We have successfully applied the nested PCR to detect Cylindrocarpon destructans, a major pathogen causing root rot disease from ginseng seedlings in our former study. The PCR assay, in this study, was used to detect the pathogen from soils. The nested PCR using internal transcribed spacer (ITS) 1, 4 primer set and Dest 1, 4 primer set maintained the specificity in soils containing various microorganisms. For a soil DNA extraction method targeting chlamydospores, when several cell wall disrupting methods were tested, the combination of lyophilization and grinding with glass beads, which broke almost all the chlamydospores, was the strongest. The DNA extraction method which was completed based on the above was simple and time-saving because of exclusion of unnecessary stages, and efficient to apply in soils. As three ginseng fields whose histories were known were analyzed, the PCR assay resulted as our expectation derived from the field information. The direct PCR method will be utilized as a reliable and rapid tool for detecting and monitoring C. destructans in ginseng fields.
Based on the principal component analysis (PCA) of Richards' parameter estimates, ginseng field soils were grouped as the principal component 1 (PC1) and the principal component 2 (PC2). The microflora and physico-chemical characteristics of each soil group were compared to elucidate soil environmental factors affecting the disease development of root rot of ginseng seedling. Among 3 soil groups by PC1, there were differences in the populations of total fungi (TF) and Cylindrocarpon plus Fusarium (C+F), and the population ratio of Cylindrocarpon plus Fusarium to total fungi or total bacteria (C+F/TF, C+F/TB) in rhizoplane of ginseng seedlings, the population of total actinomycetes (TA) and the population ratio of total Fusarium to total actinomycetes (Fus/TA) in soil, and soil chemical properties (EC, NO3-N, K, Mn, ect.). Among 4 soil groups by PC2, there were differences in TF, C+F, TB, C+F/TF and C+F/TB in the rhizoplane, Trichoderma plus Gliocladium (T+G) in soil, and P2O5 content in soil. Especially, EC, NO3-N, K, K/Mg and Mn were positively correlated to PC1, and TA was negatively to PC1; however, TF, C+F, TB, C+F/TF and C+F/TB in the rhizoplane were significantly correlated to PC2 positively. On the other hand, microbes in the rhizoplane were not significantly correlated to the stand-missing rate (SMR), although TA and Fe/Mn were negatively correlated, and pH and Ca were positively correlated to SMR.
작약에서 분리된 Cylindrocarpon destructans KACC44663 균주의 인삼에 대한 병원성 여부를 밝혀내고자 병원성 검정을 실시하였고 새로운 분류체계에 따른 균의 재분류를 위해 계통학적 유연관계를 분석하였다. 작약으로부터 분리된 KACC44663 균주가 인삼에 병을 일으키는 것을 확인하였고, 새로운 분류체계에 의해 I. radicicola species complex 내 위치하는 Ilyonectria robusta로 동정하였다. 이는 국내에서 타 기주로부터 분리된 병원균이 인삼에 뿌리썩음병을 일으키는 것을 증명한 첫 사례이다.
Fusarium culmorum is one of the most important causal agents of root rot of wheat. In this study, 10 F. culmorum isolates were collected from farms located in five agro-ecological regions of Morocco. These were used to challenge 20 durum wheat genotypes via artificial inoculation of plant roots under controlled conditions. The isolate virulence was determined by three traits (roots browning index, stem browning index, and severity of root rot). An alpha-lattice design with three replicates was used, and the resulting ANOVA revealed a significant (P < 0.01) effect of isolate (I), genotype (G), and G × I interaction. A total of four response types were observed (R, MR, MS, and S) revealing that different genes in both the pathogen and the host were activated in 53% of interactions. Most genotypes were susceptible to eight or more isolates, while the Moroccan cultivar Marouan was reported resistant to three isolates and moderately resistant to three others. Similarly, the Australian breeding line SSD1479-117 was reported resistant to two isolates and moderately resistant to four others. The ICARDA elites Icaverve, Berghisyr, Berghisyr2, Amina, and Icaverve2 were identified as moderately resistant. Principal component analysis based on the genotypes responses defined two major clusters and two sub-clusters for the 10 F. culmorum isolates. Isolate Fc9 collected in Khemis Zemamra was the most virulent while isolate Fc3 collected in Haj-Kaddour was the least virulent. This work provides initial results for the discovery of differential reactions between the durum lines and isolates and the identification of novel sources of resistance.
최근 충북지방의 사과과원에서 사과나무 고사가 심각한 피해를 주고 있다. 본 연구는 2013-2015년까지 충북지방 사과과원에서 발생한 사과나무의 고사율 및 고사 원인별로 조사하였다. 충북 9개 시 군 27개 사과과원에서 조사한 29,265주 중에서 13.7%인 4,000주가 고사하였다. 고사 원인별로는 전체 고사의 50.4%는 역병에 의해, 27.1%는 자주날개무늬병, 10%는 설치류, 그리고 6.3%는 각각 흰날개무늬병과 동해에 의해 발생했다. 1995년과 2006년에 보고된 결과와 비교했을 때 최근에 역병의 발생이 크게 증가한 것으로 나타났다. 그 이유는 재배기간 동안의 고온과 논을 이용한 재배면적의 증가 때문으로 생각한다. 충북지방의 지역별로 고사율과 고사 원인이 달랐다. 본 연구결과는 최근 심각한 피해를 주는 사과나무 고사에 대한 대책을 수립하는데 기초자료로 활용될 것이다.
Background: Plant health is directly related to the change in native microbial diversity and changes in soil health have been implicated as one of the main cause of root rot. However, scarce information is present regarding allelopathic relationship of Panax notoginseng root exudates and pathogenic fungi Fusarium oxysporum in a continuous cropping system. Methods: We analyzed P. notoginseng root exudate in the planting soil for three successive years to determine phenolic acid concentration using GC-MS and HPLC followed by effect on the microbial community assembly. Antioxidant enzymes were checked in the roots to confirm possible resistance in P. notoginseng. Results: Total 29 allelochemicals in the planting soil extract was found with highest concentration (10.54 %) of p-hydroxybenzoic acid. The HPLC showing a year-by-year decrease in p-hydroxybenzoic acid content in soil of different planting years, and an increase in population of F. oxysporum. Moreover, community analysis displayed negative correlation with 2.22 mmol. L-1 of p-hydroxybenzoic acid correspond to an 18.1 % population of F. oxysporum. Furthermore, in vitro plate assay indicates that medium dose of p-hydroxybenzoic acid (2.5-5 mmol. L-1) can stimulate the growth of F. oxysporum colonies and the production of macroconidia, as well as cell wall-degrading enzymes. We found that 2-3 mmol. L-1 of p-hydroxybenzoic acid significantly increased the population of F. oxysporum. Conclusion: In conclusion, our study suggested that p-hydroxybenzoic acid have negative effect on the root system and modified the rhizosphere microbiome so that the host plant became more susceptible to root rot disease.
2005년부터 2007년까지 경기도 고양시와 용인시의 스파티필럼 재배농가에서 주로 여름철 고온기(6월${\sim}$9월)에 스파티필럼의 지제부위와 뿌리 부분이 썩는 증상이 발생하였다. 이러한 병든 식물체의 병반으로부터 병원균을 분리하여 형태적 배양적 특징을 조사한 결과, 분생포자는 긴 막대모양의 양끝이 둥글고, 1-3개의 격막이 있으며 크기는 $67.5-95.0{\times}4.8-6.5\;{\mu}m$(평균 $82.0{\times}6.0\;{\mu}m$)였다. 병원균의 최적생육 온도는 $27^{\circ}C$였으며 병원성 시험결과 접종 5일만에 첫 병징이 조사되었다. 본 병원균은 병징과 균학적 특징을 조사한 결과, Cylindrocladium spathiphylli로 동정하였으며 스파티필럼 뿌리썩음병으로 명명하여 국내에 처음 보고한다.
Carya cathayensis is an important economic nut tree that is endemic to eastern China. As such, outbreaks of root rot disease in C. cathayensis result in reduced yields and serious economic losses. Moreover, while soil bacterial communities play a crucial role in plant health and are associated with plant disease outbreaks, their diversity and composition in C. cathayensis are not clearly understood. In this study, Proteobacteria, Acidobacteria, and Actinobacteria were found to be the most dominant bacterial communities (accounting for approximately 80.32% of the total) in the root tissue, rhizosphere soil, and bulk soil of healthy C. cathayensis specimens. Further analysis revealed the abundance of genera belonging to Proteobacteria, namely, Acidibacter, Bradyrhizobium, Paraburkholderia, Sphaerotilus, and Steroidobacter, was higher in the root tissues of healthy C. cathayensis specimens than in those of diseased and dead trees. In addition, the abundance of four genera belonging to Actinobacteria, namely, Actinoallomurus, Actinomadura, Actinocrinis, and Gaiella, was significantly higher in the root tissues of healthy C. cathayensis specimens than in those of diseased and dead trees. Altogether, these results suggest that disruption in the balance of these bacterial communities may be associated with the development of root rot in C. cathayensis, and further, our study provides theoretical guidance for the isolation and control of pathogens and diseases related to this important tree species.
1998년 경기도 고양시의 분화용 칼랑코에(Kalanchoe sp.)재배농가에서 줄기 하부가 검게 썩으며 급격히 시드는 증상으로부터 병원균을 분리.동정한 결과 Phytophthora nicotianae로 동정되었다. 병원균의 형태적 특성은 뚜렷한 유두돌기를 가진 유주자낭을 형성하였고, 원형~rPfis형이며 크기는 20~48$\times$24~64$\mu\textrm{m}$였고, 구형의 후막포자를 다량 형성하였다. 배양적 특성은 V8 juice agar와 corn-meal agar에서는 풍부한 균사를 형성하였으며, PDA에서는 전형적인 거미집 형태로 자라는 특성을 보였다. 생육온도범위는 최저 1$0^{\circ}C$, 최고 37$^{\circ}C$, 최적온도는 3$0^{\circ}C$였다. \\\"Florus\\\"를 비롯한 14개 칼랑코에 주요 재배품종에 대한 병원성검정을 실시한 결과 품종에 따라 저항성의 차이가 있었다.의 차이가 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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