In this study, we aimed to investigate the neuroprotective effects of caffeic acid phenethyl ester (CAPE), an active component of propolis purified from honeybee hives, on photothrombotic cortical ischemic injury in mice. Permanent focal ischemia was achieved in the medial frontal and somatosensory cortices of anesthetized male C57BL/6 mice by irradiation of the skull with cold light laser in combination with systemic administration of rose bengal. The animals were treated with CAPE (0.5-5 mg/kg, i.p.) twice 1 and 6 h after ischemic insult. CAPE significantly reduced the infarct size as well as the expression of tumor necrosis $factor-{\alpha}$, hypoxiainducible $factor-1{\alpha}$ monocyte chemoattractant protein-1, $interleukin-1{\alpha}$, and indoleamine 2,3-dioxygenase in the cerebral cortex ipsilateral to the photothrombosis. Moreover, it induced an increase in heme oxygenase-1 immunoreactivity and interleukin-10 expression. These results suggest that CAPE exerts a remarkable neuroprotective effect on ischemic brain injury via its anti-inflammatory properties, thereby providing a benefit to the therapy of cerebral infarction.
Park, Cheol-Hong;Shin, Tae-Kyeong;Lee, Ho-Youn;Kim, So-Jung;Lee, Won-Suk
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제15권2호
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pp.115-122
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2011
The aim of this study was to investigate whether matrix metalloproteinase (MMP) inhibitors attenuate neuroinflammation in an ischemic brain following photothrombotic cortical ischemia in mice. Male C57BL/6 mice were anesthetized, and Rose Bengal was systemically administered. Permanent focal ischemia was induced in the medial frontal and somatosensory cortices by irradiating the skull with cold white light. MMP inhibitors, such as doxycycline, minocycline, and batimastat, significantly reduced the cerebral infarct size, and the expressions of monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1), tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), and indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO). However, they had no effect on the expressions of heme oxygenase-1 and neuroglobin in the ischemic cortex. These results suggest that MMP inhibitors attenuate ischemic brain injury by decreasing the expression levels of MCP-1, TNF-${\alpha}$, and IDO, thereby providing a therapeutic benefit against cerebral ischemia.
Photosensitization via the singlet oxygen ($^1O_2$) mechanism by the binuclear iron-sulfur center, denoted as [2Fe-2S], was investigated, using a highly purified ferredoxin (Fd) preparation from spinach leaves. Since the apoprotein of Fd contains a good number of amino acid residues that are readily reactive with $^1O_2$ and thus interfere with the detection of $^1O_2$ generated from [2Fe-2S], we attempted to deprive the $^1O_2$-sensitive residues of their $^1O_2$-scavenging capacity as much as possible by treating Fd with rose bengal plus 550 nm monochromatic light and thereby photooxidatively degrading these residues. The photochemically modified Fd was found to keep the structural integrity of its Fe-S group virtually unaffected by the treatment. By employing chemical trap method for measurement and examining the kinetic effects of azide and deuterium oxide on the reactions of $^1O_2$ with various trap compounds, we were able to demonstrate that [2Fe-2S] indeed acts as a photosensitizer via $^1O_2$. Further, the minimum quantum yield of $^1O_2$ production by [2Fe-2S] was estimated to be 0.0047.
It is important to study using experimental animals for research about stroke. Magnetic Resonance Imaging(MRI) is avaluable diagnosticmethods for stroke diagnosis. The purpose of this research is to know the Magnetic Resonance Imaging(MRI) and histopathological characteristics findings after induction of photothrombotic cerebral infarction in rat brain. Male Sprague-Dawley rats were anesthetized, Rose Bengal dye(20 mg/kg) was intravenously injected. The right sensonrimotor cortex of rat brain was exposed to cold light of 7 mm diameter at a position of 1 mm anterior and 3.5 mm lateral to bregma for 20 min. The post-infarction effects were monitored by T1 weighted and T2 weighted images of brain MRI. Histopathological changes were observed after Hematoxylin & Eosin staining. The lesion appeared clearly high signal intensity area on T2 weighted images(the major axis $7.04{\pm}0.11$ mm, the minor axis $3.08{\pm}0.04$ mm) and also H&E staining was same result. In conclusion, MRI was avaluable diagnostic methods for diagnosis and serial changes of stroke.
Brucellosis is a serious zoonosis, recognized worldwide. It primarily affects animals, which act as reservoirs for human infection as well as being of economic significance to the agri-food industry. Bangladesh has been reported as an endemic area for brucellosis. So a cross sectional study was conducted to determine the seroprevalence and potential risk factors of brucellosis in cattle in Dinajpur and Mymensingh districts of Bangladesh. A total of 182 cattle were examined by Rose Bengal Plate Test (RBPT) between September 2008 and October 2009. Then Positive, doubtful, and negative samples were further confirmed with slow agglutination test (SAT) and both indirect and competitive enzyme linked immunosorbent assay (iELISA and cELISA). A questionnaire was used to collect epidemiological information of the animals. The overall animal-level prevalence was 3.30%. Brucellosis seroprevalence was higher (4.76% by cELISA) in cattle above 48 months than those under 48 months. Female showed higher seroprevalence (10.67%) than male (6.25%). Higher seroprevalence was also found in cattle bred naturally (20.0%) than artificially (8.77%) and cattle that aborted or with previous abortion record (22.22%) showed higher seroprevalence than non-aborted (7.69%). The sensitivity of RBT and SAT was found 100% as compared to cELISA standard test, whereas specificity of RBT (95.35%) was higher than that of SAT (94.32%).
The present study was designed to examine the metabolism of 1-anilino-8-naphthalene sulfonate (ANS), an anionic compound which is transported into liver via "multispecific organ ic anion transporter", with rat hepatic microsomes. TLC analysis indicated that the fluorescent metabolites were not produced to a measurable extent, which made it possible to assess the ANS metabolism by measuring the fluorescence disappearance. The metabolism of ANS was remarkably inhibited by the presence of SKF-525A as well as by the substitution of 02 by CO gas. ANS metabolism by microsomes also required NADPH as a cofactor. These results indicated that the microsomal monooxygenase system might be mainly responsible for the ANS metabolism. The maximum velocity ($V_{max}$) and Michaelis constant ($K_m$) were calculated to be $4.3{\pm}0.2$ nmol/min/mg protein and $42.1{\pm}2.0\;{\mu}M$, respectively. Assuming that 1g of liver contains 32mg of microsomal protein, the $V_{max}$ value was extrapolated to that per g of liver ($V_{max}^I$). The intrinsic metabolic clearance ($CL_{int}$) under linear conditions calculated from this in vitro metabolic study was 3.3ml/min/g liver, being comparable with that (3.0ml/min/g liver) calculated by analyzing the in vivo plasma disappearance curve in a previous study. Furthermore, the effects of other organic anions on the metabolism of ANS were examined. Bromophenolblue (BPB) and rose bengal (RB) competitively inhibited the metabolism of ANS, while BSP inhibited it only slightly. The inhibition constant ($K_i$) of BPB ($6\;{\mu}M$) was much smaller than that of RB ($200\;{\mu}M$). In conclusion, the microsomal monooxygenase system plays a major role in the metabolism of ANS, and other unmetabolizable organic anions (BPB and RB) compete for this metabolism.
Brucellosis is the most important bacterial disease of livestock in Bangladesh. The present study was conducted to determine the seroprevalence of brucellosis in goat and sheep in Mymensingh and Bogra districts of Bangladesh using slow agglutination test and Rose Bengal test as screening test and indirect enzyme linked immunosorbent assay as confirmatory test. Questionnaire based data on age, gender, area, client's complaint, number of animals in herds, disease history, reproductive problems such as abnormal uterine discharge, abortion or previous abortion in sheep and goat and their reproductive diseases were recorded. A total of 200 sera samples were collected from 80 sheep and 120 goats. The prevalence of brucellosis in goat was 2.50% and 1.25% in sheep. Positive reactors were only detected in female of both goat and sheep. In this study, there existed a significant association among abortion and the prevalence of brucellosis (p < 0.01). The prevalence of brucellosis in sheep and goat in Bangladesh is not negligible, and it is therefore worth considering the adoption of preventive measures.
From the end of July 2012, several cases of abortion have been happened at the Korean indigenous cattle farm with 124 heads in Chungbuk province, Korea. Serological tests such as Rose-bengal test (RBT) and standard tube agglutination test (STAT) have been performed according to the standard official protocols of bovine brucellosis and 41 cattle turned out to be brucellosis-positive simultaneously. To find out the main factors of brucellosis outbreaks and spreads, additional serological, etiological and molecular investigation were applied. Totally, 11 B. abortus were isolated from 10 cattle's specimens including lymph-nodes and/or testis, and drinking water in cowhouse. In genotyping by multi-locus VNTR assay (MLVA) using 17 loci markers, the present B. abortus isolates were shown all the same pattern, D1 genotype, which has been reported in Gyeonggi and Gangwon province, Korea. These results suggest that the input of brucellosis might come from neighboring farms directly or indirectly, even if by unknown factor and expansion within farm would accelerate by materials related with aborting cows.
White rot fungi have been useful source of enzymes for the degradation of environmental pollutants including polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) and synthetic dyes. PAHs are widespread organic compounds present in fossil fuels and are routinely generated by incomplete fuel combustion. PAHs are some of the major toxic pollutants of water and soil environments. Synthetic dyes are major water-pollutants, which are toxic to organisms in water environments and interfere photosynthesis of water plants. Removal of PAHs and synthetic dyes has been of interests in the environmental science especially in the environmental microbiology. Mushrooms are fungal groups that function as primary degraders of wood polyphenolic lignin. The ligninolytic enzymes produced by mushroom, including manganese peroxidase, lignin peroxidase, and laccase, mediate the oxidative degradation of lignin. The catalytic power of these enzymes in the degradation of aromatic ring compounds has been sought for the degradation of various organic compounds. In this project, we have screened 60 wild mushroom strains for their degradation activity against two representative PAHs, naphthalene and anthracene, and five aromatic dyes, including alizarin red S, crystal violet, malachite green, methylene blue, rose bengal. The degradation of PAHs was measured by GC while the decolorization of dyes was measured by both UV spectrophotometer and HPLC. As results, 9 wild mushroom strains showed high activity in degradation of PAHs and textile dyes. We also describe the secretive enzyme activities, the transcription levels, and cloning of target genes. In conjunction with this, activities of degradative enzymes, including laccase, lignin peroxidase, and Mn peroxidase, were measured in the liquid medium in the presence of PAHs and dyes. Our results showed that the laccase activity was directed correlated with the degradation, indicating that the main enzyme acts on PAHs and dyes is the laccase. The laccase activity was further simulated by the addition of $Cu^{2+}$ ion. Detailed studies of the enzyme system should be sought for future applications.
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