To evaluate the diagnostic accuracy of two commercial ELISA tests (Allied- and CSL-ELISA) for the diagnosis of Mycobacterium paratuberculosis in cattle, Meta-analysis using English language papers published during 1990-2001 was performed. Diagnostic odds ratios (DOR) were analyzed using regression analysis together with summary receiver operating characteristic (ROC) curves. The difference in diagnostic performance between the two ELISA systems was evaluated by using linear regression. Publication bias was assessed by funnel plot and linear regression. The pooled sensitivity and specificity were 44% (95% CI, 38 to 51) and 98% (95% CI, 96 to 99) for the random-effect model. The DOR between studies was heterogeneous. The area under the fitted ROC curve (AUC) was 0.72 for the unweighted and 0.77 for the weighted model. Maximum joint sensitivity and specificity for the unweighted and weighted model from their summary ROC curve were 70% and 75%, respectively. Based on the fitted model, at a specificity of 95%, sensitivity was estimated to be 52% for the unweighted and 57% for the weighted model. From the final multivariable model study characteristic, the country was the only significant variable with an explained component variance of 13.3%. There were no significant differences in discriminatory power, sensitivity, and specificity between the two ELISA tests. The overall diagnostic accuracy of two commercial ELISA tests was moderate, as judged by the AUC, maximum joint sensitivity and specificity, and estimates from the fitted model and clinical usefulness of the tests for screening program is limited because of low sensitivity and heterogeneous of DOR. It is, therefore, recommended to use ELISA tests as a parallel testing with other diagnostic tests together to increase test sensitivity in the screening program.
Demerdash, Zeinab;Mohamed, Salwa;Hendawy, Mohamed;Rabia, Ibrahim;Attia, Mohy;Shaker, Zeinab;Diab, Tarek M.
Parasites, Hosts and Diseases
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제51권1호
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pp.93-98
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2013
A field applicable diagnostic technique, the dipstick assay, was evaluated for its sensitivity and specificity in diagnosing human Schistosoma mansoni infection. A monoclonal antibody (mAb) against S. mansoni adult worm tegumental antigen (AWTA) was employed in dipstick and sandwich ELISA for detection of circulating schistosome antigen (CSA) in both serum and urine samples. Based on clinical and parasitological examinations, 60 S. mansoni-infected patients, 30 patients infected with parasites other than schistosomiasis, and 30 uninfected healthy individuals were selected. The sensitivity and specificity of dipstick assay in urine samples were 86.7% and 90.0%, respectively, compared to 90.0% sensitivity and 91.7% specificity of sandwich ELISA. In serum samples, the sensitivity and specificity were 88.3% and 91.7% for dipstick assay vs. 91.7% and 95.0% for sandwich ELISA, respectively. The diagnostic efficacy of dipstick assay in urine and serum samples was 88.3% and 90.0%, while it was 90.8% and 93.3% for sandwich ELISA, respectively. The diagnostic indices of dipstick assay and ELISA either in serum or in urine were statistically comparable (P>0.05). In conclusion, the dipstick assay offers an alternative simple, rapid, non-invasive technique in detecting CSA or complement to stool examinations especially in field studies.
The objective of the present study was to investigate the use of fluid released from muscle samples as an alternative to serum for ELISA to detect classical swine fever(CSF) virus antibodies in slaughter pigs. The optimal correspondence between serum 1:20 OD values and muscle fluid OD values was achieved at a muscle fluid dilution of 1:2. Significant correlation was found between serum and neck muscle ELISA ($r_s=0.880$, p<0.0001, ${\kappa}=0.82$; specificity of 97.0% and sensitivity 90.6%). The semimembranous muscle showed similar correlation in CSF ELISA($r_s=0.877$, p<0.0001, ${\kappa}=0.75$; specificity of 94.1% and sensitivity 89.1%). High correlation was obtained between serum and mesenteric lymph node in the CSF ELISA ($r_s=0.937$, p<0.0001, ${\kappa}=0.87$; specificity of 97.1% and sensitivity 93.0%). Measmement agreement between serum ELISA and muscle fluid ELISA was calculated and expressed as limits of agreement. The correspondence of ELISA of serum and muscle fluid indicated limits of agreement. Above 95% of all muscle fluid values were distributed within this limits of agreement. Among the samples used for ELISA for detecting CSFV antibodies, mesenteric lymph node had the most correlation and agreement with serum ELISA. F-test for comparison of variances showed no significant difference between the serum and muscle fluid. In conclusion, muscle fluid is a useful postmortem alternative to serum to detect CSFV antibodies.
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed to detect rotavirus antigen in fecal samples using VP6-specific monoclonal antibody(2B12). The ELISA for rotavirus antigen detection found to have specificity to all bovine and porcine rotaviruses tested but not to bovine viral diarrhea virus and bovine coronavirus. The ELISA appeared to have similar sensitivity and specificity compared to fluorescence antibody assay(FA) and electropherotyping (PAGE).
Soluble antigens from an axenic culture of Entamoeba histolytica were used to develop a commercial ELISA kit to quantify anti-E. histolytica antibodies in sera of patients with extraintestinal amebiasis in non-endemic settings. The diagnostic specificity and sensitivity of the test were assessed retrospectively using 131 human serum samples with amoebic serologic status available. They were selected according to their results in immunofluorescence (IFAT) and were separated in 2 sample categories: 64 sera with positive results by IFAT and 67 with negative results by IFAT. The sensitivity and specificity of the ELISA kit were assessed at 95.0% and 94.0% compared to the IFAT. The test can be useful to exclude a potential diagnosis of amebiasis and could be used as a screening method since ELISA is an automated technique.
An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using purified hemagglutinin of swine influenza virus (H1N1) as antigen was developed for detection of antibody to avian influenza virus (AIV). The sensitivity and specificity of a developed and commercial available ELISA kits were compared with those of agar gel precipitation (AGP) test and hemagglutination inhibition (HI) test using sera collected from chickens under condition of field exposure. The concentration of antigen, serum dilution and concentration of enzyme-conjugated secondary antibody in developed ELISA (S-ELISA) were 0.5ug/100ul, 1:200 and 0.03ug/100ul, respectively. The correlation coefficients between S-ELISA and commercial ELISA and HI titers were 0.419 and 0.533, respectively. A significant correlation (p < 0.01) was not found between HI and ELISA titers. The S-ELISA was found to be as more sensitive and specific than the AGP test, showing 86.8% sensitivity and 85.3% specificity. It is suggested that the ELISA using the SIV as antigen may be useful method as an investigating tool for AIV serological surveillance.
The diagnosis of swine sarcoptic mange (Sarcoptes scabiei var. suis) was investigated by ELISA in order to replace current diagnostic methods such as skin scraping, scratching index, or lesion score of dermatitis. The current methods need many efforts and much times and cost much. They can not handle many samples simultaneously. Therefore, in this research we developed ELISA that can handle many samples at a time. The antigens of swine sarcoptic mite were isolated and examined by 12.5% SDS-PAGE and silver staining. The antigenicity of antigen was confirmed by Western blotting using the swine from the artificailly-infested swine with swine sarcoptic mite. The optical density (OD) values of the artificailly-infested positive sera and the naturally-infested positive sera of sows were measured and read in order to confirm the stability of antigens, the reproducibility and validity (sensitivity and specificity) of the manufactured ELISA of swine sarcoptic antigens. In above results, the developed ELISA would be possible to use the diagnostic tool of sarcoptic mange if OD values of piglets, fattening pigs and sows are interpreted reasonably and classified as mange-free and infested.
Kim, Jae-Seok;Lee, Su-Kyung;Ko, Dae-Hyun;Hyun, Jungwon;Kim, Hyun Soo
Annals of Laboratory Medicine
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제39권1호
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pp.50-57
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2019
Background: The Automated Fluorescent Immunoassay System (AFIAS) rotavirus assay (Boditech Med Inc., Chuncheon, Korea) is a new rapid antigen test for rotavirus detection. We evaluated the performance of this assay for detecting rotaviruses and their specific genotypes in clinical stool samples. Methods: AFIAS rotavirus assay was performed in 103 rotavirus-positive and 103 rotavirus-negative stool samples (confirmed by both PCR and ELISA), and its results were compared with those of PCR, ELISA, and immunochromatographic assay (ICA). We evaluated diagnostic sensitivity/specificity, the detectability of rotavirus subtypes, lower limit of detection (LLOD), reproducibility, cross-reactivity, and interference of AFIAS rotavirus assay. Results: Based on PCR and ELISA results, diagnostic sensitivity and specificity of the AFIAS rotavirus assay were both 99.0%. LLOD results showed that the AFIAS assay had sensitivity similar to or greater than ICA and ELISA. High reproducibility was confirmed, and no cross-reactivity or interference was detected. This assay could detect genotypes G1P[8], G2P[4], G3P[8], G4P[6], G4P[8], G8P[4], G8P[8], G9P[4], and G9P[8]. Conclusions: The AFIAS rotavirus assay showed high reproducibility, sensitivity, and specificity as well as excellent agreement with ELISA, PCR, and ICA. It detected the most common as well as unusual genotypes of rotavirus prevalent in Korea. It could be a useful onsite assay for rapid, convenient, and cost-effective detection of rotavirus infection.
The mature domain of a cysteine protease of Spirometra erinacei plerocercoid larva (i.e., sparganum) was expressed in Escherichia coli, and its value as an antigen for the serodiagnosis of sparganosis was investigated. The recombinant protein (rSepCp-1) has the molecular weight of 23.4 kDa, and strongly reacted with the sparganum positive human or mice sera but not with negative sera by immunoblotting. ELISA with rSepCp-1 protein or sparganum crude antigen (SeC) was evaluated for the serodiagnosis of sparganosis using patient's sera. The sensitivity and specificity of ELISA using rSepCp-1 protein were 95.0% (19/20) and 99.1% (111/112), respectively. In contrast, the sensitivity and specificity of ELISA with SeC were 100% (20/20) and 96.4% (108/112), respectively. Moreover, in experimentally infected mice, the sensitivity and specificity of both ELISA assays were 100% for the detection of anti-sparganum IgG. It is suggested that the rSepCp-1 protein-based ELISA could provide a highly sensitive and specific assay for the diagnosis of sparganosis.
More than 20 years after the first report of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) in Korea, the disease is still having major impact on domestic pig health and relevant industries. Although ELISA tests are commonly used by veterinarians to guide herd management, data on diagnostic performance of the test in field settings are very limited. The objective of this study was to evaluate two commercially available PRRSV ELISA (IDEXX PRRS X3 ELISA and Bionote PRRSV ELISA 4.0) to detect antibodies against PRRSV on serum samples. To this end, a total of 1,108 sera were recruited from 35 swine farms located in Gyeonggi province and tested at the Gyeonggi Province Veterinary Service Center. All tests were performed according to the manufacturer's instructions, by laboratory technicians who routinely perform PRRS testing on blood samples. Samples were collected from two sources of swine populations with different PRRS prevalence; 60 samples (5.4%) were originated from breeding farms and the remaining 1,048 samples (94.6%) were from farrow-to-finish farms. We applied Bayesian latent class model (LCM) for two-tests in the two-population when the accuracy of the gold standard is not available. The model estimated that Bionote ELISA was a bit more specific but slightly less sensitive. The estimated sensitivity and specificity of the IDEXX ELISA were 99.8% (95% CI 98.1-100%) and 86.4% (95% CI 81.4-96.5%), respectively. Sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value for Bionote kit were 98.7% (95% CI 92.8-100%), 89.8% (95% CI 86.2-93.1%), 93.8% (95% CI 91.5-96.0%), and 97.8% (95% CI 87.1-100%), respectively. Based on the Bayesian 95% credible intervals, the sensitivity and specificity of the two ELISAs were not significantly different each other when assuming that two kits were imperfect, indicating that two kits performed equally well in terms of sensitivity and specificity in our filed setting.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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