Biopiles which offer the potential for cost-effective treatment of contaminated soils are above-ground, engineered systems that use oxygen to stimulate the growth and reproduction of aerobic bacteria for degradation of the petroleum constituents adsorbed to soil in excavated soils. This technology involves heaping contaminated soils into piles and stimulating aerobic microbial activity within the soils through the aeration and/or addition of minerals, nutrients, and moisture. Inside the biopile, microbially mediated reactions by blowing or extracting air through the pipes can enhance degradation of the organic contaminants. The influence of a aeration system on the biopile performance was investigated. Air pressure made to compare the efficiency of suction in the pipes showed that there were slightly significant difference between the two piles in the total amount of TPH biodegradation. The normalised degradation rate was, however, considerably higher in the aeration system than in the normal system without aeration, suggesting that the vertical venting method may have improved the efficiency of the biological reactions in the pile.
Cellular uptake of nanoparticles for stem cell labeling and tracking is a critical technique for biomedical therapeutic applications. However, current techniques suffer from low intracellular labeling efficiency and cytotoxic effects, which has led to great interest in the development of a new labeling strategy. Using silica-coated nanoparticles conjugated with rhodamine B isothiocyanate (RITC) (SR), we tested the cellular uptake efficiency, biocompatibility, proliferation or differentiation ability with murine bone marrow derived hematopoietic stem/progenitor cells. The bone marrow hematopoietic cells showed efficient uptake with SR with dose or time dependent manner and also provided a higher uptake on hematopoietic stem/progenitor cells. Biocompatibility tests revealed that the SR had no deleterious effects on cell cytotoxicity, proliferation, or multi-differentiation capacities in vitro and in vivo. SR nanoparticles are advantageous over traditional labeling techniques as they possess a high level of cellular internalization without limiting the biofunctionality of the cells. Therefore, SR provides a useful alternative for gene or drug delivery into hematopoietic stem/progenitor cells for basic research and clinical applications.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제20권2호
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pp.69-74
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2010
Feeding is an important aspect of insect nutrition which in turn supports growth, development, reproduction and survival. The impact of quantitative feeding on nutritional parameters of fifth instar Antheraea mylitta larvae was studied by providing fresh leaves of Terminalia tomentosa for 1 to 4 times a day. All the parameters improved upon providing fresh diets more times over the single diet (1FD). The absolute body weight increased with increase in number of feeds/day significantly (P<0.001). While the maximum weight recorded was 29.61 g in 1FD, the respective weights for two feeds/day (2FD), three feeds/day (3FD) and four feeds/day (4FD) were 39.41 g, 40.63 g and 42.66 g respectively. Feeding period and instar duration were declined (P<0.001) and survival increased significantly (P<0.001) upon increase in the number of diets. Nutritional indices like ingestion, digestion, relative consumption rate (RCR), relative growth rate (RGR) and gain in body weight increased significantly with the increase in number of feeds/day, but approximate digestibility (AD) and efficiency of conversion of ingested food (ECI) declined, while efficiency of conversion of digested food (ECD) did not change.
In general, cloned pigs have been produced using the somatic cell nuclear transfer (SCNT) technique with various types of somatic cells; however, the SCNT technique has disadvantages not only in its low efficiency but also in the development of abnormal clones. This study aimed to compare early embryonic development and quality of SCNT embryos with those of induced pluripotent stem cells (iPSCs) NT embryos (iPSC-NTs). Ear fibroblast cells were used as donor cells and iPSCs were generated from these cells by lentiviral transduction with human six factors (Oct4, Sox2, c-Myc, Nanog, Klf4 and Lin28). Blastocyst formation rate in iPSC-NT (23/258, 8.9%) was significantly lower than that in SCNT (46/175, 26.3%; p < 0.05). Total cell number in blastocysts was similar between two groups, but blastocysts in iPSC-NT had a lower number of apoptotic cells than in SCNT (2.0 ± 0.6 vs. 9.8 ± 2.9, p < 0.05). Quantitative PCR data showed that apoptosis-related genes (bax, caspase-3, and caspase-9) were highly expressed in SCNT than iPSC-NT (p < 0.05). Although an early development rate was low in iPSC-NT, the quality of cloned embryos from porcine iPSC was higher than that of embryos from somatic cells. Therefore, porcine iPSCs could be used as a preferable cell source to create a clone or transgenic animals by using the NT technique.
To improve nuclear transplantation(NT) efficiency and to produce a large scale genetically identical cloned calves, examined the in vitro development capacity after co-culture of bovine oviductal epithelial cells (BOEC) and granulosa cells in TCM-199 supplemented with 10% fetal calf serum (FCS) with early bovine embryos derived from in vitro matured fertilized(IVM-IVF) oocyte. In addition, the age dependence of IVM oocyte on electro-stimulation and the effective electric voltage on in ivtro development of bovine NT embryos were examined. The results obtained were summerized as follows; 1. The cleavage rates of IVM-IVF bovine embryos in co-culture with bovine oviductal epithelial cells and granulosa cells were not significantly different(P<0.05), but the developmental rate into morula and blastocyst stage were different showing 38.3 and 20.2%, respectively. 2. The activation (82.5%) and development in vitro(8.6%) into later embryo stages of the aging oocytes of 32 hours post-maturation (hpm) were significantly higher than those of 24 hpm at direct current (DC) voltage of 1.5kV/cm, 60$\mu$sec pulse duration and 1 pulse time. 3. The fusion rates of NT eggs of 32 hpm following to different DC voltages from range 0.75 to 1.5kV/cm were not differ, but the developmental rate into morula and blastocyst stages at DC voltages of 0.75 and 1.0kV/cm were higher(11.4 and 12.6%, respectively) than those of 1.5kV/cm(0%). From these results, it can be suggested the optimal culture system for in vitro culture of IVM-IVF bovine embryos is a co-culture system with BOEC in TCM-199 supplemented 10% FCS. The effective time and the DC voltage for activation, electrofusion and in vitro development of NT embryos derived from IVM-IVF bovine embryo are 32hpm and 0.75~1.0kV/cm. But to improve NT efficiency, the advanced research (cell cycle synchronization, micromanipulation, culture system, etc.) is needed.
Background: Deficiency of macro and micro-minerals in the ration of dairy cows adversely affects growth, milk production and reproduction efficiency. It is essential to examine mineral concentrations in feeds offered to dairy cows in practical farms. Methods: Two villages from each taluka were selected at random for taking representative samples of feeds, forages and hair. Within the village, help was sought from village milk producers and district animal husbandry officer for identification of 4 to 5 farmers and collection of representative samples. All the samples were processed and analyzed for chemical composition as well as major macro and micro-minerals, using Inductively Coupled Plasma-Optical Emission Spectrometer. Results: Ca content in wheat straw (0.29%), crushed maize (0.02%) and wheat bran (0.12%) was found to be below the critical level (0.30%). The P content in concentrate ingredients was high (0.26-0.96%), but low in dry roughages (0.06-0.12%). Cereal straws (0.14%) and grains (0.12%) were deficient in Mg. Feeds and forages were found to be adequate in K (1.50%). Cereals straws were found to be deficient in S (0.11%). Greens were good source of Cu (12.02 ppm). Wheat straw was found to be low in Zn (18 ppm), but high in Mn (225 ppm) and Fe (509 ppm). Local grasses and azolla green were found to be rich source of Co (>1.00 ppm). Se (0.63 ppm) was present in appreciable quantities in most of the feedstuffs. Conclusions: From the present study, it was apparent that the feeds and forages available in the state of Jharkhand may not meet the requirements for Ca, P, Mg, Cu, Zn and Co in order to sustain a milk production of ~10 kg/day. Therefore, it is necessary to supplement these deficient minerals through area specific mineral mixture in the ration of dairy cows for improving productivity and reproduction efficiency.
Mesenchymal stem cells (MSCs) have been widely used as donor cells for somatic cell nuclear transfer (SCNT) to increase the efficiency of embryo cloning. Since replicative senescence reduces the efficiency of embryo cloning in MSCs during in vitro expansion, transfection of telomerase reverse transcriptase (TERT) into MSCs has been used to suppress the replicative senescence. Here, TERT-transfected MSCs in comparison with early passage MSCs (eMSCs) and sham-transfected MSCs (sMSCs) were used to evaluate the effects of embryo cloning with SCNT in a porcine model. Cloned embryos from tMSC, eMSC, and sMSC groups were indistinguishable in their fusion rate, cleavage rate, total cell number, and gene expression levels of OCT4, SOX2 and NANOG during the blastocyst stage. The blastocyst formation rates of tMSC and sMSC groups were comparable but significantly lower than that of the eMSC group (p < 0.05). In contrast, tMSC and eMSC groups demonstrated significantly reduced apoptotic incidence (p < 0.05), and decreased BAX but increased BCL2 expression in the blastocyst stage compared to the sMSC group (p < 0.05). Therefore, MSCs transfected with telomerase reverse transcriptase do not affect the overall development of the cloned embryos in porcine SCNT, but enables to maintain embryo quality, similar to apoptotic events in SCNT embryos typically achieved by an early passage MSC. This finding offers a bioengineering strategy in improving the porcine cloned embryo quality.
Sang Eun Kim;Jun Sung Lee;Keon Bong Oh;Jeong Ho Hwang
한국동물생명공학회지
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제38권4호
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pp.199-208
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2023
Background: Canine induced pluripotent stem cells (iPSCs) are an attractive source for veterinary regenerative medicine, disease modeling, and drug development. Here we used vitamin C (Vc) to improve the reprogramming efficiency of canine iPSCs, and its functions in the reprogramming process were elucidated. Methods: Retroviral transduction of Oct4, Sox2, Klf4, c-Myc (OSKM), and GFP was employed to induce reprogramming in canine fetal fibroblasts. Following transduction, the culture medium was subsequently replaced with ESC medium containing Vc to determine the effect on reprogramming activity. Results: The number of AP-positive iPSC colonies dramatically increased in culture conditions supplemented with Vc. Vc enhanced the efficacy of retrovirus transduction, which appears to be correlated with enhanced cell proliferation capacity. To confirm the characteristics of the Vc-treated iPSCs, the cells were cultured to passage 5, and pluripotency markers including Oct4, Sox2, Nanog, and Tra-1-60 were observed by immunocytochemistry. The expression of endogenous pluripotent genes (Oct4, Nanog, Rex1, and telomerase) were also verified by PCR. The complete silencing of exogenously transduced human OSKM factors was observed exclusively in canine iPSCs treated with Vc. Canine iPSCs treated with Vc are capable of forming embryoid bodies in vitro and have spontaneously differentiated into three germ layers. Conclusions: Our findings emphasize a straightforward method for enhancing the efficiency of canine iPSC generation and provide insight into the Vc effect on the reprogramming process.
Garole, a prolific small sized sheep breed of West Bengal, was introduced in the Mutton project of the Institute in 1997 to explore the possibility of incorporating fecundity gene(s) into monotocus Malpura sheep of Rajasthan. Results of reproduction and production traits in respect of Garole${\times}$Malpura (G${\times}$M) half-breds have been obtained. Of 35 lambing obtained so far from the ewes of Garole${\times}$Malpura, 45.71% were twin lambing, whereas, Malpura sheep produced mostly single lamb except 2.55% twin lambing on an average. Other reproduction traits in G${\times}$M ewes such as lambing rate, litter size at birth and weaning were considerably improved over Malpura ewes. Results revealed that the fecundity genes responsible for increasing ovulation rate and litter size have been incorporated in to the G${\times}$M genotype and it might prove a valuable germ plasm towards evolving a new prolific strain of sheep. Interestingly, survivability of G${\times}$M half-breds was almost at par with the local Malpura sheep in harsh climatic conditions of semi-arid tropics. The body weights at different ages of G${\times}$M half-breds were on little lower side compared to contemporary Malpura lambs. Average kilogram of lambs weaned/ewe lambed in Malpura and G${\times}$M genetic group was 11.86 and 11.07 kg respectively. In view of minimizing the differences in body weights and kg of lambs weaned/ewe lambed between the two genetic groups, G${\times}$M ewes has to be backcrossed with Malpura rams to raise the inheritance of latter up to 75% level. However, further research is needed to reach on certain conclusions regarding net returns from such crosses.
Md. Samiul Haque;Mohammad Saiful Islam;Myung-Jo You
Journal of Veterinary Science
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제25권3호
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pp.43.1-43.13
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2024
Importance: Haemaphysalis longicornis is an obligate blood-sucking ectoparasite that has gained attention due its role of transmitting medically and veterinary significant pathogens and it is the most common tick species in Republic of Korea. The preferred strategy for controlling ticks is a multi-antigenic vaccination. Testing the efficiency of a combination antigen is a promising method for creating a tick vaccine. Objective: The aim of the current research was to analyze the role of subolesin and enolase in feeding and reproduction of H. longicornis by gene silencing. Methods: In this study, we used RNA interference to silence salivary enolase and subolesin in H. longicornis. Unfed female ticks injected with double-stranded RNA targeting subolesin and enolase were attached and fed normally on the rabbit's ear. Real-time polymerase chain reaction was used to confirm the extent of knockdown. Results: Ticks in the subolesin or enolase dsRNA groups showed knockdown rates of 80% and 60% respectively. Ticks in the combination dsRNA (subolesin and enolase) group showed an 80% knockdown. Knockdown of subolesin and enolase resulted in significant depletion in feeding, blood engorgement weight, attachment rate, and egg laying. Silencing of both resulted in a significant (p < 0.05) reduction in tick engorgement, egg laying, egg hatching (15%), and reproduction. Conclusions and Relevance: Our results suggest that subolesin and enolase are an exciting target for future tick control strategies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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