Autonomously replicating sequence Binding Factor 1(ABF1) is a DNA-binding protein that specifically recognizes the $RTCRYN_5ACG$ at many sites in the yeast genome including the promoter element, mating-type silencer and ARS. To express the intact full-length ABF1 gene in E. coli, the ABF1 gene has been cloned into pMAL-c2 and His-61, Leu-353 and Leu-360 were substituted with other amino acid. ABF1 fusion proteins of wild type ABF1 and H61A, L353R and L360R nutants were purified by amylose resin affinity chromatography. Fusion protein of MBP and ABF1 was digested by Factor Xa and Characterized by gel retardation assay and complementation test. As aresult, we suggested that other DNA binding motif except atypical inc-finger motif is in the middle region of ABF1.
I. Shear Bond Strength to Air-dried and Remoistened Dentin.. The effect of air-drying and remoistening of acid-conditioned dentin before priming with the primer of All-Bond 2(BISCO. INC., U. S. A.) on shear bond strength(SBS) was investigated. Ninty freshly extracted sound human molars were divided at random into 9 groups of 10 teeth each. SBSs were meaured for acid-conditioned and non-conditioned dentin to which the primer and bonding agent of All-Bond 2 and composite resin(Z-100, 3M Dental Products, U. S. A.) were applied. The following values(Mean${\pm}$ SD, MPa) were obtained for the groups conditioned with 10% phosphoric acid for 15 seconds: Group l(blot dried) $6.7{\pm}4.1$ ; Group 2(10 seconds dried) $16.1{\pm}5.3$ ; Group 3(20 seconds dried) $15.4{\pm}4.8$ ; Group 4(30 seconds dried) $15.2{\pm}6.3$ ; Group 5(10 seconds dried/remoistened) $26.4{\pm}2.6$ ; Group 6(20 seconds dired/remositened) $22.2{\pm}2.7$ ; Group 7(30 seconds dried/remoistened) $21.5{\pm}4.1$. For the non-conditioned groups the values were: Group 8 (blot dried) $13.3{\pm}2.6$ ; Group 9(10 seconds dried) $12.9{\pm}3.5$. The data were analyzed using ANOVA. In the acid-conditioned groups, mean values of SBS for the air-dried specimens(Grps. 2, 3 and 4) and the 20 and 30 seconds dried/remoistened specimens (Grps. 6 and 7) were significantly lower than that of blot dried specimens.(p<0.05) The value for 10 seconds dried/remoistened specimens (Grp. 5), however, was not statistically different compared to that of blot dried specimens.(p>0.05) In the non-conditined groups, there was no statistical difference between blot dried and 10 seconds dried specimens.(p>0.05) The results suggest that the acid-conditioned dentin surface is more vulnerable to dentin bonding when it is air-dried or even remoistened after long period of drying. II. Shear bond stengh to the moistened and primed enamel. The effect of moistening and priming of enamel compared to the air-drying of enamel on the shear bond strength of enamel bonding agent was investigated. The experiment was divided into 4 groups each containing 10 caries-free maxillary incisor teeth. Shear bond strength values were measured for the primed and non-primed enamel to which All-Bond 2 and Z-100 were applied. The following values(MPa) were obtained for the primed groups pretreated with 32 % phosphoric acid for 15 seconds. : Group 1 (10 seconds dried) $29.8{\pm}2.2$ ; Group 2(moistened) $26.8{\pm}5.4$. For the non-primed groups the values were: Group 3(10 seconds dried/primed) $27.6{\pm}5.0$ ; Group 4(mostened/primed) $28.2{\pm}3.5$. The data were subjected to statistical analysis using ANOVA. The results showed that mean shear bond strengths among the experimental groups were not statistically different. (p>0.05) Conclusively, It is suggested that the bonding ability to enamel is not decreased by the moistening and priming of the enamel.
Kim, Joong-Hup;Hong, Il-Khee;Kim, Hyo-Jeong;Jeong, Hyeh-Jean;Choi, Moon-Jeong;Yoon, Chang-No;Jeong, Jin-Hyun
Archives of Pharmacal Research
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v.25
no.6
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pp.801-806
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2002
Cyclicpeptides are important targets in peptide synthesis because of their interesting biological properties. Constraining highly flexible linear peptides by cyclization is one of the mostly widely used approaches to define the bioactive conformation of peptides. Cyclic peptides often have increased receptor affinity and metabolic stability over their linear counterparts. We carried out virtual screening experiment via docking in order to understand the interaction between HLE-Human Leukocyte Elastase and ligand peptide and to identify the sequence that can be a target in various ligand peptides. We made cyclic peptides as a target base on Metlle-Phe sequence having affinity for ligand and receptor active site docking. There are three ways to cyclize certain sequences of amino acids such as Met-lie-Phe-Gly-Ile. First is head-to-tail cyclization method, linking between N-terminal and C-terminal. Second method utilizes amino acid side chain such as thiol functional group in Cys, making a thioether bond. The last one includes an application of resin-substituted amino acids in solid phase reaction. Among the three methods, solid phase reaction showed the greatest yield. Macrocyclization of Fmoc-Met-Ile-Phe-Gly-Ile-OBn after cleavage of Fmoc protection in solution phase was carried out to give macrocyclic compound 5 in about 7% yield. In the contrast with solution phase reaction, solid phase reaction for macrocyclization of Met-Ile-Phe-Gly-Ile-Asp-Tentagel in normal concentrated condition gave macrocyclic compound 7 in more than 35% yield.
Gungor, Ahmet Yalcin;Alkis, Huseyin;Turkkahraman, Hakan
The korean journal of orthodontics
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v.43
no.2
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pp.96-100
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2013
Objective: To evaluate the effects of contamination by either blood or a hemostatic agent on the shear bond strength (SBS) of orthodontic buttons. Methods: We used 45 freshly extracted, non-carious, impacted third molars that were divided into 3 groups of 15. Each tooth was etched with 37% phosphoric acid gel for 30 s. Human blood or the blood stopper agent was applied to the tooth surface in groups I and II, respectively. Group III teeth were untreated (controls). Orthodontic buttons were bonded to the teeth using light-curing composite resin. After bonding, the SBS of the button was determined using a Universal testing machine. Any adhesive remaining after debonding was assessed and scored according to the modified adhesive remnant index (ARI). ANOVA with post-hoc Tukey's test was used to determine significant differences in SBS and Fisher's exact test, to determine significant differences in ARI scores among groups. Results: ANOVA indicated a significant difference between groups (p < 0.001). The highest SBS values were measured in group III ($10.73{\pm}0.96$ MPa). The SBS values for teeth in groups I and II were significantly lower than that of group III (p < 0.001). The lowest SBS values were observed in group I teeth ($4.17{\pm}1.11$ MPa) (p < 0.001). Conclusions: Contamination of tooth surfaces with either blood or hemostatic agent significantly decreased the SBS of orthodontic buttons. When the contamination risk is high, it is recommended to use the blood stopper agent when bonding orthodontic buttons on impacted teeth.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.31
no.9
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pp.775-782
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2009
PP-g-AA-Am nonwoven fabric, which possess anionic exchangeable function, was prepared by chemical modification of carboxyl (-COOH) group of PP-g-AA nonwoven fabric to amine ($-NH_2$) group using diethylene triamine (DETA). Its adsorption characteristics for anionic nutrients including isotherm, kinetics and co-anions were studied by batch adsorption experiments. Adsorption equilibriums of $PO_4$-P on PP-g-AA-Am fabric were well described by the Langmuir isotherm model, and their adsorption energies were ranged 10.3 kJ/mol indicating an ion-exchange process as primary adsorption mechanism. The adsorption selectivity of PP-g-AA-Am nonwoven fabric for anions under competition with each other was in following order: $SO_4\;^{2-}$>$PO_4\;^{3-}$>$NO_3\;^-$>$NO_2\;^-$. Also, all results obtained from this study indicate that the $PO_4$-P removal capacity of PP-g-AA-Am nonwoven fabric was extremely superior to that of PA308 anion-exchange resin.
The purpose of this study is to investigate which current densities and etching times will result in an optimal etching depth and surface roughness when an Ni-Cr-Be alloy is etched with 30% perchloric acid($HClO_4$). For this study, observations were made by means of an optical three-dimensional surface roughness measuring machine and a scanning electron microscope. The etchings took place under the following conditions using current densities of $300mA/cm^2\;450mA/cm^2,\;600mA/cm^2$ and $750mA/cm^2$, and using etching time of three, five, six, seven and nine minutes. Under the conditions, the experiments reached the following conclusions. 1. When the current density is above $450mA/cm^2$ and the etching time is longer than five minutes, the etching depth increased as the current density and etching time increased. And the surface roughness was significantly influenced by the interaction of the current density and etching time. 2. Under the etching conditions of $600mA/cm^2$ and five minutes, the optimal etching depth for a resin cement space and the highest surface roughness for mechanical retention were obtained. The etching depth and surface roughness were $32.86{\mu}m$ and $7.90{\mu}m$, respectively. 3. Observations under the scanning electron microscope showed that both the corrosion at the grain boundary and the corrosion within the grain occurred on the etched surface. It was also observed that the corrosion at the grain boundary became more severe as the current density and etching time increased. In addition. at higher current densities and longer etching times general corrosion appeared.
This study was performed to evaluate the usability of Er:YAG laser for periodontal therapy. Forty dental root slabs ($5{\times}5{\times}2mm^3$) were prepared from human periodontally diseased extracted teeth and grouped into 4 groups: 1) control (root planing only), 2) root planing and irradiated with laser at 30mJ, 3) root planing and irradiated with laser at 60mJ, and 4) root planing and irradiated with laser at 100mJ. The root slabs were embedded in resin block before laser treatment. Er:YAG laser was irradiated under water irrigation with the tip held perpendicular to the root surface in contact mode. After Er:YAG laser irradiation or planing on the root surface, morphological changes have been observed under SEM, and the micro-hardness and Ca/P ratio were compared. 1. In the Control group, the root surface showed the directional change caused by root planing instrumentation, and the presence of smear layer, and no exposure of dentinal tubule was observed. Laser irradiated group showed surface changes with rough dentin surface of niche and depression and dentinal tubule exposure by the elimination of smear layer. 2. The micro-hardness of root surface in the laser irradiated group was higher than the control group. The higher energy output was applied, the higher micro-hardness on root surface was resulted. 3. The higher energy output was applied, the higher Ca/P ratio was observed. The higher Ca/P ratio in 60mJ group and 100mJ group was statistically significantly compared to the control group and the 30mJ group. These results suggest that Er:YAG laser irradiation on the periodontally diseased root surface could remove smear layer and increase the micro-hardness on root surface and Ca/P ratio which contribute to enhance the acid resistance of periodontally treated root surface.
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2001.11a
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pp.16-25
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2001
A genomic library of biphenyl-degrading strain Comamonas sp. SMN4 was constructed by using the cosmid vector pWE15 and introduced into Escherichia coli. Of 1,000 recombinant clones tested, two clones that expressed 2,3-dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase activity were found (named pNB 1 and pNB2). From pNB1 clone, subclone pNA210, demonstrated 2,3-dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase activity, is isolated. 2,3-Dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase (23DBDO, BphC) is an extradiol-type dioxygenase that involved in third step of biphenyl degradation pathway. The nucleotide sequence of the Comamonas sp. SMN4 gene bphC, which encodes 23DBDO, was cloned into a plasmid pQE30. The His-tagged 23DBDO produced by a recombinant Escherichia coli, SG 13009 (pREP4)(pNPC), and purified with a Ni-nitrilotriacetic acid resin affinity column using the His-bind Qiagen system. The His-tagged 23DBDO construction was active. SDS-PAGE analysis of the purified active 23DBDO gave a single band of 32 kDa; this is in agreement with the size of the bphC coding region. The 23DBDO exhibited maximum activity at pH 9.0. The CD data for the pHs, showed that this enzyme had a typical a-helical folding structures at neutral pHs ranged from pH 4.5 to pH 9.0. This structure maintained up to pH 10.5. However, this high stable folding strucure was converted to unfolded structure in acidic region (pH 2.5) or in high pH (pH 12.0). The result of CD spectra observed with pH effects on 23DBDO activity, suggested that charge transition by pH change have affected change of conformational structure for 23DBDO catalytic reaction. The $K_m$ for 2,3-dihydroxybiphenyl, 3-metylcatechol, 4-methylcatechol and catechol was 11.7 $\mu$M, 24 $\mu$M, 50 mM and 625 $\mu$M.
A cDNA encoding a cysteine protease inhibitor (CPI) was isolated from the cDNA library of clamworm Perinereis aibuhitensis Grube. The deduced amino acid sequence analysis showed that the protein had 51%, 48%, and 48% identity with Zgc:153129 from Danio rerio, cystatin B from Theromyzon tessulatum, and the ChainA, stefin B tetramer from Homo sapiens, respectively. The gene was cloned into the intracellular expression vector pET-15b and expressed in Escherichia coli. The recombinant CPI (PA-CPI) was purified by affinity chromatography on Ni-charged resin and ion-exchange chromatography on DEAE-Sepharose FF. The relative molecular mass of PA-CPI was 16 kDa as deduced by SDS-PAGE. Activity analysis showed that the recombinant protein could inhibit the proteolytic activity of papain. A constitutive and secretive expression vector was also constructed, and the cDNA encoding CPI was subcloned into the vector for extracellular expression. Western blotting analysis results showed that the PA-CPI was secreted into the medium. Bioassay demonstrated that E. coli DH5${\alpha}$ harboring pUC18ompAcat-CPI showed a significant difference in mortality to the Asian longhorned beetle Anoplophora glabripennis compared with untransformed E. coli DH5${\alpha}$ and control.
An analytical method for the simultaneous measurement of trace Cu, Sn, and Bi in blood and urine has been investigated by Inductively Coupled Plasma-Mass Spectrometry (ICP-MS). Microwave oven was used for the pretreatment of blood samples using nitric acid and hydrogen peroxide in a closedvessel digestion system with 1 mL whole blood for 8 minutes. Amberlite IRC-718 resin was used as a solid phase in solid-liquid extraction technique for the removal of matrix interferences such as Na, S, P, and other polyatomic ion species. Detection limits for Cu, Sn, and Bi by this method were 0.000375 ng/mL, 0.000297 ng/mL, and 0.000174 ng/mL, respectively. Recoveries of 99.1% for Cu, 102.5% for Sn, and 98.4% for Bi were obtained for the standard spiked NIST SRM 955a blood sample. The developed method was applied for whole real blood and urine samples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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