Objective : Ssangwha-tang is a traditional medicine formula widely prescribed for a decrease of fatigue after an illness in Korea. The aim of this study is to investigate the effect of Ssangwha-tang fermented by Lactobacillus fermentum (SF) on osteoclast differentiation in vitro and on bone metabolism of an ovariectomized rat in vivo. Methods : Tartrate-resistant acid phosphatase activity and staining were applied to evaluate the formation of osteoclasts. Ovariectomized rats were orally administrated with SF (30 ml/kg/day) for 12 weeks. Serum aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, alkaline phosphatase, total cholesterol, high-density lipoprotein-cholesterol, low-density lipoprotein-cholesterol, triglyceride, phosphate, calcium levels were determined. Effect of SF on bone loss were studied by histological analysis and the measurement of bone mineral density. Results : SF significantly inhibited tartrate-resistant acid phosphatase activity and formation of osteoclasts in RAW264.7 cells stimulated by receptor activator for nuclear factor ${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$) ligand (RANKL). In addition, SF significantly decreased the level of triglyceride and increased the level of low-density lipoprotein. Moreover, the decrease of trabeculae of the femur was partially prevented in ovariectomized rats administrated with SF. Conclusions : SF treatment could prevent ovariectomy induced bone loss and its effects could be medicated by the inhibition of osteoclastogenesis.
Osteoporosis is a growing global health concern primarily associated with decreased estrogen in postmenopausal women. Recently, some strains of probiotics were examined for potential anti-osteoporotic effects. This study intended to evaluate the impacts of Lactiplantibacillus plantarum MGE 3038 strain (MGE 3038) in ovariectomized rats. For this purpose, twelve weeks old female Wistar rats (n=21; 250-300 g) were divided into 3 groups; ovariectomy (OVX) group, OVX/MGE 3038 group and Sham group (control). In these groups; two went through respective OVX and one had daily MGE 3038 administration through oral gavage. Prior to 16 weeks after OVX, we collected blood samples and extracted the tibiae. We scanned the extracted tibiae by in-vivo micro-computed tomography (micro-CT) and evaluated pathology by hematoxylin and eosin (H&E) and Masson's trichrome staining. The serum levels of C-telopeptide of type I collagen (CTX), osteocalcin (OC), and the receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL) were examined. The OVX/MGE 3038 group showed increases in bone mineral density, trabecular bone volume, trabecular number, and trabecular thickness (Tb.Th), and a decrease in trabecular spacing than the OVX group. However, OVX/MGE 3038 group and control group were measurably comparable in Tb.Th. Micro-CT, H&E, and Masson's trichrome findings exhibited increased preservation and maintenance of trabecular bone structure in the OVX/MGE 3038 group in comparison to the OVX group. In serum, the levels of CTX, OC and RANKL were significantly different between the OVX and OVX/MGE 3038 groups. Taken together, L. plantarum MGE 3038 could be helpful for the treatment of osteoporosis.
Steroid hormone is known to cause the dynamic changes of mammalian uterus during reproductive cycle. However there is little information about the effect of estrogen (E) and progesterone (P) on the expression of various transcription factors involved in gene expression. Thus the present study was designed to demonstrate E and/or P-induced expression of c-Fos, CREB, ATF and HSP70 in rat uterus. Rats, ovariectomized (OVX) for two weeks, were divided into 6 experimental groups, 1) OVX, 2) OVX+V, 3) OVX+E, 4) OVX+P, 5) OVX+E+V, 6) OVX+E+P, and western blotting assay for nuclear extract and immunohistochemical staining were carried out for each experimental group. Treatment of E $(10{\mu}g)$ showed to increase the expression of c-Fos, CREB, ATF, and HSP70, and maximal expression was occured at $3\sim6$ hr after E administration. P (1mg) also increased, but much less than E, the expression of c-Fos, ATF, and HSP70. However, P did not reveal any effect on the expression CREE. P treatment 4 hr after E injection decreased c-Fos, CREB, and ATF expression, but did not show any change in the E-induced HSP70 expression. In immunohistochemical study c-Fos-, CREB-, and ATF-immunoreactivities were confined to the cells of luminal epithelium of uterine endometrium. These results suggest that proliferation and differentiation of rat uterus during reproductive cycle may mediated via expression of transcription factors, such as c-Fos, CREB, ATF, and HSP70.
Jin, Eun-Sun;Kim, Ji Yeon;Lee, Bora;Min, JoongKee;Jeon, Sang Ryong;Choi, Kyoung Hyo;Jeong, Je Hoon
Journal of Korean Neurosurgical Society
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v.61
no.5
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pp.559-567
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2018
Objective : The aim of this study was to evaluate the effect for biodegradable screws containing bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) in an osteoporotic rat model. Methods : Twenty-four female Wistar rat (250-300 g, 12 weeks of age) were randomized into four groups. Three groups underwent bilateral ovariectomy (OVX). Biodegradable screws with or without BMP-2 were inserted in the proximal tibia in two implantation groups. The extracted proximal metaphysis of the tibiae were scanned by exo-vivo micro-computed tomography. Evaluated parameters included bone mineral density (BMD), trabecular bone volume (BV/TV), trabecular number, trabecular thickness, and trabecular separation (Tb.Sp). The tibia samples were pathologically evaluated by staining with by Hematoxylin and Eosin, and trichrome. Results : Trabecular formation near screw insertion site was evident only in rats receiving BMP-2 screws. BMD and BV/TV significantly differed between controls and the OVX and OVX with screw groups. However, there were no significant differences between control and OVX with screw BMP groups. Tb.Sp significantly differed between control and OVX and OVX with screw groups (p<0.05), and between the OVX and OVX with screw BMP group (p<0.05), with no statistically significant difference between control and OVX with screw BMP groups. Over the 12 weeks after surgery, bone lamellae in direct contact with the screw developed more extensive and thicker trabecular bone around the implant in the OVX with screw BMP group compared to the OVX with screw group. Conclusion : Biodegradable screws containing BMP-2 improve nearby bone conditions and enhance ostoeintegration between the implant and the osteoporotic bone.
Safflower has been cultivated in Korea and thought to have excellent effects on bone in oriental medicine and folk remedy and has been taken for a long time. Safflower is thought to be helpful for the development and sustenance of bones according to the result of recent assay of its components. Otherwise, any reliable experimental data have not been suggested so far. We have carried out this study to examine the prophylactic effects of safflower-seed-powder on the prevention of osteoporosis induced by the ovariectomy 12 Weeks-old Sprague-Dawley rats weighing about 230 g was kept in the experimental condition and used in this study. Animals were taken 0.3 g of safflower-seed-powder once a day for 1, 3, 5, and 7 weeks after ovariectomizing both ovaries and observed the fine structure of tibia. Tissues were fixed with traditional SEM preparation methods and decalcified for 10 hours with 10% nitric acid and dehydration, drying, and gold-coating were followed by the routine procedures and observed with scanning electron microscope (Hitachi, S-450). Loss of bone was started just after ovariectomy and thickness of bone from the medullary cavity to the compact bone was reduced and the extension of medullary cavity was serious in the control group of 7 weeks. Experimental groups taken safflower-seed-powder showed similar findings from 1 week to 7 weeks. These results suggest that the safflower-seed-powder is thought to be efficient for the prevention of osteoporosis owing to the deficiency of female sex hormone.
Several lines of evidence indicate that some neuropeptides classically associated hypothalamus have been found in pituitary gland, suggesting the existence of local regulation of pituitary function. Among the hypothalamic releasing hormones, genes for TRH and GnRH are expressed in the rat anterior pituitary gland. The present study was carried out to investigate the expression of the GHRH gene in rat anterior pituitary and the pituitary-derived cell lines. The presence of GHRH transcripts in pituitary tissue was shown by 3'rapid amplification of cDNA end (3'-RACE) analysis. In reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) study, GHRH cDNA fragments were amplified from two pituitary-derived cell lines, $\alpha$T3 cells originated from mouse gonadotrope and GH3 cells from rat somatolactotrope. Immunoreactive GHRH was detected in large and medium-sized pituitary cells by immunocytochemistry. Significant amounts of GHRH-like molecules were found in the GH3 cell extracts. In RNase protection assay, the level of pituitary GHRH mRNA was augmented by ovariectomy. These results demonstrate that GHRH gene is expressed in the rat gonadotropes and somatotropes, and suggest that the pituitary GHRH could be participated in the paracrine and/or autocrine regulation of cell proliferation, as well as promoting growth hormone secretion.
Purpose: The aim of this study was to observe the bony change in the OVX rat longitudinally and to study the alendronate effect. Materials and Methods: Eighteen Sprague-Dewley rats, eight-week old each, were randomly assigned into three groups: one of those sham-operated (N=4), the other two were OVX: saline-treated (N=7) and alendronate-treated group (N=7). The saline-treated group was administered with saline solution (0.1mL/100g) daily, while the alendronate-treated group was given alendronate (1mg/kg, Sigma-Aldrich Corp. Korea) daily. Micro-CT scannings of the lumbar were consecutively done at baseline, at 3-week intervals during 9 weeks. Two and three dimensional bony analysis were done. Bone mineral density (BMD) was measured with Piximus (GE Lunar Co. USA). The average values of these three methods were compared with each group. Results: After 6 weeks the BMD of the OVX group showed lower tendency than that of sham group. After 6 weeks many 3D parameters of micro-CT showed higher values in the OVX-alendronate group compared with the OVXsaline group. Most 2D bony parameters were higher in the OVX-alendronate group compared with the OVX-saline group at 9 weeks. Conclusion: This study showed low BMD of the OVX group after 6 weeks and showed the effect of alendronate on the BMD and bony structures of ovariectomized rats. This study also showed usefulness of in vivo micro-CT in monitoring individual bone changes over time.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.26
no.2
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pp.334-343
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1997
This study was performed to elucidate the effects of dietary calcium-salt, estrogen-treatment, and estrogen/calcium treatment on bone metabolism. Ovariectomized rats were used as an animal model. Female Sprague-Dawley rats with a body weight of $250{\sim}280g$ underwent ovariectomy or sham-operation. The ovariectomized rats were divided into 9 different experimental groups including saline-treated group, estrogen-treated group, high calcium salt-treated group, and estrogen/calcium treated groups, and fed the experimental diet for 6 weeks. The mineral content, weight, length, strength and density in femur and scapula of the animals were determined. The results of the experiment are as follows: there were no difference in weight of wet bone, density, length, strength and content of ash in right femur between ovariectomized rat and sham-operation. When the weight of bones was expressed as bone gram per body weight, it was significantly lower in ovariectomized rat than sham-operation. Estrogen and estrogen/calcium in ovariectomized rats resulted in increased weight of wet bone. Estrogen with its gradual reduction in ovariectomized rats showed the lowest values in strength, content of ash, content of calcium and content of phosphorus among the groups. There were no differences in weight of wet hone, density, content of ash, content of calcium and content of phosphorus in right scapula between ovariectomized rat and sham-operation. In addition skeletal composition was not changed by ovariectomy. Estrogen and estrogen/calcium in ovariectomized rats resulted in decreased skeletal composition however, estrogen with its gradual reduction did not caused the skeletal composition change. Moreover, the gradual reduction of estrogen had a preventive effect on bone loss when the treatment was combined with calcium intensification.
The aim of this study was to evaluate the effects of Artemisia Princeps Var. Orientalis (AP) on serum lipids and the collagen content of the connective tissues in ovariectomized rats. From day 2 until day 37 after the ovariectomy, Sprague-Dawley female rats were randomly assigned to the following groups: sham-operated rats (Sham), ovariectomized control rats (OVX-control), and ovariectomized rats supplemented with the AP 50 mg/kg bw/day (OVX-AP). The AP ethanol extracts were orally administrated 1 mL per day. The OVX rats were significantly heavier than the sham-operated rats at all time points, but supplementation with the AP extracts tended to gain weight less than OVX-control. Although total-cholesterol was increased at OVX-control, supplementation with the AP extracts tended to result in less than OVX-control. Triglyceride was significantly decreased after supplemented with the AP extracts (p<0.05). HDL-cholesterol is appeared higher AP extracts group than OVX-control. According to the results, we could know the fact that AP extracts were effective on serum lipids content throughout decreasing total-cholesterol, triglyceride and increasing HDL-cholesterol in ovariectomized rats. Supplementation with the AP extracts prevented a decrease in the collagen level in bone and cartilage tissues. These results are consistent with the conclusions based on the estrogenic activities of AP. Therefore, it may be used to possibly improve the quality of life in menopausal women.
Aging in females is associated with a reduced metabolic function, increased incidence of neurodegenerative diseases, and cognitive dysfunction, as a result of loss in gonadal function. The change can alter the states of phosphorylation on the proteins, which cause dramatic changes in the cellular location or activity of the proteins. In this study, the differential phosphorylation of the proteins responsible for the functions related to cognition was studied using the ovariectomized adult rats. Phosphoproteomic analysis using the cerebral and hippocampal tissues could identify 51 differentially phosphorylated proteins including 12 proteins for energy metabolism, 8 cytoskeletal proteins, 6 signaling proteins, and other functional proteins in the ovariectomized rats. Further, anti-oxidative enzymes, superoxide dismutase and peroxiredoxin-2, which are known to be inactivated by phosphorylation, were found to be differentially phosphorylated in the cerebellum and hippocampus of the ovariectomized rats, respectively. Many of the deactivated proteins by differential phosphorylation identified in this study were overlapped to those of Alzheimer's disease cases. These results will provide information for neurodegenerative learning and memory impairments in women as brought about by menopause.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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