Bacillus sp. AIR-5, a strain from soil, produced an extracellular maltopentaose-forming amylase from amylose and soluble starch. This bacterium produced 8.9 g/l of maltopentaose from 40 g/l of soluble starch in a batch fermentation and the maltopentaose made up 90 % of the maltooligosaccharides produced (from maltose to maltoheptaose). The culture supernatant was concentrated using a 30 K molecular weight cut-off membrane and purified by DEAE-Cellulose and Sephadex G-150 column chromatographies. The purified protein showed one band on a native-PAGE and its molecular mass was estimated as 250 kDa. The 250-kDa protein was composed of tetramers of a 63-kDa protein. the isoelectric point of the purified protein was pH 6.9, and the optimum temperature for the enzyme activity was $45^{\circ}C$. The enzyme was quickly inactivated above $55^{\circ}C$, and showed a maximum activity at pH 8.5 and over 90% stability between a pH of 6 to 10. The putative N-terminal amino acid sequence of AIR-5 amylase, ATINNGTLMQYFEWYVPNDG, showed a 96% sequence similarity with that of BLA, a general liquefying amylase.
Ethyl (S)-4-chloro-3-hydroxybutyrate is an intermediate for the synthesis of Atorvastatin, a chiral drug used for hypercholesterolemia. A Rhodococcus erythropolisstrain (No.7) able to convert 4-chloro-3-hydroxybutyronitrile into 4-chloro-3-hydroxybutyric acid has recently been isolated from soil. This activity has been regarded as having been caused by the successive actions of the nitrile hydratase and amidase. In this instance, the corresponding amidase gene was cloned from the R. erythropolis strain and expressed in Escherichia coli cells. A soluble active form of amidase enzyme was obtained at $18^{\circ}C$. The Ni column-purified recombinant amidase was found to have a specific activity of 3.89 U/mg toward the substrate isobutyramide. The amidase was found to exhibit a higher degree of activity when used with mid-chain substrates than with short-chain ones. Put differently, amongst the various amides tested, isobutyramide and butyramide were found to be hydrolyzed the most rapidly. In addition to amidase activity, the enzyme was found to exhibit acyltransferase activity when hydroxyl amine was present. This dual activity has also been observed in other enzymes belonging to the same amidase group (E.C. 3.5.1.4). Moreover, the purified enzyme was proven to be able to enantioselectively hydrolyze 4-chloro-3-hydroxybutyramide into the corresponding acid. The e.e. value was measured to be 52% when the conversion yield was 57%. Although this e.e. value is low for direct commercial use, molecular evolution could eventually result in this amidase being used as a biocatalyst for the production of ethyl (S)-4-chloro-3-hydroxybutyrate.
These studies were carried out to obtain the basic information about transformation of ginseng plant by potential vector system, utilization of opine compound by Agrobacterium sap. , and initiation of crown gall tumor callus. Crown gall tumors were induced from stem of Panax ginseng C.A. Meyer by infection of Agrobacterium tumefaciens. Therefore, it was clarified that transformation of ginseng by Ti plasmid was possible. The crown gall tumors induced by Agrobacterium tumefaciens isolated. from the soil were different in a shape, size, and growth rate. Especially, infection of ginseng by Agrobacterium tumefaciens Y104 led to the amorphic tumor, Tumor tissue derived from stem crown gall could not be continuously cultured on the medium which did not contain phytohormone, and did not form the callus even on the medium supplemented with 2,4-D. On the other hand, the root crown gall tumors formed the calli but the formation rate of callus was quite low. As for the utilization of octopine and nopaline, it was found that 3 strains of Agrobacterium app., Y104, Y110 and C58, utilized nopaline only, Y109 utilized octopine, and Y101 failed to utilize either compound.
Journal of the Earthquake Engineering Society of Korea
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v.10
no.4
s.50
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pp.15-24
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2006
This work reports the results of our study on the dynamic response of various buried pipelines depending on their boundary conditions. We have studied behavior of the buried pipelines both along the axial and the transverse direction. The buried pipelines are modeled as beams on elastic foundation while the seismic wave as a ground displacement in the form of a sinusoidal wave. The natural frequency, its mode, and the effect of parameters have been interpreted in terms of free vibration. In order to investigate the response on the ground wave, the resulting frequency and the mode shape obtained from the free vibration have been utilized to derive the mathematical formula for the forced vibration. The natural frequency varies most significantly by the soil stiffness and the length of the buried pipelines in the case of free vibration. The effects of the propagation direction and velocity and the frequency of ground wave on the dynamic responses of concrete, steel, and FRP pipes have been analyzed and then dynamic responses depending on the type of pipes have been compared. Through performing dynamic analyser for various boundary conditions and estimation of the location of maximum strain has been estimated for the type of pipes and boundary conditions.
KSCE Journal of Civil and Environmental Engineering Research
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v.11
no.1
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pp.167-176
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1991
Finite element programs are developed, adopting the hyperbolic model and the Cam-clay model. In the hyperbolic model, a new model taking into account the volume change during shear is proposed and a new technique considering the density change underneath a footing is proposed. And a computing algorithm considered as more reasonable than existing one is presented. In the Cam-clay model, the deveoloped program is applied to sand, the case not recorded much, and then it is tried to analiza the behavior of sand from the viewpoint of the critical state concept. For this, the conventional CD triaxial compression tests and the footing model tests are carried out. The results are improved by 60 percent by using the modified hyperbolic model proposed. When the Cam-clay model is applied to sand, a model reflecting the overconsolidation effects and a computing algorithm accounting for the strain softening are needed. The results obtained by using the Cam-clay model are not much influenced by the value of the initial poisson's ratio, but those of the modified hyperbolic model are much influenced by that. So th values of the initial poisson's ratio must be selected deliberately in the numerical analysis.
Hong, Seung-Beom;Lee, Mina;Kim, Dae-Ho;Chung, Soo-Hyun;Samson, Robert A.
한국균학회소식:학술대회논문집
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2014.05a
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pp.25-25
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2014
Koji molds are comprised of yellow, black and white. Black and white koji molds were recently re-visited by this author and it is concluded that they consists of Aspergillus luchuesnsis, A. niger and A. tubingensis, and the most important species for alcoholic beverage production is A. luchuensis. In the case of yellow koji mold, it is comprised of Aspergillus oryzae, A. sojae and A. tamari. In the case of A. sojae, the species is scarcely isolated from nature and rarely used for industry in Korea. Aspergillus tamari is often isolated from traditional Korean Meju, a fermented soybean product, and the classification of the species is clear. However, in the case of A. oryzae, differentiation between A. oryzae and A. flavus is still in controversy. In this study, we collected 415 strains of Aspergillus flavus/oryzae complex from air, rice straw, soybean, corn, peanut, arable soil and Meju in Korea and we examined the aflatoxin producing capacity of the strains. The norB-cypA, omtA and aflR genes in the aflatoxin biosynthesis gene cluster were analyzed. We found that 367 strains (88.4%) belonged to non-aflatoxigenic group (Type I of norB-cypA, IB-L-B-, IC-AO, or IA-L-B- of omtA, and AO type of aflR), and only 48 strains (11.6%) belonged to aflatoxin-producible group (Type II of norB-cypA, IC-L-B+/B- or IC-L-B+ of omtA, and AF type of aflR). In the case of A. flavus/oryzae strains from Meju, almost strains (178/192, 92.7%) belonged to non-aflatoxigenic group and only 14 strains (7.3 %) belonged to aflatoxin-producible group. It is proposed in this study that non-aflatoxigenic strain from Meju is classified as A. oryzae, considering that Meju is food material.
Le, Thu M.;Fatahi, Behzad;Disfani, Mahdi;Khabbaz, Hadi
Geomechanics and Engineering
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v.8
no.4
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pp.559-594
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2015
A nonlinear creep function incorporated into the elastic visco-plastic model may describe the long-term soil deformation more accurately. However, by applying the conventional procedure, there are challenges to determine the model parameters due to limitation of suitable data points. This paper presents a numerical solution to obtain several parameters simultaneously for a nonlinear elastic visco-plastic (EVP) model using the available consolidation data. The finite difference scheme using the Crank-Nicolson procedure is applied to solve a set of coupled partial differential equations of the time dependent strain and pore water pressure dissipation. The model parameters are determined by applying the algorithm of trust-region reflective optimisation in conjunction with the finite difference solution. The proposed method utilises all available consolidation data during dissipation of the excess pore water pressure to determine the required model parameters. Moreover, the reference time in the elastic visco-plastic model can readily be adopted as a unit of time; denoting creep is included in the numerical predictions explicitly from the very first time steps. In this paper, the settlement predictions of thick soft clay layers are presented and discussed to evaluate and compare the accuracy and reliability of the proposed method against the graphical procedure to obtain the model parameters. In addition, comparison of the available experimental results to the numerical predictions confirms the accuracy of the numerical procedure.
Lim, Young Soon;kang, Soo Kyung;Kang, Eun Jung;Lee, Tae Ho
Korean Journal of Microbiology
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v.34
no.1_2
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pp.37-42
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1998
The microorganisms degrading levan were screened from soil. The isolated strain produced levanase releasing single oligosacchride from levan. The optimum cultural medium for levanase production (g/l) was composed of 0.5% levan, 0.1% $K_2HPO_4$, 0.05% NaCl, 0.3% $NaNO_3$, 0.3% yeast extract (pH 8.0). The cultivation for levanase production was carried out in 500 ml shaking flask containing 50 ml of the optimum medium at $30^{\circ}C$ on a reciprocal shaker, and the highest levanase production was observed after 54 hours of cultivation. The levanase hydrolyzed levan into single oligosaccharide. The product purified by chilled EtOH precipitation and gel filtration was detected as a single peak on HPLC analysis. The oligosaccharides formed by enzyme reaction was identified as levanheptaose (DP7) by HPLC and by ESI-MASS.
Park, Yong-Soo;Kang, Young-Jin;Lee, Kwang-Sik;Jianhong Le;Je, Yeon-Ho;Roh, Jong-Yul;Seo, Sook-Jae;Sohn, Hung-Dae;Jin, Byung-Rae
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.8
no.1
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pp.61-66
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2004
Bacillus thuringiensis 656-3 which was isolated from a soil sample of mushroom house and showed high toxicity to mushroom flies, Lycoliella mali and Coboldia fuscipes, was surveyed for insecticidal effect in the oyster mushroom house.3. thutingiensis 656-3 was mass-cultured in the fermenter containing soybean cake(2%) and wheat bran (2%) as media source. Semi-for-mutation of B. thuringiensis 656-3 was performed with metamorphic starch only. When the formulation suspension containing $5{\times}{10^7}$ cfu was sprayed on the mushroom in mushroom house, the insecticidal effect of B. thuringiensis 656-3 to mushroom flies,1. mali and C. fuscipes, was maintained over 90% by the fifth day after starting spraying. The yield of oyster mushroom house with B. thuringiensis 656-3 was significantly increased compared to control. B. thuringiensis 656-3 represents a powerful biological insecticide for the control of mushroom flies.
O, Gyeong-Taek;Ryu, In-Jae;Lee, Min-Ju;Kim, Hong-Jae;Kim, Seong-Jun;Jeong, Seon-Yong
한국생물공학회:학술대회논문집
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2001.11a
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pp.681-684
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2001
Pseudomonas sp. F721 isolated from soil produced a substance related in seeds germination inhibition. Addition of phytohormone, and GA (gibberellin acid) in the culture broth elevated production of the germination inhibition substance. The production of the substance was optimized in the culture conditions of $35^{\circ}C$, pH 9.0, 150 rpm, 48 hr, glucose 0.5% (w/v), and innoculation ratio 1.0% (v/v). The physical and chemical stability of the substance in the variety of pH ranging from 2.0 to 12.0 and from freezing to $100^{\circ}C$ were shown. The germination inhibition substance suppressed 90% of germination compared with that of the control experiment in a few days.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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