탐색하게 식중독으로부터의 되면 피해를 줄일 수 있을 것이다. 고전적인 식중독 원인균 탐색은 증균, 선택적 배지를 이용한 isolation, 생화학적 특징을 활용하는 분석이 있으나 많은 시간이 소요되는 단점을 갖고 있었다. 본 연구는 16S rRNA gene(16S rDNA)로부터 얻은 DNA 염기 서열을 이용 식중독 원인균의 특이적 oligonucleotide probe을 제작 reverse dot blot hybridization과 PCR 방법을 이용하여 고전적인 방법보다 빠른 시간 내에 식품에서 원인균을 탐색 할 수 있었다. 우유를 인공적으로 본 연구에서 사용한 균주로 오염시킨 후 DNA를 추출하여 PCR 증폭산물과 oligonucleotide probe를 hybridization 시킨 결과 oligonucleotide probe를 hybridization 시킨 결과 oligonucleotide probe가 위치한 곳에서 발색 반응이 나타났다. 본 연구에서 본 연구를 통해 DNA microchip으로 활용 짧은 시간 내에 많은 종류의 식중독 원인균을 탐색 할 수 있는 가능성을 확인하였다.
The purpose of this study was to isolate a specific DNA probe for the strain ATTC 25611 of the species Prevotella intermedia by using a new rapid screening mothod. The whole-genomic DNA of P. intermedia ATCC 25611 was isolated and purified. The HindIII-digested genomic DNAs from the strain were cloned by the random cloning method. To screen the strain-specific DNA probe, inverted dot blot hybridization tests were performed. In this assay, 20 ng of recombinant plasmids containing the HindIII-digested genomic DNA fragment were boiled and blotted onto a nylon membrane, and hybridized with digoxigenin-dUTP labeled genomic DNAs in a concentration of 100 ng/ml. Southern blot analysis was performed in order to confirm the results of the inverted dot blot hybridization tests. The data showed that a Pi34 probe (2.1 kbp; 1 out of 32 probes) was specific for P. intermedia strain ATCC 25611 and could be useful for the detection and identification of the strain, particularly in epidemiological studies of periodontal disease.
Kim Hwa-Sook;Song Soo Keun;Yoo So Young;Jin Dong Chun;Shin Hwan Seon;Lim Chae Kwang;Kim Myong Soo;Kim Jin-Soo;Choe Son-Jin;Kook Joong-Ki
Journal of Microbiology
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제43권4호
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pp.331-336
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2005
The objective of this study was to assess the strain-specificity of a DNA probe, Fu12, for Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum ATCC $25586^T$ (F. nucleatum ATCC $25586^T$), and to develop sets of strain-specific polymerase chain reaction (PCR) primers. Strain-specificity was tested against 16 strains of F. nucleatum and 3 strains of distinct Fusobacterium species. Southern blot hybridization revealed that the Fu12 reacted exclusively with the HindIII-digested genomic DNA of F. nucleatum ATCC $25586^T$. The results of PCR revealed that three pairs of PCR primers, based on the nucleotide sequence of Fu12, generated the strain-specific amplicons from F. nucleatum ATCC $25586^T$. These results suggest that the DNA probe Fu12 and the three pairs of PCR primers could be useful in the identification of F. nucleatum ATCC $25586^T$, especially with regard to the determination of the authenticity of the strain.
Currently, focused ion beams (FIB) are widely used for specimen preparation in atom probe tomography (APT), which is a three-dimensional and atomic-scale compositional analysis tool. Specimen preparation, in which a specific region of interest is identified and a sharp needle shape created, is the first step towards successful APT analysis. The FIB technique is a powerful tool for site-specific specimen preparation because it provides a lift-out technique and a controllable manipulation function. In this paper, we demonstrate a general procedure containing the crucial points of FIB-based specimen preparation. We introduce aluminum holders with moveable pin and an axial rotation manipulator for specimen handling, which are useful for flipping and rotating the specimen to present the backside and the perpendicular direction. We also describe specimen preparation methods for nanowires and nanopowders, using a pick-up method and an embedding method by epoxy resin, respectively.
A phosphate-specific and fluorescent probe was prepared for label-free phosphatase assays based on fluorescence polarization. By using the probe, dephosphorylation reactions of DNA and protein substrates by calf intestinal alkaline phosphatase (CIP) could effectively be monitored in real-time. Since this assay method does not require additional materials such as labeled substrates and phosphospecific antibodies to obtain fluorescence polarization signals, it is simple, cost-effective, and expected to be useful not only for measuring activity of phosphatases but also for high-throughput screening of phosphatase inhibitors.
Dong Jae Lee;Jin A Lee;Dae-Han Chae;Hwi-Seo Jang;Young-Joon Choi;Dalsoo Kim
Mycobiology
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제50권5호
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pp.382-388
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2022
White mold (or Sclerotinia stem rot), caused by Sclerotinia species, is a major air, soil, or seed-transmitted disease affecting numerous crops and wild plants. Microscopic or culture-based methods currently available for their detection and identification are time-consuming, laborious, and often erroneous. Therefore, we developed a multiplex quantitative PCR (qPCR) assay for the discrimination, detection, and quantification of DNA collected from each of the three economically relevant Sclerotinia species, namely, S. sclerotiorum, S. minor, and S. nivalis. TaqMan primer/probe combinations specific for each Sclerotinia species were designed based on the gene sequences encoding aspartyl protease. High specificity and sensitivity of each probe were confirmed for sclerotium and soil samples, as well as pure cultures, using simplex and multiplex qPCRs. This multiplex assay could be helpful in detecting and quantifying specific species of Sclerotinia, and therefore, may be valuable for disease diagnosis, forecasting, and management.
Porphyromonas endodontalis, an anaerobic Gram negative cocobacillus which was known to be associated with the infected root canals and periapical lesions, is very difficult to culture and to detect by the traditional method in that it requires much time to induce the specific black pigmentation, and it is very sensitive to oxygen and the antibiotics added in the culture medium. In this study, the nucleotide sequences of the 'probe h' (0.73kb), one of the specific DNA probes top. endodontalis (ATCC 35406) which had been developed by our department, was determined and then a pair of primers for PCR amplification was fabricated to identify P. endodontalis. The plasmids containing 'probe h' were purified by $Wizard^{TM}$ Midipreps DNA Purification System (Promega Corp.), and the nucleotide sequences of the 'probe h' were determined by the dideoxy chain termination method using TaqTrack Sequencing System (Promega Corp.) and detected by fluorescent labelling method. The sense/antisense PCR primers were designed with computer software (Lasergene, DNASTAR Ind. PCR was done with a programmable GeneAmp PCR System 2400 (Perkin Elmer-Cetus Co.). Each sample containing the whole genomic DNA of P. endodontalis and other black-pigmented Bacteroides was itailly denatured at $94^{\circ}C$ for 5 min and then subjected to 30 cycles, each of them consisting of 60s at $94^{\circ}C$, 60s at $60^{\circ}C$, and 90s. at $72^{\circ}C$. The amplified DNA was resolved electrophoretically in a 1.0 % agarose gel in 1X TAE buffer, stained with EtBr, and photographed on a UV transilluminator. The results were as follows : 1. The nucleotide sequences of 'probe h' (743 base pairs) were obtained by dideoxy chain termination method, and from that results the specific primers to P. endodontalis (ATCC 35406), 'Primer H1/ Primer H2', were designed. 2. It has been found that 'Primer H1/H2' could detect P. endodontalis (ATCC 35406) using PCR. 3. The PCR system with this primers may be a powerful technique to amplify the specific sequences of 'probe h' of P. endodontalis (ATCC 35406) that produce distinct identification of it from other black-pigmented Bacteroides, and this could help us to determine the nature of periapical disease.
Kim, D.W.;You, S.J.;Na, B.K.;Kim, J.H.;Chang, H.Y.;Oh, W.Y.
한국진공학회:학술대회논문집
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한국진공학회 2014년도 제46회 동계 정기학술대회 초록집
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pp.218.1-218.1
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2014
In order to measure the absolute plasma density, various probes are proposed and investigated and microwave probes are widely used for its advantages (Insensitivity to thin non-conducting material deposited by processing plasmas, High reliability, Simple process for determination of plasma density, no complicate assumptions and so forth). There are representative microwave probes such as the cutoff probe, the hairpin probe, the impedance probe, the absorption probe and the plasma transmission probe. These probes utilize the microwave interactions with the plasma-sheath and inserted structure (probe), but frequency range used by each probe and specific mechanisms for determining the plasma density for each probe are different. In the recent studies, behaviors of each microwave probe with respect to the plasma parameters of the plasma density, the pressure (the collision frequency), and the sheath width is abundant and reasonably investigated, whereas relative diagnostic characteristics of the probes by a comparative study is insufficient in spite of importance for comprehensive applications of the probes. However, experimental comparative study suffers from spatially different plasma characteristics in the same discharge chamber, a low-reproducibility of ignited plasma for an uncertainty in external discharge parameters (the power, the pressure, the flow rate and so forth), impossibility of independently control of the density, the pressure, and the sheath width as well as expensive and complicate experimental setup. In this paper, various microwave probes are simulated by finite-different time-domain simulation and the error between the input plasma density in FDTD simulations and the measured that by the unique microwave spectrums of each probe is obtained under possible conditions of plasma density, pressure, and sheath width for general low-temperature plasmas. This result shows that the each probe has an optimum applicable plasma condition and reliability of plasma density measurement using the microwave probes can be improved by the complementary use of each probe.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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