꿀벌의 수분작용이 콩 품종별 수량 및 수량구성요소에 미치는 영향을 구명하기 위하여 1990년부터 1991년까지 2년간 경북농촌진흥원 망사하우스에서 단엽콩, 무한콩, 황금콩, 밀양콩, 팔달콩 및 단경콩의 6개품종을 공시하여 꿀벌을 방사처리 하여 조사한 실험 결과는 다음과 같다. 콩꽃에 대한 꿀벌의 방화회수는 노지포장에 비해 방사구에서 58% 많았으며 시간별로는 노지포장, 방사구 모두 오전 10시에 가장 많았다. 주당협수 및 결협율은 무방사구에 비해 방사구가 증가 되었는데, 팔달콩과 단경콩과 무한콩은 3립협 비율이, 황금콩과 밀양콩은 1립협 비율이 증가 되었으나 팔달콩과 단경콩은 3립협 비율이 감소되었다. 그러나 2립협 비율은 품종간에 일정한 경향이 없었다. 콩수량은 무방사구에 비해 방사구가 0~12% 증수되었는데, 특히 팔달콩과 단경콩은 꿀벌 방사에 의한 중수효과가 컸었다. 콩 hybrid주 비율은 무방사구에 비해 방사구에서 증가되었는데 팔달콩과 단경콩에서 hybrid주 비율이 높았다. 콩 개화기간과 hybrid주 비율과는 부의 상관관계가 인정되었다.
A single uniform population of specific, saturable, high affinity binding site of $[^3H]QNB$ guinuclidinyl benzilate(QNB) was identified in the rat cerebral microsomes. The Kd value(37.2 pM) for $[^3H]QNB$ calculated from the kinetically derived rate constants was in agreement with the Kd value(48.9 pM) determined by analysis of saturation isotherms at various receptor concentrations. Dimenhydrinate(DMH), histamine $H_1-blocker$, increased Kd value for $[^3H]QNB$ QNB without affecting the binding site concentrations and this effect resulted from the ability of DMH to slow $[^3H]QNB-receptor$ association. Pirenzepine inhibition curve of $[^3H]QNB$ binding was shallow(nH = 0.52) indicating the presence of two receptor subtypes with high ($M_1-site$) and low($M_2-site$) affinity for pirenzepine. Analysis of these inhibition curves yielded that 68% of the total receptor populations were of the $M_1-subtype$ and the remaining 32% of the $M_2-subtype$. Ki values for the $M_1-$ and $M_2-subtypes$ were 2.42 nM and 629.3 nM, respectively. Ki values for $H_1-blockers$ that inhibited $[^3H]QNB$ binding varied with a wide range ($0.02-2.5\;{\mu}M$). The Pseudo-Hill coefficients for inhibition of $[^3H]QNB$ binding by most of $H_1-blockers$ examined except for oxomemazine inhibition of $[^3H]QNB$ binding were close to one. The inhibition curve for oxomemazine in competition with $[^3H]QNB$ was shallow(nH = 0.74) indicating the presence of two receptor populations with different affinities for this drug. The proportion of high and low affinity was 33:67. The Ki values for oxomemazine were $0.045{\pm}0.016\;{\mu}M$ for high affinity and $1.145{\pm}0.232\;{\mu}M$ for low affinity sites. These data indicate that muscarinic receptor blocking potency of $H_1-blockers$ varies widely between different drugs and that most of $H_1-blockers$ examined are nonselective antagonist for the muscarinic receptor subtypes, whereas oxomemazine might be capable of distinguishing between subclasses of muscarinic receptor.
$Nokyangbotang^{TM}$ (NYBT) is a kind of powerful food for health and have been drunk at a oral dose of 80 ml (99.5 mg) three times per day: It has not been well studied about the anti-fatigue and hepatoprotective activity. In this experiments, we evaluated pathophysiologically the effect of NYBT on swimming time in mouse and hepatoprotective activity in rats intoxicated with carbon-tetrachloride. NYBT was nontoxic in orally acute toxicity test ($LD_{50}$, 320 ml/60 kg): a nontoxic food in more four times of one-shoot dosage (80 ml) to human. Weight-loaded forced swimming test was carried out to measure the swimming time of mice with a 4% load of body weight in plastic cylinder (diameter $10{\;}cm{\;}{\times}{\;}height{\;}20{\;}cm$) on water bath at $25^{\circ}C$, and the anti-fatigue activity represented the ratio of swimming time of experimental group to that of control group. NYBT had dose-dependent anti-fatigue activity Mice administered NYBT at a dose of 320 ml/60 kg once daily for 5 days could swim about two times more than control. Hepatoprotective activities of NYBT were examined by the determination of malonedialdehyde (MDA) and pathological survey in liver and liver function test of rat intoxicated with $CCl_4$ at i.m. dose of 2 ml/kg once daily for 7days. NYBT decreased dose-dependently thiobarbituric acid reactive substance: Oral administration of NYBT at a dose of 20 ml/60 kg was $38.51{\;}{\pm}{\;}3.02$ nmol MDA/g of tissue, that of 80 ml/60 kg was $33.76{\;}{\pm}{\;} 1.84$ nmol MDA/g of tissue, and that of 320 ml/60 kg was $32.87{\;}{\pm}{\;}1.90$ nmol MDA/g of tissue as compared with control group ($43.61{\;}{\pm}{\;}2.85$ nmol MDA/g of tissue). All rats administered NYBT at a dose of 320 ml/60 kg were survival as compared with 40% survival of control animals, and GPT activity of rats administered NYBT at a dose of 80 ml/60 kg was decreased as compared with control. In histopathological survey, NYBT improved slightly the fatty changes of hepatocytes around centrilobular area. These results suggest that NYBT has anti-fatigue and hepatoprotective activity in rats and mice.
The induction of hepatic cytochromes P450 and metabolic effects have been examined in male and female Sprague-Dawley rats following treatment with either phenobarbital or 3-methylcholanthrene. Hepatic cytochrome P450 levels were higher in males than in females by ~40%. Treatment of male and female rats with phenobarbital or 3-methylcholanthrene resulted in an ~1.6 and 2-fold increase, respectively, in heptic microsomal cytochrome P450 levels in both sexes, relative to untreated animals. Immunoblot analyses were performed to compare sex-related changes in P450 levels. Hepatic P45IIB1 levels in males were greater than those in females following phenobarbital treatment. 3-Methylcholanthrene-induced male hepatic microsomes exhibited greater levels of P450 females failed to exhibit a band. Mab PCN 2-13-1 against P-45-IIIA recognized an intense in uninduced microsomes from female rats. The levels of P450IIIA in males were increased 2 to 3-fold following treatment with phenobarbital, while the increase of IIIA levels in females by phenobarbital was minimal, as monitored by immunoblot analysis. Solid phase radiommunoassay using monoclonal antibodies supported the results of immunoblot analysis. Phenobarbital treatment caused a 6.5-fold increase in the monoclonal iantibody binding to IIBI in males, whereas treatment of females with phenobarbital resulted of IA levels by 3-methylcholanthrene was also greater in females than in males (10-vs. 8-fold) although the levels of induced IA were comparable inboth sexes, as assessed by radiommunoassay. Radioimmunoassay also showed that hepatic IIEI level was 1.5-fold higher in males than in females and that either phenobarbital or 3-methylcholanthrene treatment caused 80% to 40% decrease in IIEL levels, relative to control, in both sexes. Sex-related metabolic activities were examined in hepatic microsomes. Hexobarbital hydroxylase activity was 2-to 3-fold higher in uninduced microsomes from males than that from females. This hydroxylase activity was increased 2-and 3-fold in males and females, respectively, following phenobarbital treatment, as compared to controls. Addition females produced 64% and 84% inhibition of hexobarbital oxidation, respectively. Aryl hydrocarbon hydroxylase activity was increased -12 and 26-fold in males and females respectively. Following phenobarbital treatment, as compared to controls. Addition of anti-P450IIB1 antibody to phenobarbital-induced hepatic microsomes from males and females produced 64% and 84% inhibition of hexobarbital oxidation, respectively. Aryl hydrocarbon hydroxylase activity was increased -12 and 26 fold in males and females, respectively, following 3-methylcholanthrene treatment relative to controls. The anti-P-450IA antibody inhibitable rate of aryl hydrocarbon hydroxylase activity was comparable in both sexes following 3-methylcholanthrene treatment relative to controls. The anti-P450LA antibody inhibitable rate of aryl hydrocarbon hydroxylase activity was comparable in both sexes following 3-methylcholanthrene treatment (-70%). These results demonstrate that levels of hepatic P450IIB1 or P450IA are greater in male than in female for untreated, phenobarbital-or-3-methylcholanthrene treated rats. In addition, the relative for untreated phenobarbital-or 3-methylcholanthrene treated rats. In addition, the relative increase of phenobarbital-or 3-methylcholanthrene treated rats. In addition, the relative increase of phenobarbital-or 3-methylcholanthrene treated rats. In addition, the relative increase of P450IIB1 or IA phenobarbital or 3-methylcholanthrene is more significant in females.
본 연구는 화장품에서 빈번히 사용되고 있는 다양한 자극원에 대한 녹두추출물의 자극완화 효과를 알아보기 위한 임상연구에 관한 것이다. 녹두는 해독 작용이 탁월하여 예로부터 민간요법이나 화장료의 재료로 사용되어 왔다. 그러나, 녹두의 생물학적인 효능 및 구성 성분을 구체적으로 밝혀낸 연구는 전무한 실정이다.. 우리는 기존의 연구를 통하여 녹두의 에탄을 추출물이 항산화 및 항염증 효과가 우수한 것을 확인하고 이러한 효능을 제공하는 유효물질인 비텍신(vitexin)과 이소비텍신(isovitexin)을 분리해낸 바 있다. 본 연구에서는 녹두추출물의 항염증 기작을 살펴보고자 흰쥐 복강 비만세포로부터의 항원 유도성 히스타민 유리 억제능 및 5-lipoxygenase 활성 억제능을 측정하였다. 그 결과 녹두추출물은 농도 의존적으로 히스타민 유리를 억제시켰지만 5-lipoxygenase 활성을 억제하는 효과는 나타내지 않았다. 또한, 현재 화장품에 널리 사용되고 있는 자극 유발 물질인 lactic acid, retinol, 방부제 등에 대한 녹두추출물의 자극완화 효과를 알아보기 위하여 다양한 임상 연구를 수행하였다. 20명의 피험자를 대상으로 실시한 인체 첩포시험 결과, 5.0% lactic acid, 4000 IU retinol, 1.0% Preservative mixture가 들어간 제형에 2.0% 녹두추출눌을 첨가할 경우 각각 60%, 30%, 50% 정도의 우수한 자극 억제 효과를 보여주었으며, 주관적인 자극을 평가하는 피부 자극감시험 결과도 2.0% 녹두추출물을 함유하는 제형에서 약 50∼30%의 자극완화 효과를 보여주었다. 마지막으로, 30명의 피험자를 대상으로 4주간 실시한 double-blind usage test 결과 역시 녹두추출물을 화장품에 사용하였을 경우 우수한 항자극 효과를 보임을 확인하였다.
자연발생적 고혈압 흰쥐에 STZ로 당뇨를 유발한 고혈압-당뇨 질환모델에서 고려홍삼 조사포닌분획과 비사포닌 분획간의 신장보호 활성을 비교해 보았다. STA 65mg/kg용량을 투여한 후 3일에 네 그룹으로 나누어 본 실험에 임하였다. 신장비대에 대한 저해 활성을 비교해 보았을 때 GTS와 GNS 각각 12, 13% 억제 활성을 나타내었고 두 군간에는 유의적인 차이를 보이지 않았다. 한편 요 중 요소질소의 배설은 GNS 투여군에서는 69% 증가(p<0.05)한 반면 GTS 투여군은 31%만이 증가하였다. 혈중 포도당, 콩 콜레스테롤 및 중성지방의 경우는 고혈압-당뇨 대조군과 비교시 홍삼투여군 두군 모두에서 유의한 차이를 발견할 수 없었다. 반면 oxidative stress를 저해하는 효소인 SOD 활성에 있어서는 GNS투여군에서 대조군에 비해 17%유의하게 상승하는 활성을 보여주었다. 신장비대의 지표인 TGG-$\beta$1, fibronectin그리고 upstream의 MEPK인 p-38, ERK 등의 발현을 그룹간 비교해 본 결과 모든 지표에서 비사포닌 분획이 사포닌 분획에 비해 우수한 억제활성을 나타내었다. TGF-$\beta$1의 mRNA 및 단백질의 발현을 살펴보았을 때 GNS 투여군은 각각 33%, 91% 억제활성을 나타낸 반면 GTS 투여군은 각각 5%, 65% 억제활성을 나타내었다. Fibronectin 단백질의 발현에서도 GNS 투여군은 87% 억제 활성을 나타낸 반면 GTS 투여군은 28% 저해활성을 나타내었다. 본 실험의 결과를 종합해보면 고려홍삼의 신장보호 활성은 사포닌 분획보다는 비사포닌 분획에 함유된 성분에 의해 일어나는 효과가 아닌가 추측된다.
Background: To investigate the effect of pectinase-treated Panax ginseng (GINST) in cellular and male subfertility animal models. Methods: Hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced mouse spermatocyte GC-2spd cells were used as an in vitro model. Cell viability was measured using MTT assay. For the in vivo study, GINST (200 mg/kg) mixed with a regular pellet diet was administered orally for 4 mo, and the changes in the mRNA and protein expression level of antioxidative and spermatogenic genes in young and aged control rats were compared using real-time reverse transcription polymerase chain reaction and western blotting. Results: GINST treatment ($50{\mu}g/mL$, $100{\mu}g/mL$, and $200{\mu}g/mL$) significantly (p < 0.05) inhibited the $H_2O_2$-induced ($200{\mu}M$) cytotoxicity in GC-2spd cells. Furthermore, GINST ($50{\mu}g/mL$ and $100{\mu}g/mL$) significantly (p < 0.05) ameliorated the $H_2O_2$-induced decrease in the expression level of antioxidant enzymes (peroxiredoxin 3 and 4, glutathione S-transferase m5, and glutathione peroxidase 4), spermatogenesis-related protein such as inhibin-${\alpha}$, and specific sex hormone receptors (androgen receptor, luteinizing hormone receptor, and follicle-stimulating hormone receptor) in GC-2spd cells. Similarly, the altered expression level of the above mentioned genes and of spermatogenesis-related nectin-2 and cAMP response element-binding protein in aged rat testes was ameliorated with GINST (200 mg/kg) treatment. Taken together, GINST attenuated $H_2O_2$-induced oxidative stress in GC-2 cells and modulated the expression of antioxidant-related genes and of spermatogenic-related proteins and sex hormone receptors in aged rats. Conclusion: GINST may be a potential natural agent for the protection against or treatment of oxidative stress-induced male subfertility and aging-induced male subfertility.
Chondrocyte apoptosis has been recognized as an important factor in the pathogenesis of osteoarthritis (OA). Hydrogen peroxide ($H_2O_2$), which produces reactive oxygen species, reportedly induces apoptosis in chondrocytes. The ginsenoside $Rb_1$ (G-$Rb_1$) is the principal component in ginseng and has been shown to have a variety of biological activities, such as anti-arthritis, anti-inflammation, and anti-tumor activities. In this study, we evaluated the effects of G-$Rb_1$ on the mitochondrial permeability transition (MPT) and caspase-3 activity of chondrocyte apoptosis induced by $H_2O_2$. Cultured rat articular chondrocytes were exposed to $H_2O_2$ with or without G-$Rb_1$ and assessed for viability, MPT, Bcl-xL/Bax expression, caspase-3 activity, and apoptosis. The co-treatment with G-$Rb_1$ showed an inhibition of MPT, caspase-3 activity, and cell death. Additionally, the levels of the apoptotic protein Bax were significantly lower and the levels of the anti-apoptotic protein Bcl-xL were higher compared with $H_2O_2$ treatment alone. The results of this study demonstrate that G-$Rb_1$ protects chondrocytes against $H_2O_2$-induced apoptosis, at least in part via the inhibition of MPT and caspase-3 activity. These results demonstrate that G-$Rb_1$ is a potentially useful drug for the treatment of OA patients.
환경호르몬(내분비계 장애물질)이 하등동물의 생식기 및 생식 기능 이상을 초래한다는 최근보고는 포유동물도 그 영향하에 있음을 암시한다. 따라서 2-bromopropane(2-BP)이 생쥐 차산자의 성별에 미치는 영향과 성 분화 과정 중에 발현되는 유전자를 조사하였다. 생쥐를 2-BP로 3주일 동안 주입한 암수를 4종류 조합으로 교배시 킨 후 태어난 새끼들의 성별을 이유시기에 결정하였다. 성관련 유전자들은 수태 후 10일에 어미 생쥐를 희생시켜 RT-PCR 방법으로 태자들에게서 발현되는 유전자를 탐지하였고, 동정된 범위의 핵산 서열을 기존의 보고된 서열과 비교 분석하였다. 이유시기까지 살아남은 한배 차산자 평균수는 암수를 모두 2-BP로 처리한 군에서만 약간 감소하였다. 차산자의 성비에서 암컷 어미가 2-BP로 처리된 군에서만 차산자 암컷이 수컷보다 많았으며, 그 이외의 군에서는 수컷이 암컷보다 많았다. 성 분화 시기에 발현되는 유전자들인 SRY 유전자는 416 염기, DAX1 유전자는 466 염기, SF1 유전자는 326 염기, AMH 유전자는 389 염기를 동정하였다. 이 유전자들은 흰쥐와는 89~90%의 상동성을, 그리고 사람과는 81~92%의 상동성을 보였다. 이 유전자들은 성이 결정되는 시기인 수태 10 일경에 모두 발현됨을 알 수 있었다. 따라서 2-BP는 생식능력에 어느 정도 영향을 미치는 것으로 사료된다. 포유동물의 성 분화에 미치는 내분비계 장애물질의 영향을 성관련 유전자들의 발현과 관련지어 연구할 수 있을 것으로 기대된다.
본 연구실에서는 이전의 실험에서 suppression subtractive hybridization(SSH)을 통하여 생쥐의 생후 1일자 난소와 5일자 난소에서 차이 나게 발현하는 유전자들의 목록을 얻었고 그 중에서 MT transposon-like element, clone MTi7(MTi7)이 성장하는 난포에서 더 높게 발현한다는 것을 알아냈다(Park et al., 2002). In situ hybridization과 RNA interference를 이용한 연구결과, MTi7은 난자에서 특이 적으로 발현하는 유전자로 특히 난자성숙에 관여하는 것으로 관찰되었다(Park et at., 2003). 그러나 현재까지 MTi7의 염기서열은 생쥐에서만 알려져 있다. 따라서 본 연구는 두 부분으로 나누어서 첫째, MTi7이 다른 포유류에도 존재하는지 알아보기 위해 소,돼지, 흰쥐 그리고 사람 등 각기 다른 네 종의 난소 cDNA를 사용하여 새로운 MTi7을 분리하고자 하였으며, 둘째, 생쥐의 MTi7이 transposon의 특징을 갖고 있어 다른 유전자에 삽입되어 있는지를 알아보기 위해 inverse PCR을 시행하여 MTi7주변의 유전자가 있는지를 조사하였다. 네 종의 난소 cDNA를 사용하여 생쥐의 MTi7과 매우 유사한 염기서열을 갖고 있음을 알았다(87%∼98%). Inverse PCR 결과, 생쥐의 MTi7은 beta-carotene 15, 15'-monooxygenase(Bcdo) 유전자 혹은 serine protease inhibitor, Kunitz type I(Spint 1) 유전자에 삽입되어 있음을 알 수 있었다. 본 연구의 결과로 여러 포유류의 MTi7 sequence를 알아내고, 또한 생쥐의 MTi7이 삽입되어 있는 유전자를 알아냄으로써 머지 않은 장래에 난자형성 및 난포형성과정에 있어서 MTi7의 역할을 밝혀 낼 수 있을 것으로 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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