In order to study regulation of rbcL gene expression, rbcL gene of chloroplast DNA (Cp DNA) from maize was cloned. Cp DNA was isolated from intact chloroplast and digested with BamHI. BamHI 9 fragment of Cp DNA containing rbcL gene was ligated to pUC19 and transformed into E. coli DH5a. This recombinant plasmid was named pRLYSl. pRLYSl was hybridized with a part of rbcL gene from rice and digested with restriction enzyme BamHI, HindIIl, and PstI. From these results, it was confirmed that pRLYS1 contains intact rbcL gene and orientation of BamHI 9 fragment of Cp DNA in pRLYS1 was determined.rmined.
To know the changes of rbcL mRNA level by illumination, Northern hybridization analysis was performed with maize (Zea mays L.cv. Golden X Bantam). The average level of rbcL. mRNA in the light-grown shoots was 3.1 times higher than that of the dark-grown shoots after 6 to 10 growth days. The maximum difference of rbcL mRNA level between the dark-grown and the light-grown shoots was 5.1 folds. These results indicate that accumulation of rbcL mRNAin maize shoots is induced by light. Since the transcriptional DNA binding proteins and their cognate promoter elements, we carried out gel-retardation assays to elucidate the specific binding proteins on the rbcL promoter. It was found that plastid proteins of light-grown shoots bound to the R2 DNA fragment (-33 to -229) and R3 DNA fragment (-230 to -418 from ATG) of the rbcL promoter. From the results of competitive binding assays and heat or protease treatments, it was demonstrated that the bindings were sequence-specific DNA-protein interactions. Therefore, it could be concluded that the rbcL promoter region has at least two specific recognition sites for plastid proteins.
In order to investigate the effects of plant hormones on the quantitative changes in mRNA of maize (Zea mays L.) rbcL, we used GA3, IAA, ABA and BAP. GA3 at the concentration of 10-4M resulted in decrease in rbcL gene transcript to 62%. IAA decreased the amount of rbcL transcript to about 70% at all the hormone concentrations tested. ABA did not cause a noticeable change in the amount of rbcL transcript, but BAP increased the amount of rbcL transcript to 153% at 10-8M and 123% at 10-5M, respectively. Thus, it appears that BAP is related to the increase in the amount of rbcL transcript by light.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.9
no.6
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pp.1733-1738
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2008
The treatment efficiency of rotating biological contactors (RBCs) for the high strength of dairy wastewater was investigated. Two different systems were conducted composing of a single RBC with tapered aeration reactors for the system A and a sequential RBCs following tapered aeration reactors for the system B. Experiments using dairy wastewater were conducted for 50 days period of time, in which hydraulic rates were maintained at the constant ratios of 346L per day and variable BOD concentrations were at the range from 1,358mg/L to 829mg/L, the $COD_{cr}$, concentration of the range were from 2,384mg/L to 1,329mg/L, the range of T-N concentrations was from 66mg/L to 38mg/L, and 50% of internal recycle and 50% of sludge return were performed. Results indicated that the removal efficiencies of the system B were higher than those of the system A. The removal efficiencies of system A for the BOD, $COD_{cr}$, T-N and T-P were 97.8%, 96.7%, 87.2% and 82%, respectively. The removal efficiencies of system B for the BOD, $COD_{cr}$, T-N and T-P were as of 98.5%, 98.5%, 91.3% and 89%.
The DNA fragment containing ginseng ribulose-1,5-bisphosphate carboxytase/oxygenase large subunit(rbcL) gene was cloned from the ginseng chloroplast EcoRl library by colony lift hybridization with tobacco rbcL gene probe. From the screened clone, the DNA fragment containing ginseng rbcL gene was digested with several restriction enzyme and analyzed by Southern blot hybridization for the construction of restriction map. The ginseng rbcL gene fragment was subcloned in pBluescript II SK + vector and sequence analysis was performed. The nucleotide sequence of ginseng rbcL gene was compared with those of petunia, tobacco, alfalfa, rice and barley, which showed a homology of 93.1%, 95.2%, 90.5%, 85.5% and 84.3%, respectively.
Geraldino, Paul John L.;Yang, Eun-Chan;Bu, Sung-Min
ALGAE
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v.21
no.4
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pp.417-423
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2006
Morphology and molecular phylogeny of a red algal species, Hypnea flexicaulis that is recently described from Japan, were investigated based on 23 collections from Korea (21), Taiwan (1), and the Philippines (1). Hypnea flexicaulis has percurrent axes with flexuous, antler-like branches which have wide branching angles, and abaxially curved ultimate branchlets. In order to study DNA divergence and phylogenetic relationships of the species, we determined plastid rbcL and mitochondrial cox1 sequences from the 23 collections. All 21 specimens from five different locations in Korea were almost identical to H. flexicaulis from Japan in rbcL sequences. Although there was a difference of three to five base pairs (bp) between samples from Korea and the Philippines or between the Philippines and Taiwan, Bayesian analyses of the rbcL data showed that all specimens from Korea, Japan, the Philippines, and Taiwan were strongly monophyletic. However, it is interesting that specimens from the Philippines differed by 31-34 base pairs in mitochondrial cox1 gene from those of materials from Korea and Taiwan, which differed by one to seven bp in rbcL between them. Although H. boergesenii is different from H. flexicaulis in having many antler-like branchlets, both appeared as sisters in all analyses of the rbcL data. This is the first report of H. flexicaulis from Korea based on morphology, rbcL, and cox1 gene sequences.
A universal DNA barcoding for agricultural noxious weeds is a powerful technique for species identification without morphological knowledge, by using short sections of DNA from a specific region of the genome. Two standard barcode markers, chloroplast rbcL and matK, and a supplementary nuclear ribosomal Internal Transcribed Spacer (ITS) region were used to examine the effectiveness of the markers for Pooideae barcoding using 163 individuals of 29 taxa across 16 genera of Korean Pooideae. The rbcL and ITS revealed a good level of amplification and sequencing success while matK did not. Barcode gaps were 78.6% for rbcL, 96.2% for matK, and 91.7% for ITS, respectively. Resolving powers were 89.3% for rbcL, 92.3% for matK, and 79.1% for ITS. The matK obtained the best both barcode gap and resolving power. However, it should be considered not to employ matK for Pooideae barcode because of low rate of PCR amplification and sequencing success. As a single DNA marker, rbcL and ITS were reasonable for Pooideae barcode. Barcode gap and resolving power were increased when ITS was incorporated into the rbcL. The barcode sequences were deposited to the National Center for Biotechnology Information (NCBI) database for public use.
This study was carried out to confirm the phylogenetic relationships in Korean Rhus species. Sequences from internal transcribed spacers (ITS) of nuclear ribosomal DNA and rbcL gene of chloroplast DNA were determined. Cotinus coggygria was selected as outgroup because it is closest allied with Rhus in Anacardiaceae. Also, ingroup was limited as six Korean Rhus species. ITS 1 sequences in six species of Rhus and one species of Cotinus ranged from 246 to 253 bp and ITS 2 sequences from 234 to 244 bp. Concerning the G+C content of the studied taxa, ITS 1 sequences ranged from 58.0 to 68.13% and ITS 2 from 59.75 to 68.46%. On the other hand, rbcL sequences were same size in the all species examined by 1,428 bp. G+C contents of rbcL sequences were ranged from 43.56 to 43.77% which means there are nearly no different from interspecies each other. Phylogenetic tree strongly supports the colse relationships between R. succedanea and R. sylvestris. Rhus javanica and Cotinus coggygria were also closely allied with each other in ITS and rbcL trees. Therefore, R. javanica was regarded as most primitive species among the Korean Rhus species. ITS 1 region of nuclear ribosomal DNA was suggested as very useful taxonomical marker for genus Rhus.
Using rotating biological contactor(RBC) with artificial endogenous stage and aerobic fixed biofilm reactor(AFBR), organic material removal and biological nitrification of piggery wastewater has been studied at a pilot plant. RBC was operated in the endogenous phase at a interval of every 25 days. The concentration of COD, BOD and TKN in influent wastewater were from 2,940 to 3,800 mg/L, from 1,190 to 1,850 mg/L and from 486 to 754 mg/L respectively. The maximum active biomass content represented as VSS per unit aera was $2.0mg/cm$^{2}$ and biofilm dry density of $17mg/cm^{3}$ was observed at biofilm thickness of $900{\;}{\mu}m$. It was observed that the pilot scale RBC/AFBR process exhibited 72 percentage to 93 percentage of BOD removal, In order to obtain more than 90 percentage of BOD removal, the organic loading rate to the RBC/AFBR process should be maintained less than $0.09{\;}m^{3}/m^{2}{\cdot}day(125.9g{;\}BOD/m^{3}{\cdot}d$. The TKN removal efficiencies was from 45.5 to 90.9 percentage according to vary influent loading rate, It was estimated that the RBC/AFBR process consumed approximately 6.2 mg/L(as $CaCO_{3}$) of alkalinity per 1 mg/L of $NH_{3}$-N oxidized as the nitrification took piace.
Lee, Young Mi;Moon, Byeong Cheol;Ji, Yunui;Kim, Wook Jin;Kim, Ho Kyoung
The Korea Journal of Herbology
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v.28
no.6
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pp.53-58
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2013
Objectives : Pinelliae Tuber has been used as a typical unauthentic herbal medicines. Due to the morphological similarity between Pinelliae Tuber and adulterants, the correct authentication is very difficult. Therefore, we introduced DNA barcode to establish a powerful tool for the authentication of Pinelliae Tuner from adulterants. Methods : To obtain DNA barcode regions, genomic DNA was extracted from nineteen specimens of Pinellia ternata, Pinellia pedatisecta, Pinellia tripartita, and Typhonium flagelliforme, and matK and rbcL genes were amplified. For identification of species specific sequences and analysis phylogenetic relationship, a comparative analysis were performed by the ClastalW and UPGMA based on entire sequences of matK and rbcL genes, respectively. Results : In comparison of two DNA barcode sequences, we elucidated the phylogenetic relationship showing distinct four groups depending on species and identified 40 and 20 species specific nucleotides enough to distinguish each species from matK and rbcL gene, respectively. The sequence differences at the corresponding positions were avaliable genetic marker nulceotides to discriminate the correct species among analyzed four species. These results indicated that phylogentic and comparative analysis of matK and rbcL genes are useful genetic markers to authenticate Pinelliae Tubers. Conclusions : The marker nucleotides enough to distinguish P. ternata, P. tripatrita, P. peditisecta, and T. flagelliform, were observed at 40 positions in matK gene and 20 positions in rbcL gene sequence, respectively. These differences can be used to authenticate Pinelliae Tuber from adulterants as well as discriminate each four species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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