Lipoxygenase and Kunitz trypsin inhibitor protein of mature soybean [Glycine max (L.) Merr.] seed are main anti-nutritional factors in soybean seed. A new soybean cultivar, "Gaechuck#1" with the traits of black seed coat, green cotyledon, lipoxygenase2,3 and Kunitz trypsin inhibitor protein free was developed. It was selected from the population derived the cross of "Gyeongsang#1" and C242. Plants of "Gaechuck#1" have a determinate growth habit with purple flowers, brown pubescence, black seed coat, black hilum, oval leaflet shape and brown pods at maturity. Seed protein and oil content on dry weight basis have averaged 39.1% and 16.2%, respectively. It has shown resistant reaction to soybean necrosis, soybean mosaic virus, Cercospora leaf spot and blight, black root rot, pod and stem blight, and soybean pod borer. "Gaechuck#1" matured on 5-10 October with a plant height of 50 cm. The 100-seed weight of "Gaechuck#1" was 23.2g. Yield of "Gaechuck#1" was averaged 2.2 ton/ha from 2005 to 2007.
Lipoxygenase and Kunitz trypsin inhibitor protein are the main antinutritional factor in mature soybean seed. A new soybean cultivar, "Gaechuck#2" with yellow seed coat, lipoxygenase2,3-free and Kunitz trypsin inhibitor protein-free was developed. It was selected from the population derived from the cross between "Jinpumkong2ho" and C242. Plants of "Gaechuck#2" have determinate growth habit with purple flowers, tawny pubescence, yellow seed coat, yellow hilum, oval leaflet shape and brown pods at maturity. Seed protein and oil content on a dry weight basis were 40.7% and 18.7%, respectively. It has shown a resistant reaction to soybean necrosis, soybean mosaic virus, Cercospora leaf spot and blight, black root rot, pod and stem blight, and soybean pod borer. Gaechuck#2 matured in 4 October with plant height of 54cm and a 100-seed weight of 24.4g. Average Yield of Gaechuck#2 was 230 - 250 kg/10a in 2005 - 2007.
The microorganisms producing a lipoxygenase inhibitor were screened from a wide variety of sources. The isolated strain was assigned to genus Penicillium by its cultural and morphological characteristics. The proper medium for the production of lipoxygenase inhibitor was composed of glucose 3.0%, ammonium sulfate 0.4%, and potassium phosphate (dibasic) 0.1%. The cultivation for lipoxygenase inhibitor production was carried out in 500m1 Erlenmyer flasks containing 100m1 of the medium at $30^{\circ}C$ by cultivating reciprocally. The highest lipoxygenase inhibitor production was observed after 8 days of cultivation. The inhibitor was the low molecular weight substance and inhibited specifically soybean origin lipoxygenase.
Soybean (Glycine max (L.) Merr.) seed is the main source of protein and oil for human and animal. The use of soybean protein has been expanded in the food industry due to their excellent nutritional benefits. But, antinutritional and allergenic factors are exist in the raw mature soybean. Lipoxygenase, Kunitz trypsin inhibitor (KTI) protein, and ${\alpha}^{\prime}-subunit$ of 7S globulin are main antinutritional factors in soybean seed. Breeding of a new soybean strain with lacking these components is needed. The objective of this research was to select new soybean line with lipoxygenase-free, KTI-free, and ${\alpha}^{\prime}-subunit$ free (lx1lx1lx2lx2lx3lx3titicgy1cgy1 genotype). Total 434 $F_2$seeds were obtained from the cross of cultivar, "Gaechuck#2" and PI506876. Presence and absence of lipoxygenase, KTI protein, and ${\alpha}^{\prime}-subunit$ of 7S globulin was tested by SDS electrophoresis using a partial seed of each $F_2$seed. Only one $F_2$seed with lacking these three components was selected and was planted to $F_2$plant. Absence of lipoxygenase, KTI, and ${\alpha}^{\prime}-subunit$ protein was confirmed on the $F_3$seeds harvested. Selected line with lx1lx1lx2lx2lx3lx3titicgy1cgy1 genotype might be useful for soybean breeding.
Lipoxygenase inhibitory acitivity of the methanolic extract of 60 different kinds of plant seeds was determined by a spectrophotometric method using a soybean lipoxigenase(SLO) and linolenic acid. Among the extracts examined, the methanolic extract of nutmeg(Myristical fragrans)seed showed the most potent SLO inhibitory activity. To isolate SLO inhibitor, hence, the defatted methanol extract was further partitioned with ether, ehtylacetate , and n-butanol , stepwise. The ether souble fraction was successively chromatographed on silica gel, Sephadex LH-20 and preparative TLC. Three phenolic compounds were isolated , and one of them showing a strong SLO inhibition activity was identified as a 2,6-dihydroxy-9-(3', 4', -dihydroxyphenyl)nonylphenone (IC50a=0.39$\mu\textrm{g}$/ml) by 1H-& 13C0NMR, IR, and MS spectroscopy.
Lipoxygenase-deficient soybeans, Jinpumkong (lipoxygenase-2, 3 lacking) and Jinpumkong 2 (lipoxygenase-1, 2, 3 lacking), were breeded for the improvement of beany flavor problem. The objectives of this study were to characterize and to examine the storage stability of two lipoxygenase-deficient soybeans by comparing with Hwangkeumkong having high lipoxygenase activity. The crude protein and crude lipid content of Jinpumkong 2 were lower than those of Hwkangkeumkong and Jimpumkong. All soybean samples were middle-sized and yellow-coated seeds. The rate of water uptake and trypsin inhibitor activity of Jinpumkong were greater than those of others. The cooking rate of Hwangkeumkong was the highest among all. The lipoxygenase activity of Hwangkeumkong was decreased when the soybeans were stored at $40^{\circ}C$ for 96hrs at 90% RH which is the condition of accelerated aging. After accelerated aging, the germination ratio of Hwangkeumkong was not changed but the ratio and speed of germination dropped rapidly in Jinpumkong and Jinpumkong 2.
This study was performed to investigate the change of lipoxygenases and urease activities, trypsin inhibitor, tannin and phytic acid contents during heat treatment of Jinpum soybean. The lipoxygenase-1 and urease possessed their activities after heating at $60^{\circ}C$ for 100 min, but their activities disappeared rapidly at $80^{\circ}C$ and $100^{\circ}C$ for 20 and 10 min. There were no lipoxygenase-2 and -3 activities in Jinpum soybean with and without heating. Trypsin inhibitor was lost 91.9%, 78,1% and 58.6% of the activity after heat treatment at $100^{\circ}C$ for 50 min, at $80^{\circ}C$ for 100 min and at $60^{\circ}C$ for 100 min, respectively. The tannin content was increased by heat treatment. The content of and phytic acid was increase after heating at $60^{\circ}C$ for 100 min, unchanged at $80^{\circ}C$ for 100 min and decreased at $100^{\circ}C$ for 100 min.
Kang, Gyung Young;Choi, Sang Woo;Chae, Won Gi;Chung, Jong Il
Journal of Plant Biotechnology
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v.47
no.2
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pp.118-123
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2020
The black seed coat of soybeans contain anthocyanins which promote health. However, mature soybean seeds contain anti-nutritional factors like lipoxygenase, lectin and Kunitz Trypsin Inhibitor (KTI) proteins. Furthermore, these seeds can be used only after the genetic elimination of these proteins. Therefore, the objective of this study was to develop novel soybean genotypes with black seed coat and triple recessive alleles (lx1lx1lx2lx2lx3lx3, titilele) for lipoxygenase, lectin, and KTI proteins. From a cross of parent1 (lx1lx2lx3/lx1lx2lx3, ti/ti, Le/Le) and parent2 (lx1lx2lx3/lx1lx2lx3, Ti/Ti, le/le), 132 F2 seeds were obtained. A 3:1 segregation ratio was observed during F2 seed generation for the inheritance of lectin and KTI proteins. Between a cross of the Le and Ti genes, the observed independent inheritance ratio in the F2 seed generation was 9: 3 : 3 : 1 (69 Le_Ti_: 32 leleTi_: 22 Le_titi: 9 leletiti) (χ2=2.87, P=0.5 - 0.1). From nine F2 seeds with triple recessive alleles (lx1lx1lx2lx2lx3lx3, titilele genotype), one novel strain posessing black seed coat, and free of lipoxygenase, lectin and KTI proteins, was selected. The seed coat color of the new strain was black and the cotyledon color of the mature seed was green. The weight of 100 seeds belonging to the new strain was 35.4 g. This black soybean strain with lx1lx1lx2lx2lx3lx3, titilele genotype is a novel strain free of lipoxygenase, lectin, and KTI proteins.
The contents of the several antinutritional factors and lipoxygenase activity of 19 soybean varieties recommended for cultivation in Korea were analyzed. The ranges of raffinose and stachyose contents, which are the flatulence factors, were $0.74{\sim}1.58%\;d.b.\;and\;3.34{\sim}5.30%d.b.$, respectively and the total amount of these sugars was high in the varieties of Hill, Baekun and Jangbaek. The contents of trypsin inhibitor and phytate phosphorus in the soybean varieties ranged from 21.2 to 37.0 TI/g, d.b. and from 337 to 605mg%, d.b. respectively. The lipoxygenase activity of $163.6{\sim}403.5unit$ was shown in the 19 soybean varieties, and Padal, Jangbaek and S-133 were the varieties with the higest activity.
The effect of several inhibitors such as ascorbic acid on the lipoxygenase in soybeans known to catalyze reaction resulting in racid off-flavors was examined in the soybean homogenates by the oxygen electrode method. Among 8 compounds added at homogenizing process, 10 mM ascorbic acid inhibited lipoxygenase-1 and lipoxygenase-2/3 activities to 41.7 and 49.8%, respectively. Inactivation of lipoxygenase-2/3 was highly accelerated by homogenization for 15 min at room temperature, so the activity was inhibited 70.8% comparing with the homogenization of 3 min. When soybean homogenates with 10 mM ascorbic acid was stored at $25^{\circ}C$ for 72 hrs, lipoxygenase-2/3 activities lowered to 52.8% whereas L-1 activities lowered to 15.8%. Since it is reported that lipoxygenase-2 is responsible for the off-flavor of soybean products, the inhibitory effect of ascorbic acid among several inhibitors investigated might be useful in soybean processing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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