• 제목/요약/키워드: rat molars

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자기장 저속 냉동보관법을 이용한 쥐 치아 치주인대세포의 활성도 검사 (EVALUATION OF THE VIABILITY OF PERIODONTAL LIGAMENT CELL IN RAT TEETH USING SLOW CRYOPRESERVATION METHOD WITH MAGNETIC FIELD)

  • 안현정;김의성;김진;김덕원;김기열;이찬영;이승종
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제33권4호
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    • pp.332-340
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    • 2008
  • 본 연구의 목적은 흰쥐 상악 대구치를 발거하여 자기장 저속 냉동보관법을 이용하여 냉동 시 치주인대세포의 환성도 및 세포 사멸도를 MTT 검색법과 TUNEL 검사를 이용하여 측정하고자 하였다. 4주령의 암컷 Sprague-Dawley계 흰쥐의 상악 좌우 제1,2대 구치를 발거하여 각 군 당 12개의 쥐 치아를 MTT검색에 이용하였고 6개의 치아를 TUNEL 검사에 이용하였다. 실험군은 5개군으로 대조군은 즉시 발치군이며 4$^{\circ}C$ 냉장고에서 1주일간 보관한 냉장군, 발치 후 동해방지제 처리과정을 거쳐 -196$^{\circ}C$의 액화질소에 넣어 급속 냉동한 액화질소군, 217 mA, 60 Hz, 1 G의 자기장을 이용하여 -0.3$^{\circ}C$/min 의 속도로 -20$^{\circ}C$까지 냉동 후 -196$^{\circ}C$로 급속 냉동한 자기장군, -0.3$^{\circ}C$/min의 속도로 -20$^{\circ}C$까지 냉동 후 -196$^{\circ}C$에 급속 냉동한 저속 냉동군으로 나누었다. 보존액은 F medium을 사용했으며 동해방지제로 10% dimethyl sulfoxide (DMSO)를 사용하였다. 치근면을 단위면적으로 표준화하기 위해 MTT 측정값을 Eosin 염색 후 530 nm에서 측정 한 흡광도 값으로 나누었다. TUNEL 검사 시 각 조직슬라이드에서 400배 크기의 현미경 시야에서 임의로 세 부분을 지정하여 정상 세포수와 양성 세포수를 세어 그 비율을 계산하여 각 실험군 당 평균치를 구하였다. 통계 분석을 위해 one way ANOVA를 시행하였으며 사후검정으로 Scheffe와 Tukey HSD방법을 썼으며 결과는 다음과 같다. MTT검색에 의한 흡광도를 Eosin염색 후 측정한 흡광도로 나눈 값에서는 자기장군은 즉시 발치군보다 낮은 세포활성을 보였고 (p < 0.05) 액화질소군, 저속 냉동군과는 통계적으로 유의성 있는 차이를 보이지 않았다. 그러나 자기장군은 액화질소군, 저속 냉동군과 함께 냉장군보다는 높은 세포 활성도를 보였다 (p < 0.05) TUNEL 검사 결과도 자기장군은 즉시 발치군보다 치주인대의 세포사멸도가 높았으나 (p < 0.05) 저속 냉동군과 액화 질소군과는 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다. 자기장군은 냉장군보다 세포사멸도가 낮았으며 냉장군은 모든 군 중에서 세포 사멸도가 가장 높았다 (p < 0.05).

백서구치의 실험적 치아이동시 치근막 혈관변화에 관한 혈관주형법을 이용한 연구 (AN EXPERIMENTAL STUDY ON THE VASCULAR CHANGES OF RAT MOLAR PERIODONTAL LIGAMENT FOLLOWING ORTHODONTIC TOOTH MOVEMENT USING VASCULAR CORROSION CASTING METHOD)

  • 임용규;양원식
    • 대한치과교정학회지
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    • 제24권1호
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    • pp.37-62
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    • 1994
  • This study was undertaken to investigate the three dimensional vascular changes of periodontal ligament following orthodontic tooth movement. Experimental tooth movement was carried out in 96 Sprague-Dawley rats with the weight of 250g. They were divided into four experimental groups (each 24 rats). The left maxillary first molar was moved mesially with 25g force in group I, and with 75g force in group II. Each three animals were sacrificed after 1, 6, 12, 24 hours, and 3, 7, 14, 21 days. In group III, 25g mesial force was applied for 3 days, and in group IV, 75g mesial force was applied for 3 days. Then the appliances were removed, and each three animals were sacrificed after 1, 6, 12, 24 hours, and 3, 7, 14, 21 days from removal of appliance. The contralateral molars were used for control group. Casting media was injected via left ventricle and polymerized in warm water. After corrosion of surrounding soft tissue, three dimensional vascular changes were examined using scanning electron microscopy. The findings of this study were as follows: 1. Pressure side of group I and II showed degenerative vascular changes such as vascular compression, reduction of vasculature, leakage of casting media. But, regenerative changes were dominant after 7 days of tooth movement. Although the degenerative vascular changes were more severe in group II, which was exposed to heavy force, the timing of these changes was not different between two groups. 2. Periodontal vasculature was reestablished by the growth of new capillaries and their differentiation and union from the remaining periodontal vessels and vessels of alveolar bone marrow. Although vascular regeneration was more rapid in group I, which was exposed to light force, the vasculature was not fully normalized in both groups even after 21 days. 3. There was no remarkable changes in tension side of group I and II, but looping of capillary, new capillary growth, dilation of vessels, redirection of vessels in the direction of tensile force were occurred. 4. In pressure side of group III and IV, in which appliance was removed after 3 days of orthodontic force, bone resorption was continued even after removal of appliance. Regeneration of vasculature was initiated after 1-6 hours, and it was more rapid in group III than group IV. In both groups, the vasculature was not fully normalized even after 21 days. 5. After removal of appliance, tension side of group III and IV showed vascular compression and loss of vasculature.

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Ipriflavone 투여가 백서의 실험적 치아이동 후 치주조직의 재형성에 미치는 영향 (The effects of ipriflavone on the periodontal reorganization following experimental tooth movement in the rat)

  • 민지현;조진형;이기헌;황현식
    • 대한치과교정학회지
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    • 제38권5호
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    • pp.347-357
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    • 2008
  • 본 연구는 치아이동 후 ipriflavone 투여가 치주조직의 재형성, 나아가 치아회귀 억제에 미치는 영향을 알아보기 위하여 시행되었다 웅성 백서 72마리를 대상으로 상악 좌우측 제1, 2구치 사이에 교정용 고무밴드를 끼워 제1, 2구치를 3주간 이동시킨 다음, 교정용 고무밴드 제거 1일 전부터 매일 체중 kg당 50 mg 또는 400 mg의 ipriflavone을 투여한 실험군과 ipriflavone을 투여하지 않은 대조군으로 구분하였다. 교정용 고무밴드를 제거함으로써 회귀가 나타나기 시작한 날로부터 5일 간격으로 15일까지 각각 실험동물을 희생시켜가며 치아회귀 거리를 계측하는 한편 치주조직 재형성 소견을 관찰하였다. Ipriflavone을 투여하고 치아회귀를 관찰한 결과 용량에 관계없이 대조군에 비하여 적은 양의 회귀를 나타내었으며 시간 간격에 따른 치아회귀를 관찰한 결과 대부분의 회귀가 5일째 나타난 대조군과 달리, 늦게 그리고 점진적으로 나타나는 양상을 보였다. Iprinavone을 투여하고 조직소견을 관찰한 결과 대조군에 비하여 치조골연이 매끄러운 양상을 보였으며 시간 간격에 따른 조직소견을 관찰한 결과 대조군에 비하여 치주인대 재배열이 빠르게 나타나는 양상을 보였다. 이상의 결과는 ipriflavone의 투여가 치주조직의 재형성을 통하여 회귀를 억제함으로 교정적 치아이동 후 보정에 도움이 될 수 있음을 시사하였다.

Effect of caspases and RANKL induced by heavy force in orthodontic root resorption

  • Minato, Yukari;Yamaguchi, Masaru;Shimizu, Mami;Kikuta, Jun;Hikida, Takuji;Hikida, Momoko;Suemitsu, Masaaki;Kuyama, Kayo;Kasai, Kazutaka
    • 대한치과교정학회지
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    • 제48권4호
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    • pp.253-261
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    • 2018
  • Objective: Orthodontic root resorption (ORR) due to orthodontic tooth movement is a difficult treatment-related adverse event. Caspases are important effector molecules for apoptosis. At present, little is known about the mechanisms underlying ORR and apoptosis in the cementum. The aim of the present in vivo study was to investigate the expression of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), caspase 3, caspase 8, and receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand (RANKL) in the cementum in response to a heavy or an optimum orthodontic force. Methods: The maxillary molars of male Wistar rats were subjected to an orthodontic force of 10 g or 50 g using a closed coil spring. The rats were sacrificed each experimental period on days 1, 3, 5, and 7 after orthodontic force application. And the rats were subjected to histopathological and immunohistochemical analyses. Results: On day 7 for the 50-g group, hematoxylin and eosin staining revealed numerous root resorption lacunae with odontoclasts on the root, while immunohistochemistry showed increased TRAP- and RANKL-positive cells. Caspase 3- and caspase 8-positive cells were increased on the cementum surfaces in the 50-g group on days 3 and 5. Moreover, the number of caspase 3- and caspase 8-positive cells and RANKL-positive cells was significantly higher in the 50-g group than in the 10-g group. Conclusions: In our rat model, ORR occurred after apoptosis was induced in the cementum by a heavy orthodontic force. These findings suggest that apoptosis of cementoblasts is involved in ORR.

백서에서 불소의 투여가 실험적 치아이동시 파골세포에 의한 골흡수에 미치는 영향 (Effects of fluoride on osteoclastic bone resolution during experimentally moved rat molars)

  • 김도훈;문윤식;고재승;김현만
    • 대한치과교정학회지
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    • 제30권6호
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    • pp.723-730
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    • 2000
  • 교정적인 치아이동은 치주조직, 특히 치조골의 개조를 필요로 한다. 불소는 파골세포에 의한 골흡수를 방해하는 물질로 알려져 있다. 이 연구의 목적은 불소의 섭취가 교정적인 치아이동시 압박측 치주조직에서 파골세포의 출현에 어떠한 영향을 끼치는 지를 조사하는 것이다. 40마리의 백서에게 60일동안 불화나트륨(NaF)가 각각 0, 10, 25 mg/kg/일 함유된 물을 음수시킨 후, 약 50-70g의 교정력을 가하여 상악 제 1 대구치를 근심쪽으로 경사이동시켰다. 교정력을 가한 24, 48, 그리고 96 시간 후에 대조군과 실험군을 희생시킨 후 조직편을 제작하여 상악 제 1 대구치의 압박측 치주조직 $450\times700\;{\mu}m^2$을 관찰하여 출현한 파골세포의 수와 흡수량을 조사하여 다음과 같은 결론을 내렸다. 1. 모든 측정시간에서 25 mg/kg/일 군에서 대조군보다 파골세포의 수가 유의성 있게 적었다. (p<0.05) 2. 24, 48시간 측정에서 25 mg/kg/일 군에서 대조군보다 흡수되는 면적이 유의성 있게 적었다. (p<0.05) 3. 대조군에서는 48시간에서 96시간 사이에 흡수되는 면적이 약간 감소하였으나, 10 mg/kg/일 군과 25 mg/kg/일 군 모두에서는 약간 증가하였다.

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신경병증 통증 모델에서 Carbenoxolone과 P2x receptor 길항제의 효과 (Effects of Carbenoxolone and P2X recepter antagonist combined therapy on oral neuropathic pain in rat)

  • 구인영;문선정;가경환;박민경
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제17권2호
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    • pp.123-128
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    • 2016
  • 본 연구는 안면부 신경병증 통증 모델에서 간극결합을 분리하는 Carbenoxolone(CBX)과 P2X 수용체의 길항제(iso-PPADS)의 진통작용을 확인하고자 수행되었다. 실험동물은 Sprague-Dawley계 수컷 흰쥐(240~280g)를 사용하였으며, 안면부 신경병증 통증을 유발하기 위해 흰쥐의 하악 왼쪽 두 번째 어금니를 발거하고, 아랫 이틀신경의 손상을 유도하기 위해 소형 치과용 임플란트를 식립하였다. CBX를 복강으로 하루 2번 투여 했을 때, 25ug/kg에서 유의한 진통반응이 나타났다(p<0.05). iso-PPADS 역시 복강으로 하루 2번 투여 했을 때, 25ug/kg에서 유의한 진통반응이 나타났다(p<0.05). 두 약물의 각각의 효과가 나타나지 않은 저 농도에서 함께 투여하였을 때, CBX 1ug/kg, iso-PPADS 2.5ug/kg를 투여 시 유의한 진통 효과가 나타났다(p<0.05). 저 농도의 CBX를 이용한 간극결합의 차단과 저 농도의 P2X 수용체의 길항제를 함께 투여 시 구강 안면신경병증통증기전에서 통증을 억제하는 효과를 확인할 수 있었다. 이러한 결과를 통하여 CBX를 이용한 간극결합의 차단과 P2X 수용체의 길항제의 투여가 안면부 통증조절에 중요한 역할을 담당할 것으로 사료된다.

Changes in periodontium after extraction of a periodontally-involved tooth in rats

  • Kim, Dong-Ju;Cha, Jae-Kook;Yang, Cheryl;Cho, Ahran;Lee, Jung-Seok;Jung, Ui-Won;Kim, Chang-Sung;Lee, Seung-Jong;Choi, Seong-Ho
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제42권5호
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    • pp.158-165
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    • 2012
  • Purpose: Recent interest has focused on intentional replantation to restore an original tooth. Some studies have shown successful results with intentional replantation for periodontally involved teeth. For long-term success of replantation, a healthy periodontal status of the recipient site is required so that delayed replantation is more suitable for periodontally involved teeth. To reveal the ideal timing for delayed replantation of periodontally involved teeth, the healing process of extraction sockets after extraction of periodontitis-induced teeth in rats was evaluated. Methods: Twenty-eight rats were randomly divided into two groups: a control group (n=8) and test group (n=20). In the test group, periodontitis was induced by a ligature around the cervix of the mandibular first molar of all of the rats. Two weeks later, the mandibular first molars were extracted in all of the animals. The animals were sacrificed on days 0, 3, 7, and 10 after extraction and histological and immunohistochemical analysis was performed. Results: In histological analysis of the test group, inflammatory cell infiltrate was found abundantly in the remaining periodontium 3 days after tooth extraction and decreased gradually at later time points. In immunohistochemical analysis of the test group, both interleukin-6 (IL-6) and, tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) were numerous in the furcation area at each postextraction day. IL-6 was stained more heavily between 3 and 7 days after extraction; at day 10 after extraction, little staining was observed. TNF-${\alpha}$ staining was more intense at 3 days after extraction and gradually weakened at later points in time. Conclusions: Within the limits of this study, it takes at least 10 days to resolve periodontal inflammation in rat extraction sockets.

Can different agents reduce the damage caused by bleaching gel to pulp tissue? A systematic review of basic research

  • Leticia Aparecida Silva Batista;Alexandre Henrique dos Reis-Prado;Hebertt Gonzaga dos Santos Chaves;Lara Cancella de Arantes;Luis Fernando Santos Alves Morgan;Carolina Bosso Andre;Thais Yumi Suzuki;Francine Benetti
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제48권4호
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    • pp.39.1-39.23
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    • 2023
  • Objectives: This study aimed to investigate the effectiveness of different topical/systemic agents in reducing the damage caused by bleaching gel to pulp tissue or cells. Materials and Methods: Electronic searches were performed in July 2023. In vivo and in vitro studies evaluating the effects of different topical or systemic agents on pulp inflammation or cytotoxicity after exposure to bleaching agents were included. The risk of bias was assessed. Results: Out of 1,112 articles, 27 were included. Nine animal studies evaluated remineralizing/anti-inflammatories agents in rat molars subjected to bleaching with 35%-38% hydrogen peroxide (HP). Five of these studies demonstrated a significant reduction in inflammation caused by HP when combined with bioglass or MI Paste Plus (GC America), or following KF-desensitizing or Otosporin treatment (n = 3). However, orally administered drugs did not reduce pulp inflammation (n = 4). Cytotoxicity (n = 17) was primarily assessed using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay on human dental pulp cells and mouse dental papilla Cell-23 cells. Certain substances, including sodium ascorbate, butein, manganese chloride, and peroxidase, were found to reduce cytotoxicity, particularly when applied prior to bleaching. The risk of bias was high in animal studies and low in laboratory studies. Conclusions: Few in vivo studies have evaluated agents to reduce the damage caused by bleaching gel to pulp tissue. Within the limitations of these studies, it was found that topical agents were effective in reducing pulp inflammation in animals and cytotoxicity. Further analyses with human pulp are required to substantiate these findings.

삼차신경절의 나트륨 채널 조절을 통한 치수염 통증 완화 효과 (Pulpitis pain relief by modulating sodium channels in trigeminal ganglia)

  • Kyung-Hee Lee
    • 한국치위생학회지
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    • 제24권3호
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    • pp.219-227
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    • 2024
  • 연구목적: 치수는 신경과 혈관을 포함하고 있는 부위로 다양한 자극이나 세균에 의해 염증이 생기면 이를 치수염이라고 한다. 치수염은 말초 신경조직 변화와 심한 통증을 유발하는 질환으로 만성적 통증을 유발하나, 삼차신경절의 신경세포 활성화와 특정 나트륨 채널(Nav1.7) 발현 사이의 관계는 잘 알려져 있지 않다. 이에 본 연구에서는 실험적으로 유도된 치수염이 말초신경에서 Nav1.7 나트륨 채널의 발현을 활성화시켜, 삼차신경절의 뉴런을 활성화함으로써 통증을 유발한다는 사실을 발견하고 이를 조절하는 신호기전을 규명하고자 하였다. 연구방법: 실험동물(Male C57BL/6 생쥐, 6주, 20-25 g)의 상악 제1대구치 치수에 AITC를 처리하여 급성 치수염을 유발하고, 3일 후 실시간 광영상 이미지를 이용하여 삼차신경절의 뉴런 활성화를 측정 및 비교 분석하였다. 단백질 분석을 통해 뇌간(SpVc)에서 치수염 통증유발 신호조절기전에 관여하는 여러가지 단백질들(p-ERK, c-FOS, TRPA1, p-CRMP2)의 발현을 관찰하였다. 연구결과: 시공간적 광영상 이미지를 통해 삼차신경절의 뉴런세포들은 대조군과 비교 시 급성 치수염 모델에서 흥분성 활성화가 유도되어 신경학적 변화가 일어남을 관찰하였다. 또한 조직학 및 분자생물학적 결과를 통해 치수염으로 인한 특정 나트륨 채널(Nav1.7)의 증가가 통증을 유발한다는 사실을 확인하였다. 또한, ProTxII(Nav1.7의 선택적 억제 약물) 처리를 통해 뉴런의 과흥분성 활성이 억제됨에 따라, 치수염이 삼차신경절에서 나트륨 채널(Nav1.7)의 증가를 유도하고 이러한 특정 나트륨 채널을 효과적으로 제어하면 치수염의 통증을 줄이는 방법이 될 것이라 생각된다. 결론: 본 연구의 결과를 통해 과 발현된 특정 나트륨 채널(Nav1.7)을 억제하면 삼차신경절에서 통각 신호 처리를 조절하고 치수염에 의해 유발되는 통증을 효과적으로 조절할 수 있음을 시사한다.

고압-저온 보관에 따른 쥐 치아 치주인대세포의 활성도 평가 (THE EVALUATION OF PERIODONTAL LIGAMENT CELLS OF RAT TEETH AFTER LOW-TEMPERATURE PRESERVATION UNDER HIGH PRESSURE)

  • 정진호;김진;최성호;김의성;박지용;이승종
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제35권4호
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    • pp.285-294
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    • 2010
  • 본 연구의 목적은 흰 쥐의 상악 대구치를 발거한 후 치주인대세포를 $0^{\circ}C$/2 MPa고압-저온하에 1주간 보관시켜 MTT, WST-1 검색법을 이용하여 측정한 치주인대세포의 활성도를 저속 냉동법(No Additional Pressure, 2, 3 MPa), 급속 냉동법(No Additional Pressure, 2 MPa), $-5^{\circ}C$/90 MPa초고압 저온보존법과 비교하여 평가하는 것이다. 생후 4주된 암컷 Sprague-Dawley계 흰쥐의 상악 좌우 제1, 2대구치를 발거하여 각 군 당 12개의 쥐 치아를 MTT, WST-1 검색에 이용하였다. 실험군은 9개군으로 대조군은 즉시 발치군이며, 각각 3 MPa, 2 MPa, No Additional Pressure (NAP)의 압력을 가한 후 $4^{\circ}C$에서 $-35^{\circ}C$까지 $-0.5^{\circ}C$/min 속도로 서서히 냉동시킨 뒤 $-196^{\circ}C$에 냉동한 저속 냉동군, 발치 후 동해방지제 처리과정을 거쳐 각각 2 MPa, NP의 압력을 가한 후, $-196^{\circ}C$의 액화질소에 넣어 냉동한 급속 냉동군, 발치 후 각각 2MPa,NP의 압력을 가한 후, $0^{\circ}C$에 보관한 저온 보존군, $-5^{\circ}C$/90 MPa의 초고압 저온 보존군으로 나누었다. 보존액은 F medium을 사용했으며 동해방지제로 10% dimethylsulfoxide (DMSO)를 사용하였다. 치근면을 단위면적으로 표준화하기 위해 MTT, WST-1 측정값을 Eosin 염색 후 530 nm에서 측정한 흡광도 값으로 나누었다. 통계 분석을 위해 one way ANOVA를 시행하였으며 사후 검정으로는 Tukey HSD 방법을 사용하였고 결과는 다음과 같다. 1. MTT 검색법 및 WST-1 검색법 결과 $0^{\circ}C$/2 MPa 고압 저온 보존군이 즉시 발치군보다 세포 활성도가 낮았으나 통계적 유의차는 없었으며, 저속 압력 냉동군(NP, 2 MPa, 3 MPa)과, 급속 압력 냉동군(NP, 2 MPa), 저온보존군($0^{\circ}C$/NP), 초고압 저온 보존군($-5^{\circ}C$/90 MPa)보다 통계적으로 유의차있게 높은 세포 활성도를 나타내었다(p < 0.05). 2. MTT검색법 및 WST-1 검색법 결과 $-5^{\circ}C$/90 MPa 초고압 저온 보존군이 가장 낮은 세포 활성도를 나타내었으며, MTT 검사 결과에서는 모든 군에 대해 통계적으로 유의성 있는 결과를 보였다(p < 0.05). 위의 결과를 통해, $0^{\circ}C$/2 MPa (20기압)의 고압-저온 보존법이 다른 급속 냉동 보관법(2 MPa, NAP)이나 저속냉동보관법(3, 2 MPa, NAP), $-5^{\circ}C$/90 MPa 초고압 저온 보존법에 비해 우수한 쥐 치아의 치주인대세포의 활성도를 보여 차후 치아의 재이식시 치아보관을 위한 방법으로의 가능성을 제시하였다.