무더운 날씨가 지속됨으로서 고랭지배추의 생장 및 결구가 지연되고 있는 강원도 정선군 질운산(새빗재)의 600 m와 900 m의 배추를 사용하여 무기성분 및 단백질 발현패턴을 분석하였다. 식물체 무기성분에서는 생장에 관련된 질소 및 인산의 부족현상과 결구에 관련된 칼슘이 부족하였다. 단백체 분석은 2차원 전기영동에 의해 전체 126개의 단백질이 분리되었고 그중 48개의 단백질이 고도에 따라 변화하는 양상을 보여주었다. 이 중에서 30개의 단백질 서열이 결정되었는데, 해발 900 m에서 단백질 발현이 증가한 14개 중에서 oxygen- evolving proteins, rubisco activase and ATPase 등이, 해발 600 m에서는 glutathione S-transferase (1, 28 kD cold induced- and 24kD auxin-binding proteins) and salt-stress induced protein 등 16개의 단백질 발현이 증가하였다. 이러한 단백질은 식물체 손상에 대한 보호기작을 가진 스트레스관련 단백질로 가뭄, 온도상승, 밤낮의 온도차 등의 반복으로 복합적이며 동시 다발적으로 나타나는 고온장해 현상으로 사료된다.
Two genetic constructs used to confer improved agronomic characteristics, namely herbicide tolerance (HT) in maize and soyabean and insect resistance (Bt) in maize, are considered in respect of feeding to farm livestock, animal performance and the nutritional value and safety of animal products. A review of nucleic acid (DNA) and protein digestion in farm livestock concludes that the frequency of intact transgenic DNA and proteins of GM and non-GM crops being absorbed is minimal/non existent, although there is some evidence of the presence of short fragments of rubisco DNA of non-GM soya in animal tissues. It has been established that feed processing (especially heat) prior to feeding causes significant disruption of plant DNA. Studies with ruminant and non-ruminant farm livestock offered GM feeds demonstrated that animal performance and product composition are unaffected and that there is no evidence of transgenic DNA or proteins of current GM in the products of animals consuming such feeds. On this evidence, current HT and Bt constructs represent no threat to the health of animals, or humans consuming the products of such animals. However as new GM constructs become available it will be necessary to subject these to rigorous evaluation.
Infection with rice blast fungus (Magnaporthe grisea) significantly reduced foliar net photosynthesis (A) of rice cultivars: Ilpoom, Hwasung, and Choochung in greenhouse experiments. By measuring the amount of diseased leaf area with a computer image analysis system, the relation between disease severity (DS) and net photosynthetic rate was curvilinearly correlated (r=0.679). Diseased leaves with 35% blast symptom can be predicted to have a 50% reduction of photosynthesis. The disease severity was linearly correlated (r=0.478) with total chlorophyll (chlorophyll a and chlorophyll b) per unit leaf area(TC). Light use efficiency was reduced by the fungal infection according to the light response curves. However, dark respiration (Rd) did not change after the fungal infection (p=0.526). Since the percent of reduction in photosynthesis greatly exceeded the percent of leaf area covered by blast lesions, loss of photosynthetic tissue on an area basis could not by itself account for the reduced photosynthesis. Quantitative photosynthetic reduction can be partially explained by decreasing TC, but cannot be explained by decreasing Rd. By photosynthesis (A)-internal CO$_2$ concentration (C$_i$ curve analysis, it was suggested that the fungal infection reduced ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (Rubisco) activity, ribulose-1,5-bisphosphate (RuBP) regeneration, and inorganic phosphate regeneration. Thus, the reduction of photosynthesis by blast infection was associated with decreased TC and biochemical capacity, which comprises all carbon metabolism after CO$_2$ enters through the stomata.
Nitrogen (N) is an important regulator of the expression of genes involved in carbon and N assimilation pathways in plants by selectively altering the levels of proteins and/or mRNAs. These in C4 plants include genes for such as phosphoenolpyruvate carboxylase, carbonic anhydrase, and pyruvate-Pi dikinase. The C4 genes are regulated in mesophyll cells by N availability both transcriptionally and posttranscriptionally through cytokinins and glutamine as signals. The level of both the signals is up-regulated by N availability: cytokinins in roots and glutamine in leaves. The level of glutamine is controlled by the differential expression by N of glutamine synthetase and ferrdoxin-dependent glutamate synthase genes which locate in the mesophyll cells of C4 plants. The results is discussed as molecular mechanism for the greater N use efficiency of the plants as well as N partitioning is the photosynthetic cells.
In order to reveal the aluminum (Al) stress tolerance mechanisms in alfalfa plant at low pH soil, a proteomic approach has been conducted. Alfalfa plants were exposed to Al stress for 5 days. The plant growth and total chlorophyll content are greatly affected by Al stress. The malondialdehyde (MDA) and $H_2O_2$ contents were increased in a low amount but free proline and soluble sugar contents, and the DPPH-radical scavenging activity were highly increased. These results indicate that antioxidant activity (DPPH activity) and osmoprotectants (proline and sugar) may involve in ROS ($H_2O_2$) homeostasis under Al stress. In proteomic analysis, over 500 protein spots were detected by 2-dimentional gel electrophoresis analysis. Total 17 Al stress-induced proteins were identified, of which 8 protein spots were up-regulated and 9 were down-regulated. The differential expression patterns of protein spots were selected and analyzed by the peptide mass fingerprinting (PMF) using MALDI-TOF MS analysis. Three protein spots corresponding to Rubisco were significantly down-regulated whereas peroxiredoxin and glutamine synthetase were up-regulated in response to Al stress. The different regulation patterns of identified proteins were involved in energy metabolism and antioxidant / ROS detoxification during Al stress in alfalfa. Taken together, these results provide new insight to understand the molecular mechanisms of alfalfa plant in terms of Al stress tolerance.
B. rapa로부터 분리한 BrMT3 유전자를 도입시킨 효모와 애기장대가 카드뮴을 비롯한 중금속에 저항성을 보이는 것이 확인되었고 이 결과를 토대로 이 유전자가 중금속 흡착을 통한 환경 정화 및 스트레스에 내성을 갖는 형질전환 식물체를 개발하는데 유용하게 사용될 것으로 기대된다.
Kim, Won-Il;Jung, Goo-Bok;Kim, Min-Kyeong;Park, Kwang-Lai;Yun, Sun-Gang
한국환경농학회지
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제20권5호
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pp.310-316
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2001
To find out the effect of low temperature on the regulation of tomato chloroplast genes, the optimization of the system in chloroplast protein synthesis and the identification of the changes in chloroplast protein synthesis induced by chilling were studied. Incorporation reaction occurred rapidly at the first 30 minutes and was constantly maintained after 60 minutes. A broad optimal temperature on protein synthesis was found around 20 to $30^{\circ}C$. No difference was shown in the chloroplast protein synthesis under high light intensity (1600 ${\mu}E/m^2/s$) as well as under low light intensity (400 ${\mu}E/m^2/s$) even darkness. $K^+$, $Mg^{++}$ and ATP at an optimal concentration act as an activator, while DTT, chloramphenicol, cycloheximide, $Ca^{++}$ and inorganic phosphate act as an inhibitor in the chloroplast protein synthesis. Synthesis of 15, 55 and 60 kd chloroplast encoded stromal proteins and 18, 24, 33 and 55 kd chloroplast encoded thylakoid membrane proteins were reduced by chilling, while 17 kd chloroplast encoded stromal protein and 16 kd chloroplast encoded thylakoid membrane protein was induced by chilling. It was expected that the 55 kd stromal protein would be the large subunit of rubisco and the 33 kd thylakoid membrane protein would be the D1 protein which was drastically reduced by chilling.
The ecophysiological changes occurring upon cold stress were studied using cold tolerant transgenic and wild-type tobacco plants. In a previous study, cold tolerance in tobacco was induced by the introduction of a gene encoding the zinc finger transcription factor, PIF1. Gas-exchange measurements including net photosynthesis and stomatal conductance were performed prior to, in the middle of, and after a cold-stress treatment of $1{\pm}2^{\circ}C$ for 96 h in each of the four seasons. In both transgenic and wild-type plants, gas-exchange parameters were severely decreased in the middle of the cold treatment, but had recovered after 2-3 h of adaptation in a greenhouse. Most t-test comparisons on gas-exchange measurements between the two plant types did not show statistical significance. Wild-type plants had slightly more water-soaked damage on the leaves than the transgenic plants. A light-response curve did not show any differences between the two plant types. However, the curve for assimilation-internal $CO_2$ in wild-type plants showed a much higher slope than that of the PIF1 transgenic plants. This means that the wild-type plant is more capable of regenerating Ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (Rubisco) and has greater electron transport capacity. In conclusion, cold-resistant transgenic tobacco plants demonstrated a better recovery of net photosynthesis and stomatal conductance after cold-stress treatment compared to wild-type plants, but the ecophysiological recoveries of the transgenic plants were not statistically significant.
지모 (Anemarrhena asphodeloides)는 탁월한 해열작용과 진정작용을 갖는 한약재로 한국, 중국, 일본에서 널리 이용되어 왔다. 본 연구에서는 먼저 국내 연구소에서 형태학적 분류 결과 지모로 확인된 3종의 식물체를 수집하여 엽록체 DNA의 trnL-F 염기서열을 분석하였다. 분석 결과, 국내 연구기관에서 보관중인 지모 식물체들이 모두 동일한 trnL-F의 염기서열을 보여서, 형태학적 분류와 계통유전학적 분류가 동일함을 확인하였다. 최초로 얻어진 지모 trnL-F 염기서열은 NCBI database에 등록하였다. 다음으로 국내 한약재 시장과 중국 한약재 시장에서 유통 중인 지모 한약재를 다량 구입하여 trnL-F의 염기서열을 분석하였다. 그 결과, 유통 중인 지모 한약재들이 모두 기원식물과 동일한 TrnL-F의 염기서열을 보여서 지모 약재의 경우 진품이 유통되고 있음을 알 수 있었다. TrnL-F의 염기서열로 계통수를 작성한 결과 지모는 아스파라거스목 (Asparagales), 용설란과 (agavaceae)에 속한 것으로 보여 졌다. 엽록체 rbcL 유전자 염기서열로 얻은 계통수와 비교한 결과 trnL-F 계통수와 rbcL 계통수가 비슷한 결과를 보여주어서 분자유전학적 분류에 두 유전자가 상호보완적으로 이용될 수 있음을 확인하였다.
염 또는 건조 스트레스 처리에 의한 톨 페스큐 종자의 발아율 변화와 유식물체 수준에서의 유전자 발현을 조사하기 위하여 in vitro 조건에서 NaCl과 PEG를 처리하여 분석하였다. NaCl 처리시 톨 페스큐 품종별 발아율은 50 mM 농도에서 발아율이 서서히 감소하기 시작하였으며 350 mM의 농도에서는 모든 품종에서 발아가 되지 않는 경향을 보였다. NaCl 처리 농도에 따른 발아율 감소율은 Fawn 품종이 가장 큰 변화를 보였으며 Kentucky-31(E-) 품종이 가장 강한 내성을 보였다. 또한, PEG 처리시 톨 페스큐 품종별 발아율의 변화도 NaCl 처리시와 유사한 경향을 보였으며 고농도인 30% PEG 처리구에서는 모든 품종에서 발아가 되지 않는 경향을 보였으며 Kentucky-31(E-) 품종이 가장 강한 내성을 보였다. 톨 페스큐 유식물체 수준에서 염해와 건조 스트레스에 의한 유전자 발현양상을 조사하기 위하여 DEGs (differentially expressed genes) 탐색을 위한 ACP-based GeneFishing$^{TM}$ PCR 분석을 통해 NaCl 또는 PEG 처리에 따른 발현량의 차이를 보이는 총 4개의 DEG를 선발하여 클로닝하고 염기서열을 분석하였다. 무처리구에 비해 NaCl 처리시 4개의 DEG가 증가하였고 감소하는 DEG는 확인 되지 않았으나, PEG 처리에서는 3개의 DEG (DEG 1, 3, 및 4)가 증가하였고 1개의 DEG가 감소하는 경향을 나타내었다. 발굴된 DEG들을 blastx 검색에 의하여 rubisco large subunit (DEG1), microsomal glutathion S-transferase (GST) 3-like isoform 1 (DEG2) 유전자로 동정되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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