• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제33권2호
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• pp.225-246
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• 2003

Recent study on the enamel matrix derivatives explained on the effects of new bone and new attachment formation in infrabony pocket of periodontal defects. The purpose of this study was to investigate on the biological effects of enamel matrix derivatives to attachment, proliferation and activation of periodontal ligament and osteoblast cells, After treatment of osteoblast and PDL cells with various Emdogain concentration level(0.03${\mu}g$/ml, 3${\mu}g$/ml, 300${\mu}g$/ml), activation of osteogenetic factor, calcified nodule formation and measuring alkaline phosphatase activity(ALP) were performed. 1. Both osteoblast and PDL cell showed increasing initial cell attachment with 300${\mu}g$/ml Emdogain concentration. 2. At the level of 300${\mu}g$/ml, accelerated proliferation of oseoblast and PDL cell was appeared. 3. As Emdogain's concentration increased, increased ALP activation of osteoblast was shown. In case of PDL cell, Emdogain increased ALP activation prominently at the level of 300${\mu}g$/ml. 4. No statistically significant activating change were founded at all of the concentrations of Emdogain on the activating of transcript factor Runx2 for differentiating osteoblast. 5. At the level of 300${\mu}g$/ml, calcified nodule formation was increased prominently to compare with other concentration. These results indicated that Emdogain should activate initial attachment, proliferation and activation, but not on Runx2 activation and can be used for useful tool of the treatment of periodontal tissue regeneration.

• 대한구강악안면병리학회지
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• 제42권6호
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• pp.189-198
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• 2018

A 31 years old female had been suffered from a bony swelling in right premolar region of the mandible for 12 years, recently grown rapidly. A fistula tract developed on the right anterior mandibular border, but the lesion was relatively asymptomatic. In the radiological examination, the tumor mass was irregularly mixed with radiolucent and radiopaque areas, forming multiple cystic spaces. Under the diagnosis of calcifying odontogenic cyst, the mandibular mass was resected and examined pathologically. After decalcification, the dissected tumor mass showed multiple small cystic spaces and calcifying fibrous tissue, mimicking calcifying odontogenic cyst or ameloblastoma. Histological observation showed many calcifying cementoid materials and ossifying trabeculae. The cystic spaces were turned out to be dilated vascular channels lined by endothelial cells, containing plasma fluid. However, the main lesion was diagnosed as cemento-ossifying fibroma (COF), and the atypical vascular channels were greatly dilated and gradually expanded the whole tumor mass. The present COF was examined through immunohistochemical (IHC) array, and investigated for tumor cell characteristics, exhibiting abnormal ossification and aneurysmal cystic changes. IHC array disclosed that the tumor cells grew progressively in the lack of apoptosis, and that they showed lower expression of RUNX2 than BMP-2, RANKL, and OPG, and increases of protein expression in $HIF-1{\alpha}$, VEGF-A, and CMG2. These data suggested that the reduced expression of RUNX2, osteoblast differentiation factor, be relevant to abnormal ossification of COF, and that the consistent expressions of angiogenesis factors be relevant to de novo angiogenesis in COF, subsequently resulted in aneurysmal cystic changes.

• 한국자원식물학회:학술대회논문집
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• 한국자원식물학회 2020년도 춘계학술대회
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• pp.90-90
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• 2020

Panax ginseng C.A. Meyer (P. ginseng) is known to exert a wide range of pharmacological effects both in vitro and in vivo. Although studies on ginsenoside, antioxidant activity, and anticancer effect of wild simulated ginseng (WSG) have been conducted, there is little research on the effect of WSG on bone metabolism. In this study, we investigated the potential anti-osteoporotic properties of WSG on the growth and differentiation of MC3T3-E1 cells. WSG significantly increased the viability and proliferation of MC3T3-E1 cells. WSG activated intracellular alkaline phosphatase (ALP) activity in MC3T3-E1 cells. In addition, WSG increased the mineralized nodules in MC3T3-E1 cells. Furthermore, WSG increased the expression of genes such as Runx2, ALP, OPN and OCN associated with osteoblast growth and differentiation in a dose-dependent manner.

• Molecules and Cells
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• 제46권10호
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• pp.592-610
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• 2023

The Hippo kinase cascade functions as a central hub that relays input from the "outside world" of the cell and translates it into specific cellular responses by regulating the activity of Yes-associated protein 1 (YAP1). How Hippo translates input from the extracellular signals into specific intracellular responses remains unclear. Here, we show that transforming growth factor β (TGFβ)-activated TAK1 activates LATS1/2, which then phosphorylates YAP1. Phosphorylated YAP1 (p-YAP1) associates with RUNX3, but not with TEAD4, to form a TGFβ-stimulated restriction (R)-point-associated complex which activates target chromatin loci in the nucleus. Soon after, p-YAP1 is exported to the cytoplasm. Attenuation of TGFβ signaling results in re-localization of unphosphorylated YAP1 to the nucleus, where it forms a YAP1/TEAD4/SMAD3/AP1/p300 complex. The TGFβ-stimulated spatiotemporal dynamics of YAP1 are abrogated in many cancer cells. These results identify a new pathway that integrates TGFβ signals and the Hippo pathway (TGFβ→TAK1→LATS1/2→YAP1 cascade) with a novel dynamic nuclear role for p-YAP1.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제55권6호
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• pp.617-629
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• 2022

본 연구는 속단으로부터 단일 화합물로 분리한 Hed의 조골세포 활성 효능과 작용 기전 규명을 위해 수행되었다. Hed는 MC3T3-E1 세포의 증식과 ALP 효소 활성을 자극하여 세포외 기질에 인산과 칼슘 이온 침착을 증가시켰다. Hed는 BMP-2/Smad 신호 전달 경로를 활성화하여 Runx2, ALP, OPN 및 ProCOL의 mRNA와 단백질 발현을 유의하게 증가시켜 조골세포의 성숙과 분화를 유도하였다. 따라서 본 연구결과 Hed는 조골세포 활성 효능을 가진 것으로 판단되며 항골다공증 기능성 소재로의 개발 가능성을 확인하였다.

• 생명과학회지
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• 제26권3호
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• pp.331-337
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• 2016

섬유모세포성장인자-23(fibroblast growth factor 23, FGF23)은 뼈를 형성하는 세포에서 주로 생성되지만 그 작용은 신장에서 이루어진다. FGF23은 신장의 나트륨-인산염 공동수송체(Na-phosphate cotransporter)를 억제하여 인산염 재흡수를 감소시킨다. 이렇게 함으로써 인산염 항상성을 조절하는 작용과는 별개로 이것은 in vivo에서 뼈 형성을 억제하는 것으로 알려져 있다. 두개골 조골세포를 이용한 연구에서도 FGF23은 조골세포의 발달, 즉 분화 및 기질의 광화(mineralization)에 악영향을 미쳤다. 본 연구는 FGF23이 골수 유래 간엽줄기세포에서 조골세포로의 발달에 있어서도 유사한 영향을 줄 것인지를 조사한 것이다. 간엽줄기세포주인 D1 세포를 β-glycerophosphate, ascorbic acid, dexamethazone이 포함된 조골배(osteogenic medium)에 배양하여 alkaline phosphatase (Alp) 염색으로 분화를, Alizarin red 염색과 기질의 칼슘 함량의 분석을 통해 광화를 평가하였다. 분화 촉진 유전자인 Runx2, osteocalcin, Alp와 광화 억제 유전자인 Enpp1, Ank의 발현은 RT-PCR로 분석하였다. D1 세포의 증식과 조골세포로의 분화는 생리학적 농도를 훨씬 초과하는 FGF23의 농도에 의해서도 달라지지 않았다. FGF23 처치 1주, 2주, 3주 후 Alizarin red 염색에 의한 광화 정도의 평가에서도 대조군과 실험군의 차이는 발견되지 않았다. 그러나 두 군 모두 시간이 경과함에 따라 광화는 증가되었다. 기질에 침착된 칼슘의 양 또한 차이가 없었다. 분화 촉진 유전자와 광화 억제 유전자의 발현도 양 군 간에 다르지 않았다. 이러한 부정적인(negative) 결과는 FGF23에 의한 세포 내 신호전달의 장애가 아님이 Erk 인산화로 확인되었다. 이상의 결과로 미루어 두개골의 조골세포와 달리 FGF23은 간엽줄기세포에서 조골세포로의 분화와 광화에는 영향을 미치지 않을 것으로 사료된다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제13권7호
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• pp.3349-3355
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• 2012

Background and objectives: Chromosomal abnormalities play an important role in genesis of acute lymphoblastic leukemia (ALL) and have prognostic implications. Five major risk stratifying fusion genes in ALL are BCR-ABL, MLL-AF4, ETV6-RUNX11, E2A-PBX1 and SIL-TAL1. This work aimed to detect common chromosomal translocations and associated fusion oncogenes in adult ALL patients and study their relationship with clinical features and treatment outcome. Methods: We studied fusion oncogenes in 104 adult ALL patients using RT-PCR and interphase-FISH at diagnosis and their association with clinical characteristics and treatment outcome. Results: Five most common fusion genes i.e. BCR-ABL (t 9; 22), TCF3-PBX1 (t 1; 19), ETV6-RUNX1 (t 12; 21), MLL-AF4 (t 4; 11) and SIL-TAL1 (Del 1p32) were found in 82/104 (79%) patients. TCF3-PBX1 fusion gene was associated with lymphadenopathy, SIL-TAL1 positive patients had frequent organomegaly and usually presented with a platelets count of less than $50{\times}10^9/l$. Survival of patients with fusion gene ETV6-RUNX1 was better when compared to patients harboring other genes. MLL-AF4 and BCR-ABL positivity characterized a subset of adult ALL patients with aggressive clinical behaviour and a poor outcome. Conclusions: This is the first study from Pakistan which investigated the frequency of5 fusion oncogenes in adult ALL patients, and their association with clinical features, treatment response and outcome. Frequencies of some of the oncogenes were different from those reported elsewhere and they appear to be associated with distinct clinical characteristics and treatment outcome. This information will help in the prognostic stratification and risk adapted management of adult ALL patients.

• 한국자원식물학회지
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• 제33권4호
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• pp.227-236
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• 2020

고령사회에서 노년기 건강의 큰 문제로 대두되고 있는 골다공증은 특히 폐경 후 여성들에게서 가장 그 발생빈도가 높게 나타났으며, 현재 골다공증 예방 및 치료에 사용되고 있는 약제는 대부분 골흡수 억제제로써 진행된 골소실을 회복 시킬 수는 없기 때문에 골형성 증가를 통한 골다공증 예방과 치료에 관한 연구가 활발히 이루어지고 있다. 산양삼(cultivated wild Panax ginseng, CWP)에 대한 연구는 다수가 원기회복, 자양강장 및 면역증강 효과 등에 대한 것이나 골대사에 미치는 영향에 대한 연구는 거의 없는 실정이다. 이에 본 연구에서는 산양삼 추출물이 조골세포에서 골관련 유전자 발현에 미치는 영향을 확인함으로써 골다공증 예방 및 치료 효과를 갖는 천연 소재로의 활용 가능성을 검토하고자 하였다. 산양삼 추출물 처리가 조골 세포의 증식에 미치는 영향을 알아보기 위해 MTT assay를 실시하였고, MC3T3-E1 세포생존률은 FBS가 첨가되지 않은 배양액만 처리한 대조군과 산양삼 추출물을 처리한 실험군 모두에서 동일한 수준으로 나타났으며 이로써 산양삼 추출물의 안전성을 확인할 수 있었다. 또한 산양삼 추출물을 처리한 실험군과 대조군과의 세포증식률을 비교하였을 때 산양삼 추출물 50 ㎍/mL 농도 처리군에서 유의적으로 세포증식이 촉진되었으며 25 ㎍/mL과 100 ㎍/mL 농도 처리군에서도 대조군보다 높은 경향을 나타내었다. 산양삼 추출물이 조골 세포의 활성에 미치는 영향을 알아보기 위해 조골세포의 분화초기 표지인자인 ALP활성을 측정하였으며 그 결과 모든 산양삼 추출물 처리군이 대조군과 비교하여 유의적으로 높은 활성을 나타내었으며 특히 산양삼 추출물 50 ㎍/mL 농도 처리군에서 가장 높은 활성을 나타내었다. 산양삼 추출물의 농도에 따른 석회화 형성도를 확인하기 위해 무기질화된 세포의 기질을 alizarin red로 염색하였고 산양삼 추출물을 처리한 실험군과 대조군과의 석회화 형성도를 비교하였을 때 산양삼 추출물 50 ㎍/mL 농도 처리군에서 유의적으로 석회화 형성이 촉진되었으며 25 ㎍/mL과 100 ㎍/mL 농도 처리군에서도 대조군보다 높은 경향을 나타내었다. 산양삼 추출물이 MC3T3-E1 조골세포에서 골 형성 관련 유전자 발현에 미치는 영향을 확인하기 위해 Runx2, ALP, OPN, OCN등의 유전자를 정량 real-time PCR을 통해 분석하였으며 대조군과 비교하여 모든 산양삼 추출물 처리군에서 농도 의존적이고 유의적으로 골 형성 관련 유전자발현이 증가되었다. 따라서 산양삼추출물이 골 형성 관련 유전자인 Runx2, ALP, OPN, OCN 발현을 증가시켜MC3T3-E1 조골세포의 분화를 촉진하고, 골 석회화 형성 촉진에 기여하였을 것으로 사료된다. 그러나 산양삼 추출물이 골형성과 관련하여 어떠한 기전으로 유전자의 발현을 조절하였는지에 대한 유전자 및 단백질 수준의 추가적인 연구와 산양삼 추출물의 분화 촉진과 석회화 형성능이 산양삼의 사포닌계 진세노사이드 성분의 영향인지에 대한 후속 연구가 필요할 것으로 사료된다.

• 생명과학회지
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• 제28권12호
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• pp.1448-1454
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• 2018

최근 들어 곤충을 식품 및 바이오 소재로 이용한 연구가 활발히 진행되고 있다. 그러나 곤충을 이용한 조골세포 활성 및 분화에 따른 골 형성 촉진 효과에 대한 연구는 아직 미흡한 실정이다. 뿐만 아니라 풀무치를 이용한 기능성 연구는 거의 이루어지지 않고 있다. 따라서 본 연구에서는 골 형성 촉진 효능을 가진 새로운 천연물 소재 개발을 위해 풀무치 추출물의 MG-63 조골세포의 분화 촉진 효과를 연구하였다. 조골세포에서 풀무치 추출물의 독성 및 증식 효과를 평가하기 위하여 MTS assay를 진행한 결과, $1,000{\mu}g/ml$ 농도까지 세포 독성이 나타나지 않았으며, 48시간 배양했을 때 $500-1,000{\mu}g/ml$ 농도에서 105%와 116%의 세포 증식 효능을 확인 하였다. 풀무치 추출물이 조골세포 분화에 미치는 영향을 확인하기 위하여 3일 및 5일간 풀무치 추출물을 MG-63 조골세포에 처리한 후 ALP 활성을 측정하였다. 그 결과 $100{\mu}g/ml$ 농도에서 positive control로 사용한 조골세포 분화배지(DM)군과 유사한 정도로 분화가 증가하였으며 500 및 $1,000{\mu}g/ml$ 농도에서는 2-3배까지 조골세포 분화가 촉진되었다. 이 결과는 ALP staining에서도 유사하게 나타났다. mRNA 발현량의 변화를 측정한 결과, Alpl과 Runx2 유전자 발현량이 증가하였고, 단백질 발현량을 측정했을 때에도 유사한 결과를 확인하였다. 이를 통해 ALP와 Runx2 유전자 및 단백질 발현에 의해서 ALP 활성이 증가하고 조골세포 분화가 촉진되었을 것으로 판단되며, 풀무치 추출물을 이용한 골 형성 촉진에 따른 골다공증 예방 및 치료 기능성 소재 개발에 대한 가능성을 확인하였다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제41권5호
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• pp.227-233
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• 2011

Purpose: The aim of this study was to compare osteoblast behavior on zirconia and titanium under conditions cultured with bone morphogenetic protein-2. Methods: MC3T3-E1 cells were cultured on sandblasted zirconia and sandblasted/etched titanium discs. At 24 hours after seeding MC3T3-E1, the demineralized bone matrix (DBM) gel alone and the DBM gel with bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) were added to the culture medium. The surface topography was examined by confocal laser scanning microscopy. Cellular proliferation was measured at 1, 4, and 7 days after gel loading. Alkaline phosphatase activity was measured at 7 days after gel loading. The mRNA expression of ALPase, bone sialoprotein, type I collagen, runt-related transcription factor 2 (Runx-2), osteocalcin, and osterix were evaluated by real-time polymerase chain reaction at 4 days and 7 days. Results: At 1, 4, and 7 days after loading the DBM gel alone and the DBM gel with BMP-2, cellular proliferation on the zirconia and titanium discs was similar and that of the groups cultured with the DBM gel alone and the DBM gel with BMP-2 was not significantly different, except for titanium with BMP-2 gel. ALPase activity was higher in the cells cultured with BMP-2 than in the other groups, but there was no difference between the zirconia and titanium. In ALPase, bone sialoprotein, osteocalcin, Runx-2 and osterix gene expression, that of cells on zirconia or titanium with BMP-2 gel was much more highly increased than titanium without gel at day 7. The gene expression level of cells cultured on zirconia with BMP-2 was higher than that on titanium with BMP-2 at day 7. Conclusions: The data in this study demonstrate that the osteoblastic cell attachment and proliferation of zirconia were comparable to those of titanium. With the stimulation of BMP-2, zirconia has a more pronounced effect on the proliferation and differentiation of the osteoblastic cells compared with titanium.