순수용매와 혼합용매를 사용한 상전이를 통하여 poly(L-lactic acid) (PLLA) 스캐폴드 막을 제조하였다. 순수용매로서 chloroform과 1,4-dioxane을 사용하였으며, 이들 순수용매를 혼합하여 혼합용매를 제조하였다. 스캐폴드 막의 모폴로지, 기계적 특성 그리고, 물질전달 특성을 각각 SEM, 인장강도실험 및 당 확산실험을 통하여 측정, 평가하였다. 순수 chloroform 용매를 사용한 용액으로부터는 격벽-공극 구조(solid-wall pore structure)의 스캐폴드 막이 제조되었다. 반면, 순수 1,4-dioxane 용매를 사용한 용액으로부터는 나노섬유 구조의 스캐폴드 막이 제조되었다. 혼합용매의 경우 용매 내의 조성이 변화하면서 다양한 구조의 스캐폴드 막이 제조되었다. 혼합용매 내 1,4-dioxane 함량이 20% 이하인 경우에는 격벽-공극 구조의 스캐폴드 막이 제조되었으며, 1,4-dioxane 함량이 20%인 경우에는 최대직경 $100{\mu}m$의 거대공극을 갖는 구조를 보였다. 1,4-dioxane 함량이 25% 이상인 구간에서는 나노섬유 구조의 스캐폴드 막이 제조되었다. 이 구간에서는 혼합용매 내 1,4 dioxane 함량이 변화함에 따라 나노섬유의 직경이 함께 변화하였다. 나노섬유의 최소직경은 15 nm 가량이었으며, 혼합용매 내의 1,4-dioxane 함량이 80 wt%일 때에 얻어졌다. 이상의 결과를 통하여 용매의 조성은 스캐폴드 막의 구조를 결정짓는 중요한 요소가 된다는 결론을 얻을 수 있었다.
상전이 과정을 통하여 poly(L-lactic acid) 재질의 다공성 스캐폴드 막을 제조하였다. 비용매로는 에탄올을 사용하였고, 용매로서 chloroform, dichloromethane 및 1,4-dioxane을 사용하였으며, 제조한 스캐폴드 막의 모폴로지와 기계적 강도 및 물질전달 특성은 각각 SEM, 인장강도실험 및 당 확산실험을 통하여 측정, 평가하였다. chloroform을 용매로 사용한 스캐폴드 막과 dichloromethane을 용매로 사용한 스캐폴드 막은 서로 유사한 모폴로지와 기계적 특성을 보였다. 이들 스캐폴드 막은 공극 직경 $3-10{\mu}m$의 다공성 스펀지 구조를 보였으며, 범위 50-80%의 공극률을 보였다. 1,4-dioxane 용매의 용액으로부터 제조된 스캐폴드 막은 공극률 80% 이상의 나노섬유 형태를 보였다. 캐스팅 용액 내의 고분자 함량이 4% 이하로 낮추었을 때에는 나노섬유 구조의 바탕에 수십 ${/mu}m$의 거대 공극이 존재하는 높은 공극률(90%)을 갖는 스캐폴드 막이 얻어졌다. 이러한 결과를 통하여 스캐폴드 막의 구조에 대하여 용매는 중요한 효과를 미치며, 상전이 과정에서 용매선택과 캐스팅 용액의 농도 조절을 통하여 다양한 구조의 스캐폴드 막을 제조할 수 있다는 결론을 도출하였다.
Shin, Seung-Woo;Pyo, Sung-Woon;Bae, Sun-Sook;Lee, Pil-Woo;Heo, Hyun-A;Lee, Won
Journal of Korean Dental Science
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제4권2호
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pp.39-45
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2011
Purpose: The goal of this research is to find the role of collagen membrane, which can reduce physical damage, as a scaffold for possible alternative to the corticotomy which causes Regional Acceleratory Phenomenon (RAP). Materials and Methods: The experiments were carried out on 12 New Zealand white rabbits, approximately 3.5 kg in bodyweight. We made an incision on the skin of the mandibular border and applied 37% phosphoric acid and collagen membrane to the mandibular bone surface of the first group (experimental group), and only phosphoric acid to the second group (control group). After 3 days, 1 week, and 2 weeks, 4 rabbits each were sacrificed and specimens were obtained. Each specimen was stained by H&E and Tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), and histological changes were observed by light microscope. Results: The demineralization of the experimental group was weak compared to the control group. It also showed a gradual increase of demineralization (after 3 days, 1 week, and 2 weeks) and the control group showed more extensive demineralization than the experimental group. Conclusion: This study demonstrates the amount of demineralization as a result of using phosphoric acid, and as time went by, demineralization increased. The absorbable collagen membrane was used as a scaffold to increase bone demineralization effect and prevent dispersion to adjacent tissues, but rather the amount of bone demineralization decreased. Therefore, the role of collagen membrane as a scaffold for RAP was weak.
Purpose: Increased bone regeneration has been achieved through the use of stem cells in combination with graft material. However, the survival of transplanted stem cells remains a major concern. The purpose of this study was to evaluate the viability of transplanted mesenchymal stem cells (MSCs) at an early time point (24 hours) based on the type and form of the scaffold used, including type I collagen membrane and synthetic bone. Methods: The stem cells were obtained from the periosteum of the otherwise healthy dental patients. Four symmetrical circular defects measuring 6 mm in diameter were made in New Zealand white rabbits using a trephine drill. The defects were grafted with 1) synthetic bone (${\beta}$-tricalcium phosphate/hydroxyapatite [${\beta}-TCP/HA$]) and $1{\times}10^5MSCs$, 2) collagen membrane and $1{\times}10^5MSCs$, 3) ${\beta}-TCP/HA+collagen$ membrane and $1{\times}10^5MSCs$, or 4) ${\beta}-TCP/HA$, a chipped collagen membrane and $1{\times}10^5MSCs$. Cellular viability and the cell migration rate were analyzed. Results: Cells were easily separated from the collagen membrane, but not from synthetic bone. The number of stem cells attached to synthetic bone in groups 1, 3, and 4 seemed to be similar. Cellular viability in group 2 was significantly higher than in the other groups (P<0.05). The cell migration rate was highest in group 2, but this difference was not statistically significant (P>0.05). Conclusions: This study showed that stem cells can be applied when a membrane is used as a scaffold under no or minimal pressure. When space maintenance is needed, stem cells can be loaded onto synthetic bone with a chipped membrane to enhance the survival rate.
Cell proliferation is tightly controlled by the cell-cycle regulatory proteins, primarily by cyclins and cyclin-dependent kinases (CDKs) in the $G_1$ phase. The ankyrin repeat-rich membrane spanning (ARMS) scaffold protein, also known as kinase D-interacting substrate of 220 kDa (Kidins 220), has been previously identified as a prominent downstream target of neurotrophin and ephrin receptors. Many studies have reported that ARMS/Kidins220 acts as a major signaling platform in organizing the signaling complex to regulate various cellular responses in the nervous and vascular systems. However, the role of ARMS/Kidins220 in cell proliferation and cell-cycle progression has never been investigated. Here we report that knockdown of ARMS/Kidins220 inhibits mouse neuroblastoma cell proliferation by inducing slowdown of cell cycle in the $G_1$ phase. This effect is mediated by the upregulation of a CDK inhibitor p21, which causes the decrease in cyclin D1 and CDK4 protein levels and subsequent reduction of pRb hyperphosphorylation. Our results suggest a new role of ARMS/Kidins220 as a signaling platform to regulate tumor cell proliferation in response to the extracellular stimuli.
The objectives of this study were to prepare a new artificial eardrum patch using water-insoluble chitosan for healing the tympanic membrane perforations and to investigate biomechanical properties and cyotoxicity of the chitosan patch scaffold (CPS). Tensile strength and elongation at the rupture point of CPSs were 2.49-74.05 MPa and 0.11-107.06%, respectively. As the biomechanical properties or CPSs varied with the concentration of chitosan and glycerol, the proper conditions for the CPS were found out. SEM analysis showed very smooth and uniform surface of CPSs without pores at x1000. The result of MTT test showed that CPSs had no cytotoxicity.
본 논문은 인공 진피와 조직공학용 scaffold로 이용하기 위해 다공성 membrane로서 gelatin-based sponge의 효율성을 연구하였다. 불용성의 다공성 membrane은 1-ethyl-(3-3dimethylaminopropyl)carbodiimide(EDC)로 가교하여 제조하였다. Fourier-transformed infrared (FT-IR) spectroscopy, scanning electron microscopy(SEM) 그리고 Instron analysis로 다공성 membrane의 특성을 조사하였다. 다공성 membrane은 용적당 큰 표면적을 제공하는 micro porous한 구조를 가지고 있다. Gelatin/hyaluronic acid (HA) membrane의 공경크기는 40~200$\mu\textrm{m}$이다. HA의 첨가는 다공성 membrane의 기계적 강도와 세포부착능력에 영향을 미쳤다. Gelatin/HA 다공성 membrane의 압축강도는 collagen과 비슷하며, 세포배양과 인공진피 transplantation에 있어서의 충분한 기계적 강도를 가지고 있다. Fibroblasts를 함유한 진피기질을 제조하기 위해 직경 8mm의 다공성 membran에 4$\times$10(sup)5cells/membrane의 세포밀도로 fibroblast를 배양하였다. GH91 porous membrane에서의 fibroblast 부착성은 GH55 porous membrane에서보다 우수하였다. 삼차원 구조의 gelatin/HA membrane matrix에서의 fibroblast의 배양은 생체내 조건과 유사한 생리적 환경을 제공하였다.
Background Locoregional stem cell delivery is very important for increasing the efficiency of cell therapy. Amnisite BA (Amnisite) is a freeze-dried amniotic membrane harvested from bovine placenta. The objective of this study was to investigate the retention of cells of the stromal vascular fraction (SVF) on Amnisite and to determine the effects of cell-loaded Amnisite in a porcine radiation-induced chronic wound model. Methods Initially, experiments were conducted to find the most suitable hydration and incubation conditions for the attachment of SVF cells extracted from pig fat to Amnisite. Before seeding, SVFs were labeled with PKH67. The SVF cell-loaded Amnisite (group S), Amnisite only (group A), and polyurethane foam (group C) were applied to treat radiation-induced chronic wounds in a porcine model. Biopsy was performed at 10, 14, and 21 days post-operation for histological analysis. Results Retaining the SVF on Amnisite required 30 minutes for hydration and 1 hour for incubation. A PKH67 fluorescence study showed that Amnisite successfully delivered the SVF to the wounds. In histological analysis, group S showed increased re-epithelialization and revascularization with decreased inflammation at 10 days post-operation. Conclusions SVFs had acceptable adherence on hydrated Amnisite, with successful cell delivery to a radiation-induced chronic wound model.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제30권1호
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pp.17-24
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2004
The purpose of this study was to evaluate the stability and efficacy of biologic membrane made of freeze-dried cartilage as a barrier to facilitate guided bone regeneration in experimental non-healing bone defects in the rat mandible. Nine adult Sprague-Dawley rats (400-500g) were used in experiment. 5.0mm in diameter were created on the mandibular angle area by means of slow-speed trephine drill. In microscopic examination, dynamic immature bone forming at 2 weeks and its calcification at 4 weeks were observed. The membrane made of lyophilized cartilage taken from human costal cartilage seems to be very effective for guided bone regeneration as a biologic membrane and the scaffold for attachment of cells or local drug delivery system of growth factor, which may meet the ideal requirement of a barrier membrane and graft materials.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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