Kim, Jae-Myung;Lee, Mun-Han;Lee, Hang;Ryu, Pan-Dong;Cho, Myung-Haing;Park, Jong-Myung
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.9
no.3
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pp.123-131
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1994
An enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was developed for the detection of residual gentamicin(GM) in edible animal products. The immunogen(GM-KLH conjugate) and coating antigen(GM-BSA conjugate) were prepared by coupling GM sulfate to keyhole limpet hemocyanin(KLH) and bovine serum albumin(BSA) in the presence of 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride, respectively. Polyclonal antibody to GM was produced in rabbits(New Zealand White, female) by using the immunogen and the antibody titer was measured by indirect ELISA. A competitive ELISA was developed using GM-bovine serum albumin conjugate as a coating antigen, GM(as standards or sample), polyclonal antibody to GM, secondary antibody conjugated with horseradish peroxidase as an enzyme, and H2O2 and o-phenylenediamine dihydrochloride as a substrate and a chromophore, respectively. The detection limit of GM was 10 ng/ml and the standard curve of GM(n=26) was linear up to 10 $\mu\textrm{g}$/ml in this competitive ELISA system. There were no cross-reactivities of the partially purified antibody between GM and the various antibiotice such as amikacin, benzyl-penicillin, chloramphenicol, erythromycin, furazlidone, kanamycin, neomycin, oleandomycin, streptomycin, sulfathiazole and thiamphenicol(CR50<0.05%)
There were outbreaks of canine distemper in Korea from the late 1990's to the early 2000's even though modified live CDV vaccines had been used as the same way as before. The present study was undertaken to investigate the levels of neutralizing antibodies in the Korean dog population, and the factors associated with the levels, with special reference to the vaccination history of the dogs. A total of 772 serum samples were from clinically healthy dogs with over one year old throughout the Korea from January 2003 to April 2004. Details on the sex, breed, age, vaccination status and disease histories were recorded. The level of neutralizing antibodies titer was determined with a modified version of the microneutralization test. Titers over 16 were classified as protective CDV antibody titers. The overall rate of adult dogs with protective antibody titers was 96.0%. The dogs with protective antibody titers varied depending on age, sex, rearing environment and vaccination status. Because the majority of healthy adult dogs in Korea had adequate serum antibody titers against CDV and the immunity provided by the vaccinations is claimed to last for several years, annual revaccination protocol for CDV in adult dogs should be reconsidered.
To investigate the effect of ginseng saponin fractions (total saponin, diol saponin and triol saponin) on the antibody production and on the recovery of immunosuppression in mouse, chick ${\gamma}$-globulin was used as immunogen and CY(cyclophosphamide) as immunosuppressive drug. The effect of ginseng saponin fractions on the production of total serum protein was investigated also. Circulating antibody was measured with ELISA method. Total saponin, dial saponin and triol saponin resulted 4 times higher titer values compared to control group in the production of antibody but resulted no effect on the recovery of immunosuppression induced by CY. From the above results ginseng saponin fractions are believed to effect on intact immune system and to promote antibody production by helping the cooperations among lymphocytes or the growth of lymphocytes. And the increase of total serum protein has no direct relations with the increase of circulatory antibody.
To develop zearalenone-specific monoclonal antibodies, hybridoma cells were produced by fusion of myeloma cells $(P3{\times}63Ag\;V653)$ and spleen cells from BALB/c female mice immunized with zearalenone-oxime coupled to bovine serum albumin (BSA). After screening of antibody titer of them with a sandwich type enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), 5 hybridomas which could produced monoclonal antibodies with a high affinity for zearalenone were selected. The monoclonal antibody produced by Z-2-M26 hybridoma exhibited the high sensitivity to zearalenone and a little cross-reactivity to ${\alpha}-zearalenol$ (11%), but did not react with ${\beta}-zearalenol,\;{\alpha}-zearalenol,\;{\beta}-zearalenol$ and DON. In conclusion, the developed monoclonal antibody appeared to be a very promising immunoreagent for the future development of a specific and sensitive quantitative ELISA for zearalenone.
This experiment was carried out to develope the production of specific yolk antibody from laying hens immunized with antigens from Salmonella enteritidis. Antigenic protein isolated from the flagella of Salmonella enteritidis, determined by SDS-PAGE, was pure and has a molecular mass of approximately 54.6 kDa. It was observed that the antibody titers both in egg yolk and serum were performed at 2 weeks after immunization with flagella antigen to the laying hen. And the level was increased gradually to 6 weeks after immunization. At the time of 6 weeks, the antibody titer of yolk showed higher than that of serum. According to the results of specificity test(ELISA), the yolk antibody did not react with different bacterial strains(S. choleraesuis, ETEC Kl2:K99, K88,987P), but reacted only with S. enteritidis strain. The contents of immunoglobulin(IgY) in an egg yolk was 106mg approximately. By the isolation procedure of IgY from the egg yolk, 88.3 percent of IgY content was recovered in this study.
To investigate epidemological sitution of bovine viral diarrhea infection, serological survey in cattle being raised in Young Dong province were conducted. Bovine sera collected ramdomly from August 1990 to December 1990 were tested for bovine viral diarrhea virus serum neutralizing antibody titers. The results were as follows 1. BVDV SN antibody levels were considerably varies and positive rate was 58(108 heads out of 186) 2. BVDV SN antibodies to breeds of cattle was various and positive rates showed that diary cattle, beef, native cattle(Korean) were 67.52%, 59.38%, 27.00% respectively followed in that order. 3. In the regional prevalence of BVD SN antibodies in cattle, Alpine(92%) was the highest, Young Dong south(59%) middle(44%), and North 30% followed in that order 4. In the age relatated prevalence of BVD SN antibodies, the younger than 6 month old group was the highest 65.7%, and older than 25 month old group was also at 62.2%. Then, 7 to 12 moth old group and 13 to 24 month old group showed to 58.5%, 52.1% respectively. 5. The geometric mean titer (log2) of 108 cattle serum samples showing positive BVD SN antibodies was 4.3. 6. In the geometric mean titer(log2) according to age, younger than 6 month old group (5.2) was the highest, then 7 to 12 month old group 2.8(SD=1.94 standard deviation) was lowliest.
Guk, Sang-Mee;Chai, Jong-Yil;Shin, Yung-Oh;Seo, Min
Parasites, Hosts and Diseases
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v.46
no.2
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pp.71-75
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2008
The diagnosis of cryptosporidiosis has been carried out using coprologic techniques in the Republic of Korea. However, antibody responses to Cryptosporidium have rarely been studied. Serum antibodies from HIV-positive/oocyst-positive Korean patients recognized significantly 31 and 27 kDa antigens, and HIV-negative/oocyst-positive individuals clearly reacted to 15/17 kDa antigens. Compared with oocyst-positive cases, 18.7% and 75.8% of sera from HIV-positive patients reacted to 31 and 27 kDa antigens. Only 11.1% of HIV-negative individuals reacted to 15/17 kDa. Based on these findings, serum antibody responses were different between HIV-positive and HIV-negative individuals infected with Cryptosporidium, and it is suggested that HIV-positive patients are more frequently exposed to C. parvum compared to HIV-negative individuals.
An assay system by using antibody was adopted to screen the endoinulinase producingfungi due to its high specificity toward endoinulinase, To determine whether the affinity-purified rabbit serum, which were generated against the purified endoinulinase, can react only with the endoinulinase, rocket immunoelectrophoresis was performed. The results showed that the serum specifically reacts with endoinulinase but not with exoinulinase and other proteins in the culture media. Using this polyclonal antibody, a strain from 62 fungal colonies was selected and it secreted an endoinulinase in the culture media to the amount comparable to that of Aspergillus ficuum A Tee 16882 known as a high endoinulinase producer.
Kim, Mujo;Shinji Higashiguchi;Yoshitomo Iwamoto;Yang, Han-Chul;Cho, hong-Yon;Hsjime Hatta
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.5
no.2
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pp.79-83
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2000
A han transfers her serum immunoglobulin G to the agg (IgY) and gives immunity to her offspring. Therefore, The hen agg can be an effective supplier of a large amount of antigen specific antibody that accumulates in the egg yolk. Antigen specific antibody has been widely used for immunological analysis in the field of diagnosis as well as pure scientific research. The production and separation technology of IgY is demonstrated in the present study.
Lee Woo-Chang;Lim Sang-Soo;Choi Bum-Kyoo;Choi Jeong-Woo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.8
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pp.1216-1221
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2006
A protein array was fabricated for a miniaturized immunoassay using microcontact printing ($\mu$CP). A polydimethylsiloxane (PDMS) stamp with a 5 $\mu$m$\times$5 /$\mu$m dimension was molded from a silicon master developed by photolithography. Under optimal fabrication conditions, including the baking, incubation, and exposure time, a silicon master was successfully fabricated with a definite aspect ratio. An antibody fragment was utilized as the ink for the $\mu$CP, and transferred to an Au substrate because of the Au-thiol (-SH) interaction. The immobilization and antibody-antigen interaction were investigated with fluorescence microscopy. When human serum albumin (HSA) was applied to the protein array fabricated with an antibody against HSA, the detection limit was 100 pg/ml of HSA when using a secondary antibody labeled with a fluorescence tag. The fabricated protein array maintained its activity for 14 days.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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