Since reactive oxygen species, prostaglandins, and nitric oxide are closely involved in various pathological conditions anti play important roles in the initiation, promotion, and progression of carcinogenesis, agents that modulate the production or activity of them might be considered as cancer chemopreventive agents. In the present study, we evaluated chemopreventive potential of some grape shoot extracts and their refined materials using various in vitro assay systems. As a result, both grape shoot extracts and refined materials possessed effective radical scavenging activities about 70~80% at the concentration of 500 ${\mu}$g/ml, and especially the Sheridan shoot extract showed the most potent 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical scavenging activity that was similar to resveratrol. In addition, refined materials from grape shoot extracts suppressed lipopolysaccharide-induced nitric oxide production in macrophage cells, anti refined materials from Kyoho and Campbell shoot extracts exhibited similar inhibitory activities with $IC_{50}$ value of 224 ${\mu}$g/ml and 285 ${\mu}$g/ml, respectively. In addition, at the concentration of 50 ${\mu}$g/ml, all of refined materials inhibited cell proliferation against various human cancer cells about 30~40% compared to control. These findings suggest that grape shoot extract and their refined materials might be useful sources for the development of chemopreventive agents and/or functional foods.
Han Bong-Hee;Suh Eun-Jung;Choi Sung-Lyeol;Yae Byeoung-Woo;Yu Hee-Ju;Goo Dae-Hoe
Journal of Plant Biotechnology
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제6권4호
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pp.241-246
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2004
The bulb scales and shoot sections ($7\;\cal{mm}\;\times\;15\;\cal{mm}$) of Lilium oriental hybrid 'Casablanca' were cultured to compare bulblet growth in vitro. Shoots were induced from in vitro grown bulbscales on MS medium with $1.0\;\cal{mg/L}\;BA,\;0.5\;\cal{mg/L}$ IAA, and 30 g/L sucrose. The regenerated shoots were cut into shoot sections, and cultured on MS medium with $2.0\;\cal{mg/L}\;BA,\;0.5\;\cal{mg/L}$ IAA and 30 g/L sucrose for shoot proliferation. Culture of shoot sections stimulated bulblet growth significantly than the bulb scales on MS medium with 60 g/L sucrose. However, the bulblets from shoot sections did not reach ideal size to produce stems with several leaves. Therefore, liquid medium was added into the same vessels to stimulate bulblet growth further. After shoot sections were cultured on MS medium with 60 g/L sucrose and 2 g/L activated charcoal for two months in dark, $20\;\cal{ml}$ liquid media containing various concentrations of sucrose and MS salts were added. Two months later, the added liquid medium stimulated bulblet growth remarkably as compared to bulblets grown without added liquid medium. The added $25\;\cal{ml}$ liquid medium containing 120 g/L sucrose and double strength of MS salts were the most effective for growth of in vitro bulblets. More than $94\%$ bulblets produced by this method sprouted stems with several leaves after cold treatment at $5^{\circ}C$ for three months.
우리나라에서 고구마 장려품종인 홍미와 신미를 액아배양시 explant의 크기 NAA, BA 및 kinetin의 농도가 기관분화와 생육에 미치는 영향을 구명하고저 본 실험을 실시하였으며 실험결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 5mm되는 explant 배양이 2mm explant 배양보다 기관분화 및 생육이 좋았으며 홍미는 MS 배양에 NAA 0.1mg/$\ell$와 kinetin 1mg/$\ell$을 조합처리할 때 신미는 MS배지에 NAA 0.1mg/$\ell$와 kinetin 1mg/$\ell$을 조합처리할 때와 kinetin 1mg/$\ell$, BA 0.1mg/$\ell$을 단독처리할 때 shoot의 분화가 좋았다. 2. 뿌리분화는 홍미와 신미가 비슷한 결과를 보였으며 NAA 0.lmg/$\ell$와 kinetin 1mg/$\ell$을 조합처이한 배지에서 뿌리수와 뿌리길이가 증가하였다. 3. BA의 농도가 증가함에 따라 비정상 식물체의 출현이 많았으며 한 개의 explant에서 여러개의 shoot의 길이가 짧았다. 4. 이차계대배양에서 shoot의 분화 및 생장은 NAA 0.1mg/$\ell$와 kinetin 1mg/$\ell$가 첨가된 배지에서 좋은 결과를 보였고 뿌리의 분화는 0.1 mg/$\ell$ BA에 첨가된 배지에서 가장 효과적이었다.
참나무류의 효율적인 기내 번식법 개발을 위하여 상수리나무 유묘와 수형목을 재료로 액아를 배양하였다. 5가지 배지 가운데 WPM 배지에서 줄기 분화 및 생장이 가장 양호하였다. 싸이토키닌중 zeatin 3.0mg/L의 농도에서 줄기 분화 및 생장에 효과를 보였으나 대체로 BAP의 처리가 다경 줄기 분화 및 생장에 주효하였다. BAP와 zeatin의 공조처리는 다경줄기 유도 및 생장에 더욱 효과가 있었으며, 적정 농도는 BAP 0.5, zeatin은 0.05-1.0mg/L이었다. 기내발근은 1/2 GD 배지에 0.5mg/L IBA 처리로 90% 이상 발근되었고 인공 배양토에서 70% 이상 활착되었다. 유령 대목에 2회 접목된 27개 수형목 클론을 재료로 시험한 결과는 4개 클론만이 기내 증식의 가능성을 보였다. 재유령화된 수형목의 기내 번식은 모수령의 영향보다는 클론간의 차이에 크게 좌우되었다. 기내 반응이 우수한 수형목 클론은 증식후 90% 이상 발근되었다. 발근배지는 염류를 반감시킨 GD배지에 IBA 0.2-2.0mg/L 처리시 주효하였다. 발근묘는 인공 배양토에 이식하여 5개월 후 60% 이상 활착되었다.
패랭이꽃속 Dianthus gratianopol 잎절편체로부터 캘러스를 유기하여 표면에 광택이 있고 치밀하게 배열되고 연한 녹색의 shoot-forming 캘러스를 선별하였다. 유기된 캘러스를 잘게 자르고 1.0 mg/L 2,4-D와 0.5 mg/L BAP가 포함된 CP 액체배지에서 7일 간격으로 계대배양하여 균일한 SF형태의 조직이 치밀한 세포괴를 얻을 수 있었고 이들 세포괴를 1.0 mg/L 2,4-D와 0.5 mg/L BAP, 1.5 mg/L 2,4-D와 0.5 mg/L BAP의 MS고체배지에서 배양했을 때 재분화능력이 있는 캘러스를 유도할 수 있었다. 이들 캘러스는 1.0mg/L TDZ과 0.5 mg/L PAA가 포함된 MS재분화배지에 치상하였더니 녹화되기 시작하여 배양 4주후부터는 다량의shoot 원기가 형성되고 shoot증식이 가능하였으며 평균 87%의 shoot 형성률을 보였다. 배양 9주후 절단된 shoot는 0.1 mg/L NAA가 첨가된 배지에서 뿌리를 형성하여 화뢰와 꽃을 갖고 있는 완전한 식물체로 재분화되었다. 또한 재분화 능력이 있는 캘러스 정단 원기를 절단한 절편체는 1.0 mg/L TDZ 과 0.5 mg/L PAA가 포함된 MS재분화 배지에서 직접 부정아를 형성하였고 이들 부정아로부터 다량의 shoot 증식이 가능하여 식물체를 효과적으로 얻을 수 있었다.
본 실험은 식물생장조절제인 TDZ, BA, TAh, IBA, zeatin, GA$_3$가 사과대목 M.25의 기내증식에 미치는 영향을 구명하기 위해서 실시하였다. 또한 시토카닌과 오옥신의 역할을 동시에 하는 것으로 알려진 potassium humate가 뿌리형성에 미치는 효과를 알아보기 위해서 몇가지 농도로 배지에 첨가했다. 생장점 배양으로부터 건전한 산소를 얻기 위해서 BA, TDB, zeatin을 단독으로 기본배지에 첨가한 결과, zeatin 1.0 mg/L 첨가한 배지에서 100% 생존을을 나타냈고 신초생장 또한 양정하였다. 생장점 배양을 통해서 얻은 신초의 증식을 위해서 여러 종류의 생장조절제를 다양한 농도로 처리했을때 NAA 0.5 + TDZ 0.2 mg/L이 첨가된 배지에서 증식된 신소재가 평균 12.1개로 증식율이 가장 높았다. 형성된 신초로부터 발근유도는 IBA 0.6 mg/L이 첨가된 배지에서 가장 효과적이었다. 이러한 발근유도 배지에 potassium humate 250 mg/L이 첨가된 처리구에서 발근율과 부정근 돈는 IBA 0.5 mg/L 단독 처리구보다 각각 30%와 350% 이상 증가되었다.
An efficient, rapid and large-scale in vitro clonal propagation of agronomically important Indian cereal crop genotypes (NSH27 & K5) of Sorghum bicolor (L.) Moench. by enhanced shoot proliferation in shoot tip segments was designed. MS medium fortified with plant growth regulators and coconut water markedly influenced in vitro propagation of Sorghum bicolor. In vitro plantlet production system has been investigated on Murashige and Skoog (MS) medium with the synergistic combination of 6-benzyladenine ($22.2\;{\mu}M$), kinetin ($4.6\;{\mu}M$), adenine sulphate ($2.8\;{\mu}M$), 5% coconut water and 3% sucrose which promoted the maximum number of shoots as well as beneficial shoot length. Subculturing of shoot tip segments on a similar medium enabled continuous production of more than 100 healthy shoots with similar frequency. When the healthy shoot clumps were cultured on MS medium fortified with 6-benzyladenine ($22.2\;{\mu}M$), kinetin ($4.6\;{\mu}M$), adenine sulphate ($2.8\;{\mu}M$), ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid ($2.7\;{\mu}M$), ascorbic acid ($30.0\;{\mu}M$) and 5% coconut water, a rapid production of axillary and adventitious buds was developed after 8 wk culture. More than 300 shoots were produced 10 wk after culture. Rooting was highest (100%) on half strength MS medium containing 22.8 mM IAA. Micropropagated plants established in garden soil, farmyard soil and sand (2:1:1) were uniform and identical to the donor plant with respect to growth characteristics. These plants grew normally without showing any traits.
우리나라 자생식물인 산호수 (Ardisia pusilla DC)를 기내에서 대량증식하기 위하여 초대배양으로 산호수 경정을 MS, 1/2MS 배지에 BA와 TDZ의 농도를 달리하여 첨가된 배지에 치상하여 배양하였다. 무기염류를 달리한 배지와 생장조절물질 농도를 다르게 한 배지 중 1/2MS 배지에 BA 0.5mL가 첨가된 배지가 신초 수 7개 이상으로 증식이 양호하여 산호수의 초대배양에 적정배지로 나타났다. TDZ를 첨가한 배지에서는 캘러스형성이 과다하여 부정아 형성을 오히려 방해하여 BA 첨가배지보다 신초증식이 양호하지 못하였다. 신초의 증식을 위해 1/2 MS 배지에 BA 0.5 mg와 sucrose의 농도를 달리하여 첨가한 결과, sucrose 농도 20 g/L를 첨가한 배지에서 신초의 증식, 생장 및 다아체 형성이 양호하였다. 형성된 신초의 발근은 1/2MS 배지에 IBA, NAA를 각각 첨가한 배지를 사용하였는데 두 가지 옥신류에서 0.5 mg의 농도에서 신초의 생장과 발근이 양호하였다. 잎과 뿌리가 잘 발달한 유식물체를 원예용 상토에 옮겨 키웠을 때 모든 개체가 정상적인 형태로 성장하였다.
목본류 생리학 연구에 있어서 중요한 수종인 Peace 포플러의 기초 연구자료를 얻고자 본 실험을 실시하였다. 액아 마디를 BA 0.2 mg/L처리된 MS 배지에 배양하여 shoot의 증식시 나타나는 과수화 된 shoot를 정상 shoot와 비교하였다. 과수화 된 shoot는 진한 녹색을 띠고, 잎은 두껍고 휘어져 있으며 투명하였다. 또 줄기는 정상적인 줄기보다 두껍고 길이가 짧았다. 조직학적 관찰 결과 과수화 된 잎은 책상조직의 발달이 부진하였으며 정상적인 잎에 비하여 책상조직과 해면조직 그리고 표피 세포 모두 불규칙하고 세포간극의 크기가 큰 것으로 나타났다. 또한 과수화 된 잎의 기공은 크기가 커서 단위면적 당 밀도가 낮았으며 공변세포와 그 주변 세포들이 변형되어 있었다. 과수화된 shoot의 직경은 정상적인 것보다 큰 것으로 나타났는데 이것은 피층과 수층 세포의 비대에 따른 것으로 관찰되었다. 한편 과수화 된 줄기는 정상 줄기에 비해 목질화 발달이 미약하여 형성층 구별이 어려웠다.
This study was conducted to evaluate the effect of thidazuron(TDZ) on shoot proliferation and growth from axillary buds of 20-years-old Corylopsis coreana. Shoots proliferation was effectively achieved on WPM(Woody Plant Medium) supplemented with 0.03∼0.1mg/L TDZ. The highest shoot number(6.5$\pm$0.7) was obtained on 0.1mg/L TDZ treatment. On the TDZ medium shoots formed as clusters less than 1cm in height and therefore needed to subculture on GA$_{3}$ containing medium to induce elongation. In consecutive cultures, phenolic compounds were excreted at the proximal part of the explants and inhibited growth of the explants. Growth inhibition by the compounds was overcome using liquid and paper bridge culture system. About 60% of the elongated shoots rooted on half- strength MS medium containing IBA. Generally, IBA was mire effective on in vitro rooting than NAA with optimal range of 0.5mg/L to 1.0mg/L. Rooted plantlets were transferred in an artificial soil(vermculite) and acclimatized in high humidity greenhouse condition. Survival rate differed greatly depending on rooting types of the explants. Two types of rooting were observed. The first type was direct rooting from the explants. The second type was callus formation followed by rooting from the callus. The explants showing the 1st type rooting survived can be multiplicated in vitro by TDZ treatment followed by elongation with GA$_{3}$ and rooting with IBA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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