Bayar, Enkhtuya;Ren, Yuanyuan;Chen, Yinghua;Hu, Yafang;Zhang, Shuncheng;Yu, Xuelian;Fan, Jun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제31권12호
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pp.1732-1740
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2021
Tobacco etch virus protease (TEVp) is a useful tool for removing fusion tags, but wild-type TEVp is less stable under oxidized redox state. In this work, we introduced and combined C19S, C110S and C130S into TEVp variants containing T17S, L56V, N68D, I77V and S135G to improve protein solubility, and S219V to inhibit self-proteolysis. The solubility and cleavage activity of the constructed variants in Escherichia coli strains including BL21(DE3), BL21(DE3)pLys, Rossetta(DE3) and Origami(DE3) under the same induction conditions were analyzed and compared. The desirable soluble amounts, activity, and oxidative stability were identified to be reluctantly favored in the TEVp. Unlike C19S, C110S and C130S hardly impacted on decreasing protein solubility in the BL21(DE3), but they contributed to improved tolerance to the oxidative redox state in vivo and in vitro. After two fusion proteins were cleaved by purified TEVp protein containing double mutations under the oxidized redox state, the refolded disulfide-rich bovine enterokinase catalytic domain or maize peroxidase with enhanced yields were released from the regenerated amorphous cellulose via affinity absorption of the cellulose-binding module as the affinity tag.
Virus and DNA removal in bio-drug manufacturing processes has received a great deal of attention in recent years. Removing of a virus using a membrane process is a promising method, because inactivated virus can be removed from the bio-drug and the process can be used as an additional and security inactivation after the method of general heat-inactivation of the virus in the bio-drug. The FDA and the biopharmaceutical industry have recently announced strict guidelines for impurities of virus and DNA contamination. The regulatory guidelines on residual amounts of DNA in mammalian cell culture products require DNA contamination of less than 100 pg/dose. Therefore, permeation and rejection of DNA through the porous membranes have become important in the application of DNA removal in bio-drug manufacturing using membrane technology. In this study, the permeation of DNA and chromatin through regenerated cellulose hollow fibers that have a mean pore diameter of 15 nm was investigated.
It is well known that the membrane separation process combined with surfactant micelle (micellar-enhanced ultrafiltration) or polyelectrolyte (polyelectrolyte-enhanced ultrafiltration) can remove heavy metals effectively. However, the environmental hazard of surfactant or polyelectrolyte remained in effluent is a serious disadvantage of these methods. In this study, humic substances (HS) were used as complexing agents for metal removal instead of synthetic chemicals. The HS are a sort of natural organic matters which are biodegradable and abundant in natural environment. And the functional groups such as carboxyl groups and phenols in HS can bind with the cationic radionuclides and form complexes. Therefore separation process using them will be more environmental-friendly. The effects of concentration of HS and pH on the removal of cobalt were investigated. The ultrafiltration process was applied to the separation of the cobalt - HS complexes from the aqueous stream. At the concentration of > 3 g/L of HS and pH of 6, over 95 % of cobalt was removed by regenerated cellulose membrane of molecular weight cut-off (MWCO) 3,000. As the concentration of HS increased, the removal of cobalt also was improved because of increase in biding sites (functional groups). The cobalt removal increased from 72.5 % to 97.5 % when pH increased from 4 to 8 at the concentration of 3 g/L HS because of increase in HS solubility and cobalt hydroxide precipitation. In the presence of NaCl, the removal efficiency of cobalt decreased.
Lyocell is a regenerated cellulose fiber manufactured by an environmentally-friendly process. Since the fiber has more crystalline region compared to rayon, lyocell shows higher wet-strength than rayon. Although fibril generation of lyocell is lower than that of rayon because of the reason, the fibril generated during the wet process deteriorates the smooth look and soft touch of the fabric. The efficient way to remove the fibril yet retain the strength property was investigated in this work. In order to scour and remove the fibril from the fabric, cellulase enzymes were introduced and the traditional scouring was carried to be compared. Weight loss, dye-ability, and strength of treated fabric were measured after the treatments. Scanning electron microscopy was used to observe the surface of the fiber. Among the cellulases used in this work, Denimax 992L showed the best results for removal of fibril with low weight loss and tensile strength loss. The optimal conditions for the enzymatic treatment could be chosen depending on a characteristic for final purpose of the lyocell product.
Ennigrou, Dorra Jellouli;Ali, Mourad Ben Sik;Dhahbi, Mahmoud;Mokhtar, Ferid
Membrane and Water Treatment
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제5권3호
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pp.183-195
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2014
The efficiency of two metal ions (cadmium, zinc) removal from aqueous solutions by ultrafiltration (UF) and Polymer Enhanced Ultrafiltration (PEUF) processes were investigated in this work. The UF and PEUF studies were carried out using an ultrafiltration tangential cell system equipped with 5.000 MWCO regenerated cellulose. A water-soluble polymer: the polyacrylic acid (PAA) was used as complexant for PEUF experiments. The effects of transmembrane pressure, pH, metal ions and loading ratio on permeate fluxes and metal ions removals were evaluated. In UF process, permeate fluxes increase linearly with increasing pH for different transmembrane pressure, which may be the consequence of the formation of soluble metal hydroxyl complexes in the aqueous phase. In PEUF process, above pH 5.0, the Cd(II) retention reaches a plateau at 90% and Zn(II) at 80% for L = 5. Also, cadmium retention at different L is greater than zinc retention at pH varying from 5.0 to 9.0. In a mixture solution, cadmium retention is higher than zinc for different loading ratio, this is due to interactions between carboxylic groups of PAA and metal ions and more important with cadmium ions.
The interactions of water soluble polymers with dye are studied by ultrafiltration using a molecular weight cut off of 10 KDa regenerated cellulose ultrafiltration membrane. Two water-soluble polymers, namely Poly (Sodium-4 Styrenesulfonate) (PSS) and Poly (Vinyl Alcohol) (PVA) were selected for this study. The effects of process parameters, such as, polyelectrolyte concentrations, transmembrane pressure, ionic strength and pH of solution on dye retention and permeation flux were examined. PSS enhanced ultrafiltration achieved dye retention as high as 99% as a result of complexation between polyanion containing aromatic groups and cationic dye. This result was confirmed by the red shift. The retention of dye decreases as the salt concentration increases, a high retention was obtained at pH above 4. However, in case of PVA, relatively low retention (50%) was observed. Ionic strength and pH has no significant effect on the removal of MB. The permeate flux depended slightly on polyelectrolytes concentrations, transmembrane pressure, salt concentration and pH.
This case report describes a rare occurrence of pyogenic granuloma (PG) in the hard palate deviating from its typical gingival location that led to the formation of an alveolar cleft. The aggressive growth pattern of the lesion, with atypical progression from a pedunculated nodule to an alveolar cleft, raised concern. The diagnosis was based on magnetic resonance imaging and computed tomography findings, which revealed a tadpole-shaped lesion originating from the midline hard palate. The differential diagnosis included a minor salivary gland tumor. Surgical excision was performed under general anesthesia and resulted in a mucosal defect without nasolabial fistula formation or bone exposure. The palatal defect was packed with oxidized regenerated cellulose and closed with Vicryl Rapide sutures, both of which contributed to the patient's successful outcomes. Our comprehensive approach, extending across the stages of surgical planning, execution, and postoperative care, demonstrated the advantages of a multidisciplinary strategy for the accurate diagnosis and effective treatment of palatal PGs. This report makes a meaningful contribution to the existing literature on common oral lesions by emphasizing the importance of a broad differential diagnosis and a systematic approach to oral pathologies. It also raises clinical awareness of PGs with atypical presentations and the diagnostic challenge that they pose.
전기장에서의 유기산의 이동성향을 파악하기 위하여 아세트산을 대상으로 하여 한외여과막과 이온교 환막을 사용한 전기투석에 대해 연구하였다. 전기장에 의한 한외여과막에서의 전기적 삼투흐름은 전반적으로 anodic side에서 cathodic side로 진행되었다. 막을 통한 이온의 순수이동은 전기척 삼투흐름 에 대한 전기적 이동속도로부터 결정되였으며, 실험 에서의 순수 전기적 삼투흐름방향은 아세트산의 이 동에 많은 영향을 미치는 것으로 사료된다. 격막을 통한 전기척 삼투흐름에 의해 특성화된 한외여과막의 표면전하는 모두 음전하를 띠었다. 각기 재질이 다른 regenerated celiuloseCYM series)와 polysul foneCPM series) 재질의 한외여과막을 사용한 실험에서 아세트산이온의 이통양상에 매우 다르게 나타 났으며 전반적으로 YM series의 한외 여과막에서 아세트산이옹의 이동이 원할한 것으로 나타났다. 이는 전기적 삼투흐름측정에 따르면 YM series의 격막에 비해 PM series의 격막이 전해질용액에셔 상대적으로 큰 음전하를 띠는 것으로 추측된다. 아세트산 이온의 이동은 전기장의 세기, 전극사이 의 거리, 전극표면적, 이온세기, 온도, 격막의 pore 크기등에 영향을 받았으며, 일정한 전류장의 조건에서 이온교환막에서의 아세트산 이온의 이통은 한외 여과막에 비하여 1.5 에서 3배 수준이였다. 전기장 펄스형성에 의한 이온교환막에서의 아세트산이온의 이동은 10sec/hr의 펄스전기장에서 약 10%의 증가 를보였다.
Severe한 혈우병 B 환아가 소아과에 입원하여 세계혈우병연맹(World Federation of Hemophilia, WFH) 지침서에 따라서 응고인자 수준을 유지하면서 다수의 발치를 포함한 관혈적 치과 치료를 받았다. 이와 같이 혈우병 환자에서 다수의 발치를 시행할 때 주기적인 혈액검사를 통한 응고인자 수준의 관리와 복잡한 의과적 처치가 요구된다. 따라서 다수의 발치가 요구되는 경우 전신마취 하에 가능한 모든 치과치료를 시행하는 것이 효과적이고 효율적인 방법이 될 수 있다.
Seol, Su Yeon;Kim, Bo Ram;Hong, Se Chul;Yoo, Ji Hyun;Lee, Kun Hee;Lee, Ho Joo;Park, Jong Dae;Pyo, Mi Kyung
Natural Product Sciences
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제20권1호
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pp.58-64
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2014
In this study, edible protopanaxadiol saponin enriched fraction were prepared by ultrafiltration (UF). Ginseng extract was prepared from mixtures of ginseng main root and rootlet (root: rootlet = 4 : 6). UF system was used the four-piston Diaphragm pump equipped with 5 kDa pore size Hydrosart Cassette made by regenerated cellulose acetate (CA) or 3 kDa pore size Hollow Fiber cartridge made by polyethersulfone (PES). Total ginsenoside contents of concentrated fraction by UF system was found to higher, compared to before those of untreated method. Especially, processing of UF showed the increase of PPD-type ginsenoside, while PPT-type ginsenoside was gradually decreased by both 3 kDa and 5 kDa membrane. After removal of 80% water by the 5 kDa Hydrosart Cassette and by 3 kDa Hollow Fiber cartridge, ginsenoside Rb1 content was higher 37.2 mg/g and 25.3 mg/g than 20.8 mg/g in untreated process. The ratio of Rb1 to Rg1 (Rb1/Rg1) and PPD- to PPT- type ginsenoside (PPD/PPT) were higher in inner fluid of ginseng extract after UF by 3 kDa cartridge (47.1 and 23.5, respectively) and 5 kDa Cassette (25.3 and 11.9, respectively) than those of before UF (5.7 and 3.7, respectively). PPD-type ginsenoside enriched fraction by UF system could be developed as a new ginseng material in food and cosmetic industrials.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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