Nanotechnology, one of the technologies that forms the core of the recent scientific innovation, is used much in our real lives. Especially products that use nano silver are being sold, with its positive characteristics resulting from the antibacterial effects of both nano materials and silver. But critiques have pointed out that nano silver diffused into everyday life too quickly as we do not have done any comprehensive research about the material, and worry that nano silver will affect the ecology adversely. Therefore, this research focuses on investigating the toxicity of silver nanoparticles first. To compare the effects of exposure to silver nanoparticles at pre-somite stage and somite stage(10 hours after fertilization), we exposed zebrafish embryos to silver nanoparticles(15, 30 ppt) during embryogenesis, and then checked the details of catalase enzyme activity. The hatch rate decreased in the silver nanoparticles exposed groups(15 and 30 ppt); furthermore, the hatched fishes had an abnormal notochord, damaged eyes and curved tail. The catalase activities of the 15 ppt exposed group at somite stage increased relative to those in the control group. Therefore, the silver nanoparticles could seriously damage the development of zebrafish embryos. Especially, exposure to silver nanoparticles at somite stage did severer damage than exposure since pre-somite stage did.
We are reporting the identification, expression patterns, and possible biological functions of zebrafish kif3b (kif3bz) encoding 475 amino acids. Kif3Bz contains the kinesin motor domain, catalytic domain, KISc domain, and one single coiled coil domain. Phylogenetic analysis indicates that kif3bz is a highly conserved gene among the tested vertebrates. First of all, both maternal and zygotic messages of kif3bz were evenly distributed in the blastomeres at 2-cell stage. Its ubiquitous expression throughout the blastomeres continued till 40% epiboly. However, kif3bz transcripts became restricted in Kupffer's vesicle at tailbud and 6-somite stages. At 13-somite stage, kif3bz expression pattern became specific to the telencephalon, diencephalon, trigeminal placode, and somites. Such expression patterns were further intensified in the telencephalon, diencephalons, hind brain, pronephric ducts, optic vesicles, and spinal cord neurons in the 23-somite stage embryos, and last till 24 hpf. We discussed possible functions of Kif3Bz related to the vertebrate embryonic development.
The final pattern of the skeletal muscle of a vertebrate depends on the position-specific behavior of the muscle precursor cells during early developmental process and the abdominal muscle is made of cells which migrate a relatively long distance from their original tissue, myotome of dorsal mesoderm. We report the spatia-temporal migration pattern of abdominal muscle in Xenopus laevis by in situ hybridization and immunohistological studies. Shortly after hatching tadpole stage (stage 31/32), a group of myotomal cells detaches from the lower tip of the second somite and migrates ventrally to the lower position of abdomen. At stage 34/35, a second cell group migrates away from the third somite. Total 7 myotomal cell groups migrate ventrally one by one from the second to eighth myotome along their own pathways through the cell free space located between epidermis and subepidermal layer of the abdomen. During migration, the sizes of the cell groups (abdominal muscle anlagens) are increased to several tens fold. Around stage 40 all the abdominal muscle anlagens reaches their final positions and are interconnected side by side rostrocaudally. They are also connected to other types of muscles, forming a large multisegmented abdominal muscle. Heat shock study suggests that the disruption of segmentation of somites does not block the detachment of abdominal muscle anlagen, though the treatment gave stage- and dosagedependent effects on the migration speed.
In Xenopus laevis the cranial myotomes, W, X, Y and Z represent transient embry-specific structures since they undergo reduction" in the later stage of development. An extensive set of expertmental studies was undertaken in order to discriminate whether the cranial myotomes perform a programmed autonomous death or reduction" by the influence from surrounding tissue such as otic vesicle. Removal of the neighboring otic vesicle did not affect WXYZ degeneration. Grafting the otic vesicle to novel site along the somite file did not induce local myotome degenration. When anterior-most somitic primordia were relocated to the trunk somite region, they underwent reduction eventually. Likewise, with the transplantation of posterior somite forming region into the anterior, autonomous differentiation pafferns were observed. And the cullture of presumptive somitic tissue revealed that WXYZ might degnerate like in vivo. It is therefore concluded that the cranial myotomes of Xenopus laevis exhibit an autonomous cell death during later embryogenesis.yogenesis.
The effects of embryo number and incubation volume on the development of mouse embryos were evaluated. The growth rate of two-cell mouse embryos to attached blastocyst stage and the growth rate of blastocysts to early somite stage were assessed after culture in different incubation volumes and embryo densities. Embryos were collected from ICR female mice superovulated with pregnant mare serum gonadotropin and human chorionic gonadotropin and mated by ICR males. In experiment 1, groups of one, five, ten, twenty 2-cell embryos were cultured in 10-, 50-, 500-, 1000-${\mu}l$ drops of BWW media under mineral oil at $37^{\circ}C$ in a humidified atmosphere of 5% $CO_{2}$ and 95% air. As the incubation volume decreased, significantly (p<0.05) higher rates of embryos reached morular and blastocyst stage on day 3 and 4 culture, respectively. In experiment 2, groups of one, five, ten, twenty blastocysts were cultured in 1- and 2-ml volumes of CMRL 1066 media under same condition as in experiment 1. However the reverse was the result. Decreasing the number of embryos incubated per volume from 1 to 20 significantly (p<0.05) increased the number of blastocysts reaching the late egg cylinder (LEC) and early somite (ES) stage on day 6 and 8 culture, respectively, regardless of incubation volume. Blastocysts cultured in 2ml had higher (p<0.05) development rates to LEC and ES stage on day 6 and 8 culture, respectively, than embryos cultured in 1ml. Our results suggest that the effects of embryo number and incubation volume on the development of mouse embryos are stage specific and the shifting point was between hatching and EEC stage.
In order to investigate the factors of the control mechanism of somitogenesis, early chick embryos (H-H stage $8{\sim}13$) were treated with heat shock, ${\alpha}$-amanitin and cycloheximide and morphological changes of somite were examined by light microscopy, transmission and scanning electron microscopy. In normal chick embryo, somites were formed from the somitomere which preexisted in segmental plate. Somites were wrapped with extracellular collagen fibrils and connected with neural tube, notochord and ectoderm. And then, somites were differentiated to sclerotome, dermatome and myotome by the interaction of nervous tissue. Abnormal somites were observed after formation of six or seven so mites in heat shock treated group. Amounts of collagen fibrils were obviously decreased in this group. In cycloheximide treated group, most so mites were smaller and neural tube formation was incomplete. Chromatins were condenced and formed several heterochromatins in the nucleus of somite cells. Lipid like cytoplasmic dense mass and lipid droplets were also observed. Segmentation of somites seemed to be normal progress in ${\alpha}$-amanitin treated group. Center of somite, however, hollowed in longitudinal sectioned samples. These results suggested that so mites were already existed in the segmental plate as the form of somitomere. Segmented somites were contacted with neural tube or notochord and the somites were tightly connected with each other by the extracellular collagen fibrils which were secreted from neuroepithelium and somite cells. Somites are thought to differentiate into sclerotome, dermatome and myotome by these interactions.
The effect of aromatic amino acids such as phenylalaine, tryptophan and tyrosine on somitogenesis at the early stage of chick embryo has been investigated morphologically using light and electron microscopy. Micrographs of aromatic amino acid injected chick embryo showed that an incomplete somite segmentation occurred and some decremental effect on the nervous system were observed. Somites were poorly developed and their size were variable. Electron micrograph of somatic cells from aromatic amino acid injected chick embryo showed that chromatins were coagulated, some of mitochondria were damaged, and nucleus were transformed considerably in some cases. The protein and nucleic acid levels and some enzyme activities of 15-day chick embryo which received the injection of 1mg of aromatic amino acid in 0.05 ml of saline 24 hours after the incubation were analyzed. Protein, DNA and RNA levels of the test group were not lowered significantly but the activities of enzymes for basic metabolism, such as lactate dehydrogenase, succinate dehydrogenase, malate dehydrogenase and glucose 6-phosphate dehydrogenase were considerably lowered as compared with those of control. From the present expeerimental results, it was tentatively suggested that the administration of amino acid might slow down the yolk granule degradation probably by feed back mechanism resulting in the disturbance of amino acid balance in the cell, which might give rise to impair normal metabolic pattern leading to abnormal somitogenesis to chick embryo at very early stage of development.
The decapodid stage of Lebbeus comanthi Hayashi and Okuno and the first zoea of Thor amboinensis (De Man) are described based on laboratory-hatched eggs from females collected from Japan. The decapodid stage of L. comanthi is readily distinguished from that of L. groenlandicus by the carapace without anteroventral denticle and tooth behind rostrum, the absence of the antennal spine, the four-segmented outer flagellum of the antennule, the absence of the palp of the mandible, and the telson with posterior margin con caved medially and without dorsolateral spine. The carapace with anteroventral denticle and the third abdominal somite distinctly curved in lateral view distinguish the first zoea of T. amboinensis from that of T. dobkini Chace and T. floridanus Kingsley. Larval characters of the genus Thor are summarized.
Novactaea pulchella was reared in the laboratory, from hatching to the megalopal stage at $25^{\circ}C$. The larval stage of it consists of two zoeal and one megalopal stages. The first zoea of the present study differs from that described by Terada (1990) in the setal presence of the carapace, the maxilla and the maxilliped, and the lateral process on the abdominal somite. It is reported for the first time that brachyuran zoeas belonging to a species share two types of lateral processes on the abdominal somites. They are either on the abdominal somites 2 and 3 or on abdominal somites 2 to 5. A provisional key is provided to aid the identification of the actaeine zoeas in Korea and the adjacent waters.
An ovigerous hair crab, Telmessus acutidens, was collected in South Korean waters and its larvae were reared in the laboratory. The larval development consists of four zoeal (including an extra zoeal stage) and one megalopal stages. Four zoeal stages are described and illustrated in detail. The zoeas of the present material show some differences from Kurata (1963)'s plankton-collected zoea of T. acutidens in the characteristics of the carapace spines, an endopod and an exopod of the antenna, and the posterolateral process of the abdominal somite. Kurata's zoea agreed well with that of T. cheiragonus. So, it is suggested that Kurata's zoea may be the second zoea of T. cheiragonus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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