Sheath blight disease caused by the necrotrophic, soilborne pathogen Rhizoctonia solani Kuhn, is the global threat to rice production. Lack of reliable stable resistance sources in rice germplasm pool for sheath blight has made resistance breeding a very difficult task. In the current study, 101 rice landraces were screened against R. solani under artificial epiphytotics and identified six moderately resistant landraces, Jigguvaratiga, Honasu, Jeer Sali, Jeeraga-2, BiliKagga, and Medini Sannabatta with relative lesion height (RLH) range of 21-30%. Landrace Jigguvaratiga with consistent and better level of resistance (21% RLH) than resistant check Tetep (RLH 28%) was used to develop mapping population. DNA markers associated with ShB resistance were identified in F2 mapping population developed from Jigguvaratiga × BPT5204 (susceptible variety) using bulk segregant analysis. Among 56 parental polymorphic markers, RM5556, RM6208, and RM7 were polymorphic between the bulks. Single marker analysis indicated the significant association of ShB with RM5556 and RM6208 with phenotypic variance (R2) of 28.29 and 20.06%, respectively. Co-segregation analysis confirmed the strong association of RM5556 and RM6208 located on chromosome 8 for ShB trait. This is the first report on association of RM6208 marker for ShB resistance. In silico analysis revealed that RM6208 loci resides the stearoyl ACP desaturases protein, which is involved in defense mechanism against plant pathogens. RM5556 loci resides a protein, with unknown function. The putative candidate genes or quantitative trait locus harbouring at the marker interval of RM5556 and RM6208 can be further used to develop ShB resistant varieties using molecular breeding approaches.
Since 1990, destructive yellow rots on Ganoderma lucidum caused by a soilborne fungus have been occurred in major cultivation areas of Korea. Incidences of the disease were 61% in Chulwon and 94% in Kanghwa area where the mushroom has been cultivated for 10 years, whereas the disease has not been found yet in new cultivation areas such as Moonkyung and Hongsung. when severely infected, inner tissues of bed-logs showed severe yellow and fruiting bodies of the mushroom was not produced. Infected tissues of bed-logs were readily distinguished from those of healthy ones by a distinctive brown border line. When the disease progressed, mycelia of Ganoderma lucidum were totally destroyed, and abundant ascocarps of the pathogen were formed inside the tissues of bed-logs showing yellowish green. The fungus derived from a single ascospore strongly lysed mycelia of Ganoderma lucidum growing on bottle media, and non-volatile components secreted by the pathogen were also highly inhibitory to mycelial growth of the mushroom fungus. The pathogen was identified as Arthrographis cuboidea based on its distinctive cultural and morphological characters. The fungus produced arthroconidia and unbrached conidiophores. The width of fungal conidia was distinctively wide as compared with the length. Colonies of the fungi were pale yellow to yellowish green on agar media. As a causal pathogen of yellow rot of Ganoderma lucidum., this fungus has not been reported yet in Korea.
Choi, Jin Su;Yang, Seul Gi;Song, Jeong Young;Kim, Hong Gi
Research in Plant Disease
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v.20
no.1
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pp.21-24
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2014
Clubroot caused by the obligate biotrophic protist Plasmodiophora brassicae Woronin is one of the most damaging diseases of Brassicaceae family. In this study, we developed species-specific primer sets for rapid and accurate detection of P. brassicae. The primer sets developed amplified a specific fragment only from P. brassicae DNA while they did not amplify a band from 10 other soilborne pathogens or from Kimchi cabbage. In sensitivity test, the species-specific primer set ITS1-1/ITS1-2 could work for approximately 10 spores/ml of genomic DNA showing more sensitivity and accuracy than previous methods. With quantitative real-time PCR test, the primer set detected less spores of P. brassicae than before, confirming that the species-specific primer set could be useful for rapid and accurate detection of P. brassicae.
Kim Jin-Woo;Kim Eun-Ha;Kang Yong-Sung;Choi Ok-Hee;Park Chang-Seuk;Hwang In-Gyu
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.3
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pp.450-456
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2006
Pseudomonas fluorescens MC07 is a growth-promoting rhizobacterium that suppresses mycelial growth in fungi such as Rhizoctonia solani, Pythium ultimum, Fusarium oxysporum, and Phytophthora capsici. To determine the role of the bacterium's antifungal activity in disease suppression, we screened 2,500 colonies generated by Tn5lacZ insertions, and isolated a mutant 157 that had lost antifungal activity. The EcoRI fragment carrying Tn5lacZ was cloned into pBluescript II SK(+) and used as a probe to isolate wild-type clones from a genomic library of the parent strain, MC07. Two overlapping cosmid clones, pEH4 and pEH5, that had hybridized with the mutant clone were isolated. pEH4 conferred antifungal activity to the heterologous host P.fluorescens strain 1855.344, whereas pEH5 did not. Through transposon mutagenesis of pEH4 and complementation analyses, we delineated the 14.7-kb DNA region that is responsible for the biosynthesis of an antifungal compound. DNA sequence analysis of the region identified 11 possible open reading frames (ORF), ORF1 through ORF11. A BLAST search of each putative protein implied that the proteins may be involved in an antifungal activity similar to polyketides.
Recently, the importance of management and cultivation of grasses has been increased in Korea. Among these cultural practices, the appropriate control of diseases is considered more important than other cultivation techniques such as fertilization and irrigation. The damages of brown patch and large patch caused by Rhizoctonia spp. and Pythium blight caused by Pythium spp. are serious in the major cultivation area of turfgrass in Korea. Since these diseases are difficult to control by agrochemicals, the damages are very serious if these are occured. The periodic spray of agrochemicals, to protect and control these diseases could make some problems of toxicity and environmental pollution as well as rising of non-target diseases. Therefore, the biological methods to control diseases have been required to decrease problems resulted from overuse of agrochemicals, to conserve natural ecosystem, and to control effectively diseases of grasses in the long period. The number of studies about biological control using antagonistic microorganisms have been increased for last half century. However, the application of biological control method has been very limited. In this study, thirteen isolates of R. cerealis, 8 isolates of R. solani and 3 isolates of Phthyn spp. have been isolated from diseased turfgrass in golf course and grass-culture area that have patch and wilting symptoms of zoysia grass and creeping bentgrass. Isolation frequency of R. cerealis and R. solani was high in especially zoysiagrass, while Pythym spp. was isolated from bent grass at low frequency but showed high pathogenicity. Totally, 205 isolates of soil microorganisms were isolated in this study as primary antagonistic microorganism by Herr's triple agar layer plate and dual culture method using rhizosphere of grasses, soil of crop field as the source of antagonistic microorganisms. Among the 205 isolates, 23 isolates were actinomycetes and 182 isolates were bacteria. All of the actinomycetes were isolated by Herr's method. Antagonistic effect of primary isolated microorganisms was tested for in vitro mycelial growth inhibition against pathogenic fungi isolated from grasses and for inhibition of disease occurrence in 24 well tissue culture plate and pot experiment. Then, four isolated of bacteria which are BG23, BG74, BG136 and BG171 were selected as antagonistic microorganisms against soil-born pathogenic fungi of bentgrass.
Melons (Cucumis melo L.) are generally grafted onto Cucurbita rootstocks to manage soilborne pathogens such as Monosporascus root rot and v ine decline (MRR/VD) and Fusarium wilt. However, g rafting onto Cucurbita rootstocks reportedly results in the reduction of fruit quality. In this study, the resistance to MRR/VD, yield, and fruit quality of melons grafted onto melon rootstocks were evaluated under greenhouse conditions. Eight melon rootstocks (R1 to R8) were used and the inodorus melon 'Homerunstar' was used as scion. Melon rootstocks R1 to R6 were selected based on resistance to MRR/VD under greenhouse conditions. Non-grafted 'Homerunstar' and plants grafted onto squash interspecific hybrid 'Shintozwa' rootstock (Cucurbita maxima D. ${\times}$ C. moschata D.) served as controls. Grafted melons were cultivated in the greenhouse infested with Monosporascus cannonballus during two growing seasons (summer and autumn). The responses to MRR/VD, yield, and fruit quality differed depending on the rootstocks and growing season. The melons grafted onto 'Shintozwa' exhibited less severe disease symptoms and higher survival rates than non-grafted melons in both seasons. While the melon rootstocks in the summer cultivation did not increase the survival rate compared to non-grafted melons, the melon rootstocks R1 and R2 in the autumn cultivation led to higher survival rates. The melon rootstocks resistant to MRR/VD increased the percentage of marketable fruits and marketable yields. Grafting onto the melon rootstocks caused little or no reduction of fruit quality such as low calcium content, fruit softening, and vitrescence, especially in lower-temperature autumn season. Accordingly, these results suggest that grafting onto the melon rootstocks may increase the tolerance to MRR/VD and the marketable yield without a reduction of fruit quality.
Yang, Seul Gi;Park, Ju Young;Seo, Mun Won;Kim, Hong Gi
The Korean Journal of Mycology
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v.43
no.4
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pp.286-289
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2015
Clubroot, caused by the obligate parasite Plasmodiophora brassicae, is a severe soilborne disease of Brassicaceae. Storage of clubroot gall is important for studies on pathogenicity and race identification. As the current storage method has been used for more than 100 years, a new storage method should be developed and the most efficient way maintaining pathogenicity should be determined. Effects of storage conditions with different storage periods on pathogenicity in galls of kimchi cabbage were examined in a greenhouse. The experiments were performed under six conditions and four temperatures in order to determine the most effective storage conditions for maintenance of pathogenicity. The most effective conditions for clubroot gall storage was the storage of whole gall at $-70^{\circ}C$ or storage of filtrate at the same temperature through eight layers of gauze after homogenization of the galls.
Bacterial isolates collected from rhizosphere of turfgrass showed strong in vitro antagonistic activities against a number of turfgrass soilborne pathogens such as Rhizoctonia cerealis, R. solani AG-1(1B), Sclerotinia homoeocarpa and Typhula incarnata. In vivo study, four bacterial isolates selected have control values over 60% against one or more turfgrass pathogenic fungi. The antagonistic effects of the bacterial isolates varied depending on fungal species, host plant, and disease pressure, indicating that control effects of the antagonists could be variable depending on field conditions. They were classified as belonging to the genus Pseudomonas species, based on morphological and biochemical characteristics as well as 16S rRNA analysis. The four bacterial isolates are under a study for finding proper cultural conditions and determination formulation type.
Bacteriolytic myxobacteria have been known to secrete various antifungal metabolites against several soilborne phytopathogens including Phytophthora. Among the three isolates of Myxococcus spp., KYC 1126 and KYC 1136 perfectly inhibited the mycelial growth of Phytophtora capsici in vitro. In order to show the biocontrol activity on Phytophthora blight of hot pepper, we tried to find the best way of application of a myxobacterial isolate. Although KYC 1126 fruiting body was easily grown on the colony of Escherichia coli as a nutrient source, it did not control the disease when it was pre-applied in soil. Before the bioassay of a liquid culture filtrate of KYC 1126 was conducted, its antifungal activity was confirmed on the seedlings applying with the mixture of the pathogen's zoospore suspension and KYC 1126 filtrate. On greenhouse experiments with five and four replications, the control value of KYC 1126 on phyllosphere and rhizosphere was 88% and 36%, respectively. Whereas, the control value of dimetnomorph+propineb on phyllosphere was 100% and that of propamorcarb on rhizosphere was 44%. There was a phytotoxicity of the myxobacterial filtrate when seedlings were washed and soaked for 24 hours. Gummy materials were covered with roots. And stem and petiole were constricted, then a whole seedling was eventually blighted.
The soilborne fungus Fusarium oxysporum f. sp. lilii (Fol) is a serious threat to all lily cultivars, especially infecting bulbs and flowers. It has become increasingly important to develop varieties resistant against the bulb rot disease. Genetic diversity of cultivars and reliable screening methods are required for this purpose. Here, an efficient in vitro screening system for evaluating resistance to Fol in 38 in vitro-grown lily plants was investigated. Various factors including culture conditions of Fol, inoculum density, appropriate plant materials, inoculation method and duration, and incubation period of plant materials after inoculation were combined to optimize the screening method. As a result, we suggest optimal conditions for an in vitro screening system for the selection of Fol-resistant lily cultivars as follows. Fol was grown on potato dextrose agar (PDA) medium for 6 days at $25^{\circ}C$ in darkness and used as working inoculation. Spore suspensions were prepared (inoculum density: $1.0{\times}10^4$$spores{\cdot}mL^{-1}$), and then leaf segments $1.5{\times}2.0cm^2$ were inoculated by dipping for 22 hours at $25^{\circ}C$ in dark. Later, leaves were cultured on 0.6% agar plates at $25^{\circ}C$ and 50% humidity with a photoperiod of 16 hours light/8 hours dark (fluence rate of $40{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$) to examine the progress of bulb rot. After 7 days, disease levels were classified into indices 1 (no symptom) to 6 (serious bulb rot). Soil inoculation of Fol carried out with resistant or susceptible lily cultivars that had been selected through in vitro screening confirmed the reproducibility of results. Therefore, the in vitro screening method established in this study is efficient and reliable for selection of lily cultivars resistant against bulb rot disease.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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