To improve the growth of mouse hybridoma 2c3.1 secreting anti-Hepatitis B surface antigen monoclonal antibody (anti-HBsAg MAb), we had constructed an enriched medium and observed the effects of fetal bovine serum and serum-free supplements including human serum albumin, 'insulin and transferrin', and monoethanolamine. For further enhancement of growth, the concentrations of two major energy sources, glucose and glutamine, were strengthened with various ratios in the enriched medium. Maximum cell growth and monoclonal antibody production obtained in various ratios of glucose/glutamine with an inoculation concentration of 2$\times$105 cells/ml were 0.73$\times$106-4.62$\times$106 cells/ml and 65.1-422.6 $\mu\textrm{g}$/ml, respectively. Glutamine was round to be a major energy source and a limiting nutrient in comparison to glucose for 2c3.1 cell cultivation in enriched media with low serum.
Background: Total thyroidectomy and postoperative radiodiodine ablation therapy in differentiated thyroid carcinomas enhance the reliability of serum thyroglobulin(Tg) levels and radioiodine scan in detecting recurrence or distant metastasis. There have been, however, some limitations in using these methods under certain conditions. Recently, several reports have indicated that thyroid peroxidase(TPO) could be used as an alternative tumor marker. We aimed to estimate the significance of serum TPO levels in differentiated thyroid carcinoma. Materials and Methods: Forty-eight patients who had undergone total thyroidectomy due to papillary thyroid carcinomas and who had been followed-up for at least 3 years were classified into two groups: 27 patients without any evidence of recurrence in group 1; and 20 patients with recurrence or distant metastasis in group 2. All patients were examined by radioiodine scans. Serum Tg, TSH, antithyroglobulin antibody, and TPO were measured and the relationships were statistically analyzed. The sensitivity and specificity of $^{131}I$ scan, serum Tg, and serum TPO were evaluated. Results: Serum Tg levels were $3.81{\pm}5.16ng/mL$ in group 1 and $147.02{\pm}193.75ng/mL$ in group 2. Only 2 patients in group 1 showed Tg levels exceeding 10ng/mL. In contrast, 4 patients in group 2 were under 10ng/mL. Serum antithyroglobulin antibody and TSH levels showed no statistical difference between the two groups. In group 1, 16 patients showed negative serum TPO results, and 4 patients in group 2 showed negative results. There was no correlation among serum Tg levels, antithyroglobulin antibody titers, and serum TPO levels in each group. In group 2, 4 patients with negative serum Tg levels showed positive TPO results and positive whole body scans. Two cases with false negative $^{131}I$ scans showed positive serum TPO and Tg results. In 4 cases showing false negative serum TPO levels, serum Tg levels and $^{131}I$ scans were positive. Conclusion: Serum Tg levels, radioiodine scans, and serum TPO levels can be clinically used as complementary methods in the diagnosis of recurrent or metastatic thyroid carcinomas. Serum TPO levels may be helpful when other methods fail to detect recurrences or distant metastasis in highly suspected patients.
Most progesterone enzyme immunoassays(EIA) are used liquid phase double-antibody separation. These methods consume considerable time and reagents because of the requirements for several washing and centrifugation steps involving the reactants. Because of there several problems, we were prompted to develop an effective EIA system by the use of higher titer of progesterone antiserum free of anti-bovine serum albumin antibodies (anti-BSA). The results obtained were as follows. 1. The antibody of progesterone antiserum was high as $1.5{\times}10^5$. 2. Percent activity bound of progesterone antiserum was about 77 at a dilution to $5{\times}10^3$ times. 3. Progesterone antiserum was contained a large amount of anti-BSA antibodies. 4. The anti-BSA was completely absorbed by using of polymerised BSA. 5. The molecular weight of albumin polymer (polymerised BSA) obtained by using 2.5% glut. araldehyde was $5{\times}10^5$.
Phage antibody 생산방법은 유전자 조작에 의하여 phage coat에 항체를 발현시키는 방법이며 그 library를 이용하여 일반 hybridoma 방법에 의해 항체를 생산하기 어려운 성분 (예: 독성물질, 면역화가 잘 안되는 물질 등) 에 대해 적용할 수 있는 장점을 제공한다. 본 연구진은 Griffin.1 antibody library의 positive control을 통해 phage 표면에 항체가 발현되는 지의 여부를 ELISA test를 통하여 확인하였다. 또한 human serum albumin을 모델분석물질로 사용하여 $1{\sim}4$차까지의 bio-panning 을 실시하였고 각 단계에서 증폭된 phage를 가지고 ELISA test를 한 결과 신호가 점진적으로 증가하는 data를 얻을 수 있었다. 이것을 통해 phage library로부터 특정 항원에 대한 monoclonal antibody를 생산할 수 있다는 사실을 검증하였다.
Serum samples were collected from 100 breeders and their progeny 600 broilers. The breeders and broilers were vaccinated against infectious bronchitis(IB), infectious bursal disease(IBD) and Newcastle disease(ND) viruses according to general vaccination program. The antibodies in serum samples against IB, IBD and ND viruses were detected by ELISA using commercial ELISA kit. Geometric mean titer(GMT) of ELISA was monitored from 1-day-old to 35-day-old broilers and compared to that of breeder chickens. The GMT of ELISA to IB, IBD and ND was declined half level of the day old broiler's antibody titers at about 4, 9 and 4 days of age. The GMT of ELISA to IB, IBD and ND was declined than that of protective antibody titer at about 12, 11, and 15 days of age. Thereafter, the GMT of ELISA to IB, ND were declined and disappeared according to age of broilers. The GMT of ELISA to IBD was declined according to age of broilers, but at 25 days of age increased and 31 days of age increased than that of protective antibody titer. Taken together, these studies led to conclusion that time-course of antibody titers of broilers from vaccinated breeders and that of progeny broliers which vaccinated according to vaccine program. Those are very important data to design vaccine program to breeders and broilers.
The indirect fluorescent antibody(IFA) test was used to detect serum IgG and IgM antibodies to Trichomonas vaginalis in 31 vaginal trichomoniasis, 7 candidiasis and in 20 non-infected healthy women with antigen prepared from axonic culture of Trichomenas vaginalis isolated from vulvovaginitis patient. The results were as follows: 1. In 31 vaginal trichomoniasis the positive reactions of IgG antibody were 27 in the 1/8 dilution or higher and :l in the 1/4 dilution whereas in healthy women the reaction showed significantly low as in the 1/4 dilution or below. 2. The sensitivity and specificity of IFA test for IgG antibody to trichomonad antigen in this study were 87.1% and 100%, respectively. 3. No significant difference of IgM antibody levels between vaginal trichomoniasis and healthy women was observed. 4. No relation between the levels of IgG and IsM antibodies to trichomonad antigen by IFA test was observed. 5. No relation between the time lapse and the level of serum IgG antibodies in IFA test of vaginal trichomoniasis was regarded. In conclusion the present study suggests that IFA test in trichomoniasis could be a useful tool for detection of anti-trichomonad IgG antibodies and applicable as an immunodiagnostic method.
Toxoplasma gondii이 약독주인 Beverley주, Fukaya주 띤 MR49주를 각각 감염시킨 BALB/c 마우스에서 발현되는 세포매개 성 및 체액성 면역반응을 비교 관찰할 목적으로 매주 1회씩 10주에 걸쳐 각각 3마리씩 취하여, 소정의 과정을 거쳐 준비한 비장세포에 concanavalin A(Con. A), lipopolysaccharide(LPS) 및 Toxoplasma Iysate를 처리한 후 아세포화 반응의 정도를[3H]-thymidine의 전입량으로 측정, 평가하는 한편, 혈청내 IgG 및 IgM 항체가를 효소결합면역흡착법 (ELISA)으로 측정, 분석하였다. Con. A 및 Toxoplasma Iysate로 처리시 비장세포의 아세포화 반응은 3개주 감염군 모두 대조군에 비해 감염후 1주부터 유의하게 감소되었으나, LPS로 처리시 3개 주 감염군 모두 대조군에 비해 유의한 차이가 없었다 또한 각 주별 감염 마우스 상호간에도 유의 한 차이가 없었다. 혈청내 IgG 항체가는 3개주 감염군 모두 감염후 2주부터 7주까지 계속적으로 증가한 후 그 항체가가 지속되었으며, IgM 항체가는 1주에서 4주 사이에 현저히 높았다. 그러나 카 주별 감염 마우스의 혈청내 IgG 및 IgM 항체가 상호간에는 유의한 차이가 없었다. 이상의 성적으로 보아 T. gondii의 Beverley주, Fukaya주 및 ME49주를 각각 감염시킨 마우스에 있어 감염 초기에는 세포매개성 면역반응이 억제되며, 체액성 면역반응에 있어 IgM 항체는 감염 초기에 증가하였고 IgG 항체는 초기부터 높은 수준으로 장기간 지속됨을 알 수 있었다.
Park, Se Jin;Han, Sung Sik;Anvarov, Khikmat;Khajibaev, Abdukhakim;Choi, Min-Ho;Hong, Sung-Tae
Parasites, Hosts and Diseases
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제53권6호
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pp.699-703
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2015
Cystic echinococcosis (CE) is one of the most widespread zoonotic helminthiases, which can last an asymptomatic infection for several years. The purpose of this study was to demonstrate serum antibody prevalence of CE among asymptomatic people in Uzbekistan using ELISA. A total of 2,547 serum samples were collected, 66 from confirmed CE patients and 2,481 of patients with other diseases than CE at a hospital in Tashkent, Uzbekistan. The serum samples were screened for CE specific IgG antibodies by ELISA using cystic fluid antigen obtained from sheep. The serum antibody positive rate was 89.4% (59/66) in CE and 3.6% (89/2,481) in other disease patients. The present ELISA recognized 89.4% sensitivity and 96.4% specificity. The ELISA absorbance of positive samples was distributed 0.271-0.971 for CE and 0.273-0.887 for other disease patients. The other disease patients with high absorbance over 0.3 were 50 (2.0%) who were presumed to be active CE patients. The patients in their 40s showed the highest positive rate of 5.2% (P=0.181), and women were 4.4% while men were 3.1% positive (P=0.136). The data confirmed that there are many asymptomatic patients of CE in Tashkent. It is indicated that CE is an endemic disease of public health importance in Uzbekistan.
Toxoplasma증의 혈청학적 진단에 있어서 민감도를 증가시키기 위해 간접 latex 응집반응의 결과와 비교하면서 ELISA를 개발하였으며, 뇌척수액의 검사 시료로서의 가능성을 검토하였다. 아울러 중추신경계 질환환자로부 터기생충질환을 감별하기 위하여 1986년부터 1991년까지 전국 카 병원에서 채취한 혈청과 뇌척수액에 대하여 간접 latex 응집반응(ILA)과 ELISA를 실시하여 Toxoplasma 항체 보유 양상을 비교 검토하였다. 전체 2,016 건의 혈청에 대해 ILA를 실시하여 76건(3.8%)의 양성 (1:32이상의 titer)을 얻었다. 그러나 양성 혈청환자에서 채취한 뇌척수액에서는 낮은 titer의 반응은 있었으나 양성은 나타나지 않았다. 이들 양성 혈청의 양성 혈청 및 음성 혈청에 대하여 ELISA로 항체검사를 실시한바 ILA의 titer가 1 : 32인 군에서 통계적으로 유의한 차이를 나타내는 항체값을 얻었으며, 그 흡반도는 0.40이었다. 뇌척수액에 대한 ELISA로는 ILA의 1 : 64 titer군에서 통계 적으로 유의한 차이가 나타났고 그때의 흡광도 0.27을 양성 판단의 기준으로 사용하였다. ELISA에 의한 항체 검사상 전체 혈청에서 7.0%의 양성을 검출하여 ILA보다 약 2배 정도의 높은 민감도를 보였으며, 뇌척수액에서 는 5.6%의 양성률을 보여 ELISA는 뇌척수액에서의 항체 검출시 유용한 방법이라고 판단하였다. ILA에 비하여 ELISA는 약 2배 정도 높은 양성률을 내었고 양성률은 나이에 마라 40대 이후 급격한 증가를 보였으며, 여성보 다는 남성에서 약 2배 정도 양성률이 높게 나타났다. ELISA에 의한 뇌척수액의 항체 검사에서는 양성률의 성별 차이를 나타내지 않았다. 이상의 결과로 판단할 때, ELISA가 ILA보다 Toxoplasma 항체 검출의 민감도가 높았으며, 뇌척수액은 ELISA의 좋은 검사시료가 되며, 특히 중추신경계 Tocxoplnsma증의 진단에 있어 뇌척수액에 대한 항체 검사에서 ELISA가 유용하다고 판단하였다.
Coxiella burnetii (C burnetii) is the causative agent of Q fever in animal and human. The distribution of the disease has been documented around world. In this study we developed the competitive enzyme linked immunosorbent assay(cELISA) and compared it with indirect immunofluorescent assay(IFA). A monoclonal antibody(Mab) against C burnetii and a peroxidase-conjugated anti-mouse IgM were used as an indicator system competing against antibody in animal serum or as an indicater of the absence of antibody. Sera were considered antibody positive when the percentage inhibition index(PI index) is upper than 30. PI index is calculated as 100-[sample OD/Mab OD)${\times}100$]. Among 162 bovine serum samples, 23 samples were antibody positive both in cELISA and IFA. And 156 samples showed same results. From goat with experimentally induced infection with C burnetii the antibody was detected 20 days early in cELISA compared to IFA. On the basis of present findings, it was demonstrated that cELISA is a reliable diagnostic method for The detection of specific antibodies against C burnetii infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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