식물 및 동물성 단백질 유래 펩타이드 형태의 단백질 가수 분해물들은 항산화, 고혈압 완화, 면역조절, 진통완화 및 항균작용 등 생리활성이 있는 것으로 알려져 왔다. 본 연구는 연산오계란 단백질 가수 분해물을 Ultrafiltration를 이용하여 HDS(분획되지 않은 가수 분해물), 1 kDa, 5 kDa, 10 kDa, 50 kDa로 분획된 기능성 펩타이드의 DPPH radical scavenging activity, superoxide anion radical scavenging activity, hydroxyl radical scavenging activity 및 $Fe^{2+}$ chelation ability을 평가하였다. 그 결과 DPPH radical scavenging activity 최대값은 1 kDa(70.83 %), hydroxyl radical scavenging activity 최대값은 5 kDa (47.01 %), superoxide anion radical scavenging activity 최대값은 5 kDa(40.57 %), $Fe^{2+}$ chelation ability 최대값은 5 kDa(29.87 %)로 나타났다. Ultrafiltration를 이용하여 fractionation된 단백질 가수 분해물의 항산화 저해 능력 $IC_{50}$ 평가하였다. 그 결과 HDS의 최대값은 superoxide anion radical scavenging activity($IC_{50}$, 5.42 mg/ml)이고, 1 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 1.67 mg/ml)이고, 5 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 2.09 mg/ml)이고, 10 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 2.61 mg/ml)이고, 50 kDa의 최대값은 $Fe^{2+}$ chelation ability($IC_{50}$, 4.53 mg/ml)이다. 그러므로 본 연구 결과를 바탕으로 5 kDa를 이용하여 오계란 단백질에서 분획한 펩타이드는 항산화 기능성 식품소재로서 활용할 가치가 높을 것으로 기대한다.
유용생리활성의 해조류를 이용한 식품소재 개발 연구의 일환으로, 35종 해조류(갈조류 17종, 홍조류 11종 및 녹조류 7종)의 메탄올 추출물을 대상으로 in-vitro 항산화 및 nitrite 소거활성을 평가하였다. 해조류 추출물($500\;{\mu}g/ml$) 중 감태, 곰피, 대황, 넓패, 패, 모자반, 알송이모자반, 야마자모자반 및 잘피의 9종에서 60% 이상의 DSA 활성을 나타내었으며, ASA활성은 DSA활성과 높은 상관관계를 나타내었다(상관계수 0.855). 환원력 평가 결과에서는 감태, 곰피 및 대황의 3종만이 0.88 ($Abs_{700}$) 이상의 강력한 활성을 나타내었다. 한편 식품에서의 발암인자인 nitrosoamine생성억제와 관련된 NSA평가의 경우, 전체 35종의 해조류 중 19종에서 60% 이상의 NSA를 나타내었으며, 특히 기존에 알려지지 않은 모자반, 야마다모자반, 알송이모자반, 패, 넓패에서 우수한 활성을 확인하였다. 1차 선별된 9종 해조류의 DSA, ASA, NSA의 $IC_{50}$를 조사한 결과, 기존의 항산화능이 알려진 곰피, 대황, 감태 이외에도 야마다모자반 및 넓패에서 강력한 항산화 활성과 nitrite 소거활성을 확인하였다. 본 연구결과는 야마다 모자반 및 넓패를 이용하여 항혈전, 항산화, NSA 활성을 동시에 나타내는 기능성 식품소재로의 개발이 가능함을 제시하고 있다.
제주재래종 감귤류 10종에 대해서 수확시기별 총 폴리페놀 함량과 활성산소종 소거활성 변화를 조사하였다. 총 폴리페놀 함량은 지각과 홍귤이 미숙과인 8월 하순과 9월 하순에 200 mg% 내외로 가장 높았고 대부분의 감귤종이 수확시기가 늦어질수록 감소하는 경향을 보였다. 수확시기별 감귤과피의 superoxide anion radical 소거활성은 홍귤과 지각에서 60% 이상으로 가장 높았고 사두감이 가장 낮은 활성을 보였으며 홍귤과 지각을 제외한 감귤류의 수확시기별 차이는 크지 않았다. Hydrogen peroxide 소거활성은 8월 하순에 사두감이 73.8%로 가장 높은 소거활성을 나타내었고 그 다음에 지각이 거의 70%의 소거활성을 보였으며, 대부분의 감귤종이 수확시기가 늦어질수록 감소하는 경향을 보였다. Hydroxy radical 소거활성은 대부분의 재래감귤종의 과피에서 비교적 높은 활성을 보였으며 지각과 당유자가 8월 하순에 각각 75.1%와 74.6%로 가장 높은 소거활성을 보였고, 그 외 감귤종도 60% 이상의 소거능을 보였으며 수확시기별 차이는 거의 없었다. 감귤이 성숙됨에 따라 hydrogen peroxide 소거능, superoxide anion 라디칼 소거능은 감소하는 경향을 보이나 nitric oxide 라디칼 소거활성은 증가하는 추세를 보였고, 병귤이 58.4%로 가장 활성이 높았으며 다른 활성산소종에서 활성이 높았던 사두감, 지각, 당유자가 활성이 가장 낮았다. 본 실험결과 제주재래종 감귤 중 특히 지각이 대부분의 활성산소종에 높은 소거활성을 보였으며, 이에 대한 구체적인 연구가 진행될 필요성이 있을 것으로 판단된다.
Hygrophila auriculata (K. Schum.) Heine is a wild herb commonly found in moist places on the banks of tanks, ditches and paddy fields throughout India and is one of the main sources of Ayurvedic 'Rasayana' drug. The free radical scavenging potential of 50% aqueous alcoholic extract of H. auriculata (HAEt) was studied for DPPH scavenging activity, nitric oxide, hydroxyl radical and ferryl bipyridyl complex scavenging activity along with lipid peroxidation and total antioxidant capacity inhibition using Thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) in rat liver homogenate. Integral antioxidative capacity was determined by photochemiluminescence assay. HAEt showed good radical scavenging activity at various concentrations $(200-1000\;{\mu}g/ml)$ against 1,1 diphenyl, 2-picrylhydrazyl (DPPH) (32.32-77.02%) with moderate scavenging activity against Nitric oxide (12.46-52.84%), hydroxyl radical (11.69-55.26%), ferryl bipyridyl complex (17.66-58.67%) and lipid peroxidation (0.829-0.416nmoles/mg protein). The above results indicate HAEt to be very effective antioxidant. It was suggested that the varied therapeutic activities claimed for the plant in the Indian indigenous systems of medicine may be in the part due to the free radical scavenging and/ or potent antioxidant activity.
The optimization and microwave assisted extraction of stem bark of Terminalia arjuna, quantitative estimation of the marker compounds arjunic acid and arjunolic acid using HPTLC and the evaluation of free radical scavenging activity has been performed in this study. The central composite design was used for optimization and the values of parameters for optimized batch of microwave assisted extraction were 1000 W (Power), 3 minutes (Time) and 1/120 (Solid/solvent ratio). The solvent system to carry out the HPTLC was toluene: acetic acid: ethyl acetate (5: 5: 0.5) and quantitative estimation was done using standard equations obtained from the marker compounds. The in-vitro free radical scavenging activity was performed spectrophotometrically using ascorbic acid as standard. The value of estimated percentage yield of arjunic acid and arjunolic acid was 1.42% and 1.52% which upon experimentation was obtained as 1.38% and 1.51% respectively. The DPPH assay of the different batches of microwave assisted extraction and marker compounds taken suggested that the marker compounds arjunic acid and the arjunolic acid were responsible for the free radical scavenging activity as the batch having the maximum percentage yield of the marker compounds showed best free radical scavenging effect as compared to standard ascorbic acid. The $IC_{50}$ value of the optimized batch was found to be 24.72 while that of the standard ascorbic acid was 29.83. Hence, the yield of arjunic acid and arjunolic acid has direct correlation with the free radical scavenging activity of stem bark extract of Terminalia arjuna and have potential to serve as active lead compounds for free radical scavenging activity.
Effects of root, stem and leaf extract of sancho (Zanthoxylum schinifolium) on the inhibition of lipid peroxidation in the hepatic microsome of rat, DPPH radical scavenging activity and activated partial thromboplastin times (APTT) were examined in vitro. The highest inhibition of hepatic microsomal lipid peroxidation was observed by ethyl acetate fraction than that of methylene chloride fraction of the root and stem extracts. The high inhibition of lipid peroxidation was determined in the leaf, the root and the stem in order. The DPPH radical scavenging activity of ethyl acetate fraction was higher than that of n-butanol fraction and it was similar to the root and the steam extract. It was similar to the inhibition of hepatic microsomal lipid peroxidation. The DPPH radical scavenging activity was the highest in 2.500mg/mL of ethyl acetate fraction and it was 4.4 fold higher than that of $\alpha-tocopherol$, as an antioxidant standard. The DPPH radical scavenging activity was dependent on the extract concentration in the range of 0.125-5.000 mg/mL. The throm-boplastin times were higher than that of n-butanol fraction and it was similar to the root and the steam extracts. The leaf extract showed the highest antithrombogenic effect followed by the stem and then the root extract. The activated partial thromboplastin times were ependent on the extract concentration in the range of 0.100-2.000 mg/mL. Consequently, the effects of antioxidative, DPPH radical scavenging activity and antithrombogenic of Z. schinifolium was observed due to the inhibition of lipid peroxidation and the DPPH radical scavenging activity by methylene chloride, n-butanol and ethyl acetate fraction of the leaf extract. (Korean J Nutrition 38(5): 386 - 394, 2005)
본 연구에서는 된장의 기능성 중에서 대두, 메주, 된장의 발효과정을 거치는 동안 항산화 효과와 아질산염 소거 효과의 변화 추이를 고찰하기 위해 DPPH radical 소거능과 아질산염 소거능을 통한 된장의 활성을 시험하였다. 대두, 메주 및 된장은 methanol extract를 계통 추출법에 의거하여 여러 가지 용매를 사용하여 분획하였으며, 각 분획에 대한 활성실험을 행하였다. MeOH ext.로 본 항산화 효과는 된장〉메주〉대두의 순으로 나타났고, 메주와 대두 간의 효과의 차는 거의 없었다. 아질산염 소거효과는 된장〉대두〉메주의 순을 보였고, 래디칼 소거능보다 아질산염 소거능이 더 효과적으로 나타났다. Ethyl acetate 분획에 있어 항산화 효과가 켰으며, 특히 아질산염의 소거 효과는 L-ascorbic acid의 효과를 상회하였다.이에 된장의 ethyl acetate 분획을 반복 정제하여 genis-tin, daidzein, genistein을 분리하였으며, 이는 된장의 항산화 및 아질산염 소거 효과를 나타내는 활성 물질들은 대두중의 페놀성물질에서 크게 벗어나지 않음을 알 수 있었다.
Objectives : Peroxynitrite($ONOO^-$), formed from the reaction of $O2^-$ and NO, is a cytotoxic species that can oxidize several cellular components such as proteins, lipids and DNA. It has been involved in the aging process and age-related diseases such as Alzheimer's disease, rheumatoid arthritis, cancer and atherosclerosis. The aim of this study was to investigate scavenging activities of $ONOO^-$ and its precursors, NO and $O_{2^-}$ and its scavenging mechanism of Zingiberis Rhizoma (ZR). Methods : To investigate scavenging activities of $ONOO^-,\;NO,\;O_{2^-}$ and its scavenging mechanism, we used fluorescent probes like DCFDA, DAF-2 and DHR 123. The $ONOO^-$ scavenging activity on ZR was assayed by measuring oxidized dihydrorhodamine 123 (DHR 123) by fluorometry. The scavenging efficacy was expressed as IC50, showing the concentration of each sample that is required to cause 50% inhibition of DHR 123 oxidation. In a separate study, the protective effect of ZR on $ONOO^-$-induced nitration of bovine serum albumin was investigated through immuno-assay with a monoclonal anti-nitryrosine antibody, and a horseradish peroxidase-conjugated anti-mouse secondary antibody from sheep. Results : ZR markedly scavenged authentic $ONOO^-,\;O_{2^-}$ and NO. It also inhibited $ONOO^-$ induced by $O_{2^-}$ and NO which are derived from SIN-1. The data demonstrated that ZR led to decreased $ONOO^-$ mediated nitration of tyrosine through electron donation. It also inhibited the nitration of bovine serum albumin induced by $ONOO^-$ in a dose-dependent manner. Furtheremore, it blocked LPS-induced ROS and RNS generation. Conclusions : These results suggest that ZR can be developed as an effective $ONOO^-$ scavenger for the prevention of aging process and age-related diseases.
삼채뿌리와 잎이 가진 기능성 식품소재로서의 활용도를 높이고자 다양한 생리활성을 평가하였다. 삼채뿌리의 조사포닌, 폴리페놀, 플라보노이드 함량은 각각 4.28 mg/g, 18.27 mg/g, 0.95 mg/g, 삼채잎의 조사포닌, 폴리페놀, 플라보노이드 함량은 각각 4.17mg/g, 35.91 mg/g, 2.79 mg/g으로 나타났다. 삼채뿌리 및 잎 부위의 70% 에탄올 추출물의 DPPH 라디칼 소거능 $IC_{50}$으로 23.01 mg/mL, 4.82 mg/mL로 나타났으며, hydroxyl radical 소거능 $IC_{50}$ 값이 각각 40.82 mg/mL, 27.24 mg/mL를 나타났다. ${\alpha}$-Amylase 저해 활성은 삼채뿌리 및 잎 부위 에탄올 추출물 10 mg/mL를 처리했을 때 억제활성이 각각 61.38%, 61.01%로 나타났다. 삼채뿌리 및 잎 부위의 아질산염 소거능을 측정한 결과, 삼채추출물의 농도가 증가함에 따라 그 활성 역시 증가하는 경향으로 나타났다. 이상의 결과로 삼채뿌리보다는 삼채잎 부위에 항산화 및 항당뇨 활성이 나타났으며, 삼채잎을 활용한 식품 소재로써 개발할 가치가 매우 높은 것으로 판단된다.
To optimize the hydrolysis conditions in the production of antioxidant hydrolysates from tuna cooking juice concentrate (TC) to maximize the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, TC containing 48.91% protein was hydrolyzed with Alcalase 2.4 L, and response surface methodology (RSM) was applied. The optimum hydrolysis conditions included a 2.2% (w/v) Alcalase concentration and 281 min hydrolysis time, resulting in the highest DPPH radical scavenging activity of 66.49% (0.98 µmol Trolox/mg protein). The analysis of variance for RSM showed that hydrolysis time was an important factor that significantly affected the process (p < 0.05). The effects of different drying methods (freeze drying, hot air drying, and vacuum drying) on the DPPH radical scavenging activity and amino acid (AA) profiles of TC hydrolysate (TCH) were evaluated. Vacuum-dried TCH (VD) exhibited an increase in DPPH radical scavenging activity of 81.28% (1.20 µmol Trolox/mg protein). The VD samples were further fractionated by ultrafiltration. The AA profiles and antioxidant activities in terms of the DPPH radical scavenging activity, 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline)-6-sulfonic acid (ABTS) radical scavenging activity, ferric reducing antioxidant power, and ferrous ion chelating activity were investigated. Glutamic acid, glycine, arginine, and cysteine were the major AAs found in the TCH fractions. The highest DPPH radical scavenging activity was found in the VD-1 fraction (< 5 kDa). The VD-3 fraction (> 10 kDa) exhibited the highest ABTS radical scavenging activity and ferric reducing antioxidant power. The ferrous ion chelating activity was the highest in VD-1 and VD-2 (5 to 10 kDa). In conclusion, this study provided the optimal conditions to obtain high antioxidant activities through TCH production, and these conditions could provide a basis for the future application of TCH as a functional food ingredient.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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