The protein profiles among Korean rice cultivars were assessed by total protein determination, solubility fractionation, SDS-PAGE analysis and scanning densitometry. In the extraction of protein, the SDS/urea system at a neutral pH was more efficient than that at alkaline pH. The determination of total protein showed that the protein content was similar among cultivars, ranging from 87.9 to 92.7 mg/g dry weight. Additionally, the water/NaCl-soluble protein fraction, containing 14${\sim}$16 kDa albumin and 22 kDa globulin ${\alpha}$-globulin, was also similar among cultivars, with a range of 9.94 to 11.98 mg/g dry weight. The SDS-PAGE/densitometry of total protein showed that there was no discernable difference in proteins of higher molecular weights among various cultivars, whereas the amount of lower molecular weight proteins (14${\sim}$16 kDa) is somewhat variable among cultivars. Furthermore, SDS-PAGE analysis of water/NaCl-soluble and propanol-soluble fractions indicates that there is a discernible change in the content of albumin, globulin or prolamin among cultivars. Thus, the PAGE/densitometry method, preceded by solubility fractionation, is useful for examining differences in protein profiles of rice cultivars.
Kim, Hyeon Jeong;Kim, Ki Hyun;Song, Sang Mok;Kim, Il Yong;Park, Sung Hwan;Gu, Eun Ji;Lee, Hyun Ji;Kim, Jin-Soo;Heu, Min Soo
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.46
no.2
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pp.119-128
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2013
A protease inhibitor was fractionated from fish eggs using methods based on protein solubility. Fractionation efficiency was evaluated with regard to percent recovery and total inhibitory activity (U). The fractionation of protease inhibitor (PI) from egg extracts of skipjack tuna (ST, Katsuwonus pelamis), yellowfin tuna (YT, Thunnus albacores), and Alaska pollock (AP, Theragra chalcogramma) was performed by precipitation with cold acetone or ammonium sulfate (AS). Fractions exhibiting the strongest inhibitory activity contained 20-40% (v/v) cold acetone or 40-60% saturated AS fractions. AS fractionation was more effective in isolating PI than was precipitation with acetone. The total inhibitory activity and percent recovery of fraction obtained with AS 40-60% toward trypsin and $N{\alpha}$-benzoyl-L-arginine-p-nitroanilide (BAPNA) were 4,976 U and 24.2% for ST, 3,331 U and 38.1% for YT, and 4,750 U and 43.8% for AP, respectively. In comparisons against six commercial proteases, 40-80% AS fractions, made by combining the 40-60% and 60-80% AS fractions from fish egg extract, exhibited the strongest inhibition of trypsin when using a casein substrate. These results suggest that fish eggs act as serine protease inhibitors and may be useful for protease inhibition in foodstuffs.
Kim, Hyung Jun;Lee, Hyun Ji;Park, Sung Hwan;Jeon, You-Jin;Kim, Jin-Soo;Heu, Min Soo
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.48
no.2
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pp.178-186
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2015
Protease inhibitors (PI) of trypsin and papain as target proteases from the roe of bastard halibut Paralichthys olivaceus were fractionated out using ammonium sulfate precipitation (A), DEAE 650M anion exchange chromatography (D), and Sephacryl S-300 gel filtration (S). The recovery percentages of the fractions with the strongest inhibitory activity for each fractionation method were 13% for the A4 fraction, 21.2% for the D3 fraction, and 21.3% for the S2 fraction, with specific inhibitory activities of the fractions toward trypsin and casein of 168, 139, and 218 U/mg, respectively, while no inhibition of papain was observed. The $IC_{50}$ for the trypsin-specific substrate $N{\alpha}$-benzoyl-$\small{L}$-arginine-p-nitroanilide (BAPNA) was 0.65, 1.55, 2.26, and 2.85 mg/mL for the A4, S2, A3, and D3 fractions, respectively. These results suggest that chromatographic fractionation methods (D and S) based on the molecular mass and charge of the protein were more effective at fractionating PI than was ammonium sulfate precipitation based on protein solubility, and that the bastard halibut roe extract acts as a serine protease inhibitor. Therefore, the PI fraction from fish roe might be useful for inhibiting proteases in foodstuffs, and could constitute an alternative food-grade inhibitor for the surimi industry.
Chacterization of MMA/AN organosol copolymer and subsequent comparison with the prior art latex copolymers has been accomplished. By means of NMR analyses, we found both types of copolymers to be random. The GPC analyses show that the organosol copolymers have a singnificantly broader MW spread than latex copolymers. This is due to the low MW stabilizer which is present as a physical mixture. As a result, the MW distribution is bimodal. Fractionation of a typical organosol copolymer yields a low MW(33,000-100,000), MMA rich fraction and a high MW (250,000-330,000), AN rich fraction. Solubility-wise, the organosol copolymers are readily soluble in the lacquer solvent MEK to give a colorless film. The prio rart copolymers, hewever, were imcompletely soluble and gave yellow, hazy film.
In order to investigate the contamination characteristics of the heavy metals in the mine tailings of abandoned gold mine and its surrounding agricultural soils, a sequential extraction procedure of increasing reactivity in the dissolution processes of the heavy metals(Cd, Cu, and Pb) which were associated with solid and/or solution phase in soils was attempted to partition into six particulate fractions : exchangeable, bound to carbonate, bound to Fe-Mn oxides, bound to organic matter, residual, and soluble. Among indigenous heavy metals in the mine tailings, Pb was the most abundant and Cu and Cd were followed by. Fractionation result of Pb obtained from the triplicate samples of the mine tailings were in the order of Fe-Mn oxide> Carbonate> Residual> Organic> Exchangeable> Soluble, while Wolgok series were Exchangeable > Fe-Mn oxide > Carbonate> Organic> Residual> Soluable. However the other heavy metals studied were not followed this trend. The fractionation results of mine tailing and agricultural soils demonstrated that different geochemical fractions were operationally defined by an extraction sequence that generally followed the order of decreasing solubility. Therefore potential mobility and bioavailability of heavy metals as toxic pollution sources can be evaluated when studying the pollution levels of heavy metals in soils.
1. Nitrogenous compounds of-organic materials as nitrogen sources for Korean ginseng were characterized according to their solubility and chemical forms. 2. The extractable fractionation was as follows : Yakto group : non-extractable N > acid hydrolyzable N > acid nonhydrolyzable N > water sol. N, Litter group : acid hydrolyzable N > non-extractable N > water sol. N > acid non-hydrolyzable N, Bone meal : acid hydrolyzable N > water sol. N > acid non-hydrolyzable N. 3. Nitrogenous compounds in the water sol. fraction were : Yakto group and Litter group : humus N > amino acid N > nitrate N (recognized only in Yakto group) > ammonia N > hexosamine N > amide N, Bone meal : amino acid N > humus N > ammonia N > amide N. And nitrogenous compounds in the acid hydrolyzable fraction were : amino acid N > humus N ${\simeq}$ ammonia N > hexosamine N. 4. Availability was discussed about the major nitrogenous compounds (amino acid, humus and inorganic N) and the solubility.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.18
no.4
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pp.423-429
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1989
This study was investigated to determine the amino acid content, fractionation and gel electrophoresis pattern of mungbean protein isolates(MPI), which were prepared from defatted mungbean flour(DMBF) of sunhwa-nogdu(SH) and conventional(C) mungbean varieties. MPI have particulary high content of lysine and low sulfur containing amino acids, even though amino acid pattern of mungbean flour and its protein isolate were found to be similar And, there was no significant difference In the amino acid composition between SH and C varieties. Further fractionation of MPI by solubility method and electrophoresis procedure was demonstrated that the fractions, such as albumin, globulin, glutelin and residue from MPI showed $6{\sim}10$ bands in SDS/PAGE pattern. And also the most of each protein fractions had lower molecular weight than 68,000 daltons and distributed more in the molecular weight range $43,000{\sim}68,000$ daltons.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.32
no.1
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pp.59-74
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2012
Buffer solubility and protein fractionation were evaluated from the hays (timothy, alfalfa and klein) and straws (tall fescue and rice), and $In$$vitro$ trial was conducted to examine the effect of buffer extraction on fermentation characteristics, degradability and gas ($CO_2$ and $CH_4$) production. Buffer soluble protein (SP) content and A fraction in total protein were highest in alfalfa hay as 61% and 41.77%, respectively while lowest in rice straw (42.8% and 19.78%, respectively). No difference was observed in B1 fraction among forages but B2 fraction was slightly increased in klein hay (12.34%) and tall fescue straw (10.05%) compared with other forages (6.34~8.85%). B3 fraction of tall fescue was highest as 38.49% without difference among other forages while C fraction was highest in rice straw. pH in incubation solution was higher in all forages after extraction than before extraction at 3h (P<0.01) and 6h (P<0.05), and pH from hays of timothy and alfalfa was higher than the other forages at 6h (P<0.05) and 12h (P<0.001). Regardless of extraction, ammonia-N concentration from alfalfa hay was increased at all incubation times and extraction effect was appeared only at 3h incubation time (P<0.01). Total VFA concentration from alfalfa hay was highest up to 24h incubation while those from tall fescue straw and rice straw were lowest. Buffer extraction decreased (P<0.01~P<0.001) the total VFA concentration. Acetic acid proportion was increased (P<0.001) before extraction of forages but no difference was found between forages. Propionic acid($C_3$) proportion was also increased(P<0.001) before extraction in all forages than in straws at 3h, 24h and 48h incubations, and $C_3$ from hays were mostly higher (P<0.05) than from straws. Butyric acid proportion, however, was not affected by extraction at most incubation times. Parameter 'a' regarding to the dry matter (DM) degradation was increase (P<0.001) in all forages before extraction, and was decreased (P<0.05) in tall fescue straw and rice straw compared with hays. Parameter 'b' was also increased (P<0.001) before extraction but no difference was found between forages. Effective degradability of DM (EDDM) was higher (P<0.001) before extraction in most forages except for rice straw. Buffer extraction decreased (P<0.05) all parameters (a, b, and c) regrading to the crude protein (CP) degradation but no difference was found between forages. Effective degradation of CP (EDCP) was lower (P<0.05) in straws than in hays. Parameters 'a' and 'b' regarding to the NDF degradation (P<0.01) and effective degradability of NDF (EDNDF, P<0.001) were also higher in forages before extraction than after extraction but no difference was found between forages. Buffer extraction reduced (P<0.05~P<0.001) $CO_2$ production from all the forages uo to 24h incubation and its production was greater (P<0.05~P<0.01) from hays than straws. Methane ($CH_4$) production was also greater (P<0.01~P<0.001) in all forages at all incubation times, and its production was greater (P<0.05) from hays than from straws at most incubation times. Based on the results of the current study, it can be concluded that buffer solubility and CP fractionation might be closely related with $In$$vitro$ VFA concentration, degradability and gas ($CO_2$ and $CH_4$) production. Thus, measurement of buffer solubility and protein fractionation of forages might be useful to improve TMR availability in the ruminants.
Some minor Korean beans including red bean, mung bean and kidney bean were subjected to proximate analysis, fractionation by the solubility method and polyacrylamide gel disc electrophoresis of proteins to obtain the following results. 1) Proximate composition of the beans showed that fat content was less than 1%, carbohydrate was about 60% and protein content was in the range of $20{\sim}25%$. 2) Total globulin content of the proteins was $46{\sim}59%$, a little lower than in soybean, in the order of mung bean> kidney bean> red bean. Albumin content was comparable in kidney bean, and lower in red bean and mung bean as compared with that in soybean. Glutelin content was relatively higher, being in the range of $10{\sim}19%$ and in the order of red bean> mung bean> kidney bean. 3) According to the electrophoretic pattern, total protein fractions extracted with pH 7.6 buffer from red bean, mung bean and kidney bean showed 9.12 and 11 bands, respectively, whereas those extracted with pH 4.8 buffer showed 13, 13 and 12 bands, respectively. Water extracts of red bean, mung bean and kidney bean showed 10, 8 and 9 bands, respectively, while albumin fractions showed 8, 9 and 7 bands and globulin fractions, 4 bands in all of three beans. The band having a Rm value of $0.5{\sim}0.7$ in the globulin fraction from three beans was not observed in the water extract and appears to be specific to water insoluble globulin.
Koh, Il-Ha;Kim, Jungeun;Kim, Gi Suk;Chang, Yoon-Young;Yang, Jae-Kyu;Moon, Deok Hyun;Choi, Yulim;Ji, Won Hyun
Journal of Soil and Groundwater Environment
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v.23
no.1
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pp.74-84
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2018
Pot experiments were conducted to assess the applicability of ferric chloride ($FeCl_3$) as a washing agent for laboratory scale in-situ soil washing of paddy soil contaminated with Pb. During the monitoring period for nearly 90 days, the concentrations of Fe and Mn in the soil solution were lower than that of control soil due to lime ($Ca(OH)_2$) amendment for pH recovery. Lime amendment also affected solubility and fractionation of Pb into soil matrix. The result showed that Pb concentrations of soil solution were consistently lower than that of control soil, and the concentration in the exchangeable fraction in washed soil decreased from 13 to 2 mg/kg. There was no significant difference of biomass yield of rice plant in each pots, and Pb contents in rice roots and grains in washed soil decreased to 50 and 78%, respectively, of the control soil. Therefore, $FeCl_3$ could be used as an acceptable in-situ washing agent for agricultural paddy soil if appropriate soil pH management is subsequently practiced.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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