• 제목/요약/키워드: reverse mutation assay

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인체 T-림프구 hprt 유전자에서 방사선 및 pentachlorophenol에 의한 돌연변이 빈도의 비교(I) (Comparison of Mutant Frequencies Induced by ${\gamma}$-radiation and Pentachlorophenol at hprt Locus in Human T-lymphocytes(I))

  • 김인규;박선영;윤병수;조명행;이영순
    • Journal of Radiation Protection and Research
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    • 제22권1호
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    • pp.15-21
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    • 1997
  • 인체 T-림프구에서 감마선과 대표적 화학 독성물질인 pentachlorophenol(PCP)의 돌연변이 효과를 hypoxanthine phosphoribosyl transferase(hprt) 유전자의 돌연변이 빈도로써 측정하였다. 감마선은 $^{137}$Cs원을 사용하여 세포의 초기배양 시기에 0-3.0 Gy를 조사하였고, PCP는 세포의 초기배양시 최종농도 0-100 ppm으로 24시간 투여하였다. 돌연변이세포는 6-thioguanine을 처리 하에 세포가 성장하는 능력으로 분류하였다. 방사선에 의한 돌연변이빈도는 1.0 Gy, 2.0 Gy와 3.0 Gy 선량에서 대조군보다 약40%, 400%와 750% 증가하였고 0.2 Gy와 0.5 Gy의 선량에서는 유의성 있는 변화가 없었다. PCP를 15 ppm, 25 ppm 그리고 50 ppm을 처리하였을 때 대조군보다 각각 30%, 90% 및 520%정도 증가하였다.

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Intralipidos에 대한 변이원성시험 (Mutagenecity Test of Intralipidos)

  • 정지윤;이원우;임종희;남정석;제정환;이광훈;강병철;이병희;박재학;이영순
    • Toxicological Research
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    • 제14권3호
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    • pp.453-457
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    • 1998
  • In order to evaluate the mutagenic potential of Intralipidos produced by Greenmate cooperation. We performed Salmonella typhimurium reversion assay, chromosomal aberration test on chinese hamster ovarian cells and in vivo micronucleus assay using mouse bone marrow cells. In the reverse mutation test using Salmonella typhimurium TA98 and TA100, Intralipidos did not increase the number of revertant at any of the concentration tested in this study. Intralipidos did not increase the number of cells having structural or numberical chromosome aberration in cytogenetic test. In mouse micronucleus test, no significant increase were observed in the occurrence of micornucleated polychromatic erythrocytes in ICR male mice intraperitoneally administered with Intralipidos. These results indicate that Intralipidos has no genetic toxicity under these experimental conditions.

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발효 탐라오가피 추출물의 유전독성 연구 (Genotoxicity Study from the Extracts of Fermented Acanthopanax koreanum)

  • 조명래;김영현;김재민;이상종;신현무;이옥환
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제31권2호
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    • pp.107-112
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    • 2016
  • 본 연구는 발효 탐라오가피(fermented A. koreanum) 추출물의 유전독성을 연구하기 위하여, 미생물복귀돌연변이 시험, 마우스 골수세포를 이용한 소핵시험, 염색체 이상시험을 연구하였다. 미생물복귀돌연변이 연구에서 발효 탐라오가피 추출물은 Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535, TA1537와 Escherichia coli WP2uvrA에 대하여 대사활성계의 존재(+S-9 Mix) 및 부재(-S-9 Mix) 하에서 돌연변이 유도를 보이지 않았다. 또한, ICR 마우스를 이용한 소핵실험에서 발효 탐라오가피 추출물은 500, 1,000, 2,000 mg/kg 농도에서 MNPCE/2,000 PCE 와 PCE/200 RBC의 소핵형성을 유발하지 않았다. 한편, CHO-K1 세포를 이용한 염색체 이상실험에서 발효 탐라오가피 추출물은 대사활성계의 존재 6시간 처리군, 대사활성계 부재 6시간 처리군 및 대사활성계 부재 24시간 처리군에서 염색체 이상을 보이지 않았다. 따라서, 본 연구결과 발효 탐라 오가피 추출물은 유전독성을 나타내지 않음을 알 수 있었다.

인면역결핍 바이러스 pol 유전자 염기서열 결정에 의한 지도부딘 (ZDV) 내성 돌연변이의 탐지 (Detection of Mutations to Zidovudine in the pol Gene of Human Immunodeficiency Virus-1 by Direct Sequencing)

  • 조영걸;이희정;성흥섭;김유겸;김영봉;이용진;김미정;김대곤;원영호;조군제
    • 대한바이러스학회지
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    • 제29권4호
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    • pp.271-281
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    • 1999
  • The nested polymerase chain reaction (PCR) assay was used to determine the sequences of reverse transcriptase (RT) codons 41, 67, 70, 210, 215 and 219 of human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) pol gene. Template DNA was obtained from uncultured peripheral blood mononuclear cells from 27 Korean HIV-1 infected patients treated with ZDV and Korean red ginseng. The second PCRs were done for 2 separated regions (RT codons $13{\sim}98$ and $152{\sim}259$) with $5\;{\mu}l$ of the first PCR productNucleotide sequences were determined by direct sequencing. In the 27 patients, CD4+ cell count decreased from $230{\pm}117/{\mu}l$ to $152{\pm}162/{\mu}l$ for $46{\pm}26$ months (Mo), and actual duration of ZDV intake was $72{\pm}16$ Mo. In the 16 patients who had been treated with ZDV therapy ${\ge}25$ Mo, the incidences of 70R, 215F/Y, and 41L were 61%, 28% and 22%, respectively and those of 67N, 210W and 219Q were 17%. The incidences of 215F/Y were 6.7% for group ${\le}12$ Mo treatment, 22.7% for group with 13 to 24 Mo, and 27.8% for group ${\ge}25$ Mo. There was no mutation in 9 patients. It might be associated with the interruption of ZDV therapy for more than 6 months in 6 patients. This study shows that the detection of mutation could be useful prognostic marker with other clinical and virological data, and very low mutation rate is dectected compared to overseas reports.

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살균제 carbendazim이 DNA, 유전자 및 염색체에 미치는 영향 (Effects of carbendazim on DNA, gene and chromosome)

  • 이제봉;성필남;정미혜;신진섭;강규영
    • 농약과학회지
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    • 제8권4호
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    • pp.288-298
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    • 2004
  • 광범위 보호 살균제인 carbendazim이 DNA, 유전자 및 염색체에 미치는 영향을 평가하기 위하여 Ames가 개발한 미생물복귀돌연변원성시험, CHL (chinese hamster lung fibroblast cell) 세포를 이용한 염색체 이상시험, DNA 손상시험 및 마우스 골수세포를 이용한 소핵시험을 수행하였다. Carbendazim $156\sim2,500{\mu}g/plate$ 농도로 직접법 및 대사활성화법으로 TA 1535, TA 1537, TA 98 및 TA 100에서 수행한 Ames test결과 음성 대조군(DMSO)과 유사한 colony수를 보여 유전자의 염기절단에 의한 결손이나 염기 치환을 일으키지 않았다. 염색체에 미치는 영향을 검색하기 위하여 CHL세포에 $2.0\sim32.0{\mu}g/mL$의 농도로 carbendazim을 처리하여 염색체이상시험을 수행한 결과 염색분체 절단과 같은 구조이상은 없었으나 염색체의 수에 변화가 관찰되어 수적 이상은 인정되었다. Carbendazim 25, 50 및 $100{\mu}g/mL$을 마우스에 처리하여 30분, 60분 및 120분에 DNA에 직접 노출시켜 DNA손상 시험을 수행한 결과 60분까지는 영향이 없었으나, 120분 노출 군에서 대조군에 비해 $22\sim27%$정도의 DNA이동거리가 증가하여 약간의 손상이 관찰되었으며, 세포에 노출시켰을 때도 중 농도와 저 농도에서 16%의 이동거리 증가와 120분 노출시켰을 때 $10%\sim26%$의 이동거리 증가가 있어 DNA에 직접 노출한 경우와 비슷하였다. Carbendazim 375, 750 및 1,500 mg/kg 농도로 투여한 소핵시험결과 음성으로 판단되었으며, 골수세포에 대한 세포독성도 관찰되지 않았다. 이상의 결과에선 benzimidazole계 살균제 carbendazim이 DNA손상 및 염색체의 수적이상을 일으킨다는 것을 알 수 있었다. 이와 같은 결과는 계속적으로 논란이 되고 있는 benzimidazole계 농약인 benomyl이나 carbendazim에 장기적으로 인체에 노출되었을 경우 유전물질에 영향을 미칠 수 있을 것으로 생각되나 만성독성성적과 노출량 등 구체적인 자료를 이용한 위해성평가를 수행하여야 보다 정확한 판단을 할 수 있을 것으로 사료되었다.

Cloning and Characterization of the Orotidine-5'-Phosphate Decarboxylase Gene (URA3) from the Osmotolerant Yeast Candida magnoliae

  • Park, Eun-Hee;Seo, Jin-Ho;Kim, Myoung-Dong
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제22권5호
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    • pp.642-648
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    • 2012
  • We determined the nucleotide sequence of the URA3 gene encoding orotidine-5'-phosphate decarboxylase (OMPDCase) of the erythritol-producing osmotolerant yeast Candida magnoliae by degenerate polymerase chain reaction and genome walking. Sequence analysis revealed the presence of an uninterrupted open-reading frame of 795 bp, encoding a 264 amino acid residue protein with the highest identity to the OMPDCase of the yeast Kluyveromyces marxianus. Phylogenetic analysis of the deduced amino acid sequence revealed that it shared a high degree of identity with other yeast OMPDCase homologs. The cloned URA3 gene successfully complemented the ura3 null mutation in Saccharomyces cerevisiae, revealing that it encodes a functional OMPDCase in C. magnoliae. An enzyme activity assay and reverse transcription polymerase chain reaction indicated that the expression level of the C. magnoliae URA3 gene in S. cerevisiae was not as high as that of the S. cerevisiae URA3 gene. The GenBank accession number for C. magnoliae URA3 is JF521441.

Cloning and Characterization of a Glyoxalase I Gene from the Osmotolerant Yeast Candida magnoliae

  • Park, Eun-Hee;Lee, Dae-Hee;Seo, Jin-Ho;Kim, Myoung-Dong
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제21권3호
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    • pp.277-283
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    • 2011
  • Glyoxalase I catalyzes the conversion of methylglyoxal to S-D-lactoylglutathione in the presence of glutathione. The structural gene of glyoxalase I (GLO1) was cloned from an osmotolerant yeast, Candida magnoliae, which produces a functional sweetener, erythritol, from sucrose. DNA sequence analysis revealed that the uninterrupted open reading frame (ORF) of C. magnoliae GLO1 (CmGLO1) spans 945 bp, corresponding to 315 amino acid residues, and shares 45.2% amino acid sequence identity to Saccharomyces cerevisiae Glo1. The cloned ORF in a multicopy constitutive expression plasmid complemented the glo1 mutation of S. cerevisiae, confirming that it encodes Glo1 in C. magnoliae. The responses of CmGLO1 to environmental stresses were different from those of S. cerevisiae, which only responds to osmotic stress. An enzyme activity assay and reverse transcription polymerase chain reaction revealed that the expression of CmGLO1 is induced by stress inducers such as methylglyoxal, $H_2O_2$, KCl, and NaCl. The GenBank Accession No. for CmGLO1 is HM000001.

에폭시화 대두유의 유전독성 연구 (Studies on Genetic Toxicity of Epoxidized Soy Bean Oil)

  • 한의식;정해관;김종원;박미선;엄미옥;강혁준;민수진;오혜영
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.145-151
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    • 2001
  • 유아 식품중의 병마개 등에 약 30%까지 함유되어 합성수지 및 고무의 가소제로 많이 사용되고 있으나 최근 유럽등지에서 식품으로의 유리가 보고되어 안전성에 대한 재평가가 요구되어지고 있는 에폭시화 대두유 (Epoxidized soy bean oil, ESBO)의 유전독성을 평가하기 위해서 박테리아를 이용한 복귀돌연변이시험과 포유류 배양세포를 대상으로 검색하는 체외 염색체이상시험, 설치류의 조혈세포를 이용한 체내 소핵시험을 수행하였다. Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535, TA1537, TA102균주를 이용한 복귀돌연변이 시험결과 직접법 및 대사활성화법에서 돌연변이 유발성을 가지지 않는 음성의 결과를 나타내었으며, chinese hamster lung cell을 이용한 염색체이상시험을 실시한 결과, 직접법 및 대사활성화법에서 염색체이상 유발작용을 보이지 않는 음성의 결과를 나타내었다. 또한 성별, 연령별에 따라서 마우스 골수세포를 이용한 소핵시험에서 에폭시화 대두유는 미성숙 적혈구중 유의성 있는 소핵 유발은 관찰되지 않았다. 이상의 결과를 종합하여, 본 시험조건 중 에폭시화 대두유는 in vitro 시험인 Salmonella 균주를 이용한 복귀돌연변이시험과 포유동물 배양세포를 이용한 염색체이상시험 및 in vivo 시험인 마우스를 이용한 소핵시험에서 유전독성을 유발하지 않는 것으로 판단된다.

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목초액 (거성 Y.L.S-95)의 유전독성에 관한 연구 (Studies on the Genetic Toxicity of Guh Sung Y.L.S.-95)

  • 이수용;이광용;윤호권;정은정;김연수;이혜영;이병훈
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제21권2호
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    • pp.107-112
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    • 2006
  • Guh Sung Y.L.S-95 (GS95)는 초산을 주성분으로 하는 목초액으로 본 연구에서는 GS95의 유전독성을 국립독성연구원의 표준작업지침서에 따라 수행하였다. Salmonella typhimurium TA1535, TA1537, TA98, TA100을 이용한 복귀돌연변이시험에서 GS95는 최고농도 $5,000{\mu}g/plate$까지 돌연변이 집락수를 유의적으로 증가시키지 않았다. Chinese hamster lung fibroblast를 이용한 염색체이상 시험에서 GS95는 1.25-5mg/mL의 농도범위까지 음성의 결과를 나타내었다. 또한 ICR mouse를 이용한 소핵시험에서 GS95는 최고농도 5,000mg/kg까지에서 소핵을 가진 다염성적혈구의 출현율이 음성대조군에 비해 유의한 차이를 나타내지 않았다. 이상의 연구결과에 따라 GS95는 상용량에서 유전독성을 유발하지 않을 것으로 사료된다.