Objectives: The quorum-sensing-inhibitory and anti-biofilm activities of the methanol extract of E. globulus leaves were determined against clinically isolated multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa. Methods: The preliminary anti-quorum-sensing (AQS) activity of eucalyptus was investigated against a biosensor strain Chromobacterium violaceum ATCC 12472 (CV12472) by using the agar well diffusion method. The effect of sub-minimum inhibitory concentrations (sub-MICs) of the methanol extract of eucalyptus on different quorum-sensing-regulated virulence factors, such as swarming motility, pyocyanin pigment, exopolysaccharide (EPS), and biofilm formation, against clinical isolates (CIs 2, 3, and 4) and reference PA01 of Pseudomonas aeruginosa were determined using the swarm diameter (mm)-measurement method, chloroform extraction method, phenol (5%)-sulphuric acid (concentrated) method, and the microtiter plate assay respectively, and the inhibition (%) in formation were calculated. Results: The preliminary AQS activity (violacein pigment inhibition) of eucalyptus was confirmed against Chromobacterium violaceum ATCC 12472 (CV12472). The eucalyptus extract also showed concentration-dependent inhibition (%) of swarming motility, pyocyanin pigment, EPS, and biofilm formation in different CIs and PA01 of P. aeruginosa. Conclusion: Our results revealed the effectiveness of the E. globulus extract for the regulation of quorum-sensing-dependent virulence factors and biofilm formation at a reduced dose (sub-MICs) and suggest that E. globulus may be a therapeutic agent for curing and controlling bacterial infection and thereby reducing the possibility of resistance development in pathogenic strains.
In this study, we investigated the effects of indole on biofilm formation inhibition in Pantoea agglomerans (P. agglomerans). In the biofilm growth assay, indole inhibited biofilm formation across all the growth time. Depending on biofilm growth stage, indole exhibited biofilm inhibition and anti-bacterial effects on planktonic cells. Through the analysis of the proportion rate between biofilm and Colony Forming Units (CFU) and inhibition rate of indole, we confirmed that depending on the biofilm stage of P. agglomerans, indole treatment timing was more important than the treatment duration. By comparing gene expression rates through rt-qPCR P.agglomerans affected by indole was found to significantly change quorum sensing (pagI/R) and indole transportation (bssS) gene expressions. Throughout all, indole exhibited both antimicrobial and anti-biofilm effects on P. agglomerans. In addition, we confirmed the anti-biofilm effects of indole on mature biofilm. In conclusion, indole as a signal molecule, can exhibit anti-biofilm effects through bacterial quorum sensing inhibition and indole affects. Therefore, indole can regulate biofilm bacteria especially gram-negative opportunistic pathogens.
Kim, Cheol-Jin;Kim, Jae-Eun;Park, Hyung-Yeon;Mclean, Robert J.C.;Kim, Chan-Kyung;Jeon, Jong-Ho;Yi, Song-Se;Kim, Young-Gyu;Lee, Yoon-Sik;Yoon, Je-Yong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.10
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pp.1598-1606
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2007
A new series comprising 7 analogs of N-(sulfanyl ethanoyl)-L-HSL derivatives, 2 analogs of N-(fluoroalkanoyl)-$_L$-HSL derivatives, N-(fluorosulfonyl)-L-HSL, and 2,2-dimethyl butanoyl HSL were synthesized using a solid-phase organic synthesis method. Each of the 11 synthesized compounds was analyzed using NMR and mass spectroscopies, and molecular modeling studies of the 11 ligands were performed using SYBYL packages. Thereafter, a bacterial test was designed to identify their quorum-sensing inhibition activity and antifouling efficacy. Most of the synthesized compounds were found to be effective as quorum-sensing antagonists, where antagonist screening revealed that 10 among the 11 synthesized ligands were able to antagonize the quorum sensing of A. tumefaciens.
Quorum sensing (QS) is a cell-to-cell communication system, which is used by many bacteria to regulate diverse gene expression in response to changes in population density. Bacteria recognize the differences in cell density by sensing the concentration of signal molecules such as N-acyl-homoserine lactones (AHL) and autoinducer-2 (AI-2). In particular, QS plays a key role in biofilm formation, which is a specific bacterial group behavior. Biofilms are dense aggregates of packed microbial communities that grow on surfaces, and are embedded in a self-produced matrix of extracellular polymeric substances (EPS). QS regulates biofilm dispersal as well as the production of EPS. In some bacteria, biofilm formations are regulated by c-di-GMP-mediated signaling as well as QS, thus the two signaling systems are mutually connected. Biofilms are one of the major virulence factors in pathogenic bacteria. In addition, they cause numerous problems in industrial fields, such as the biofouling of pipes, tanks and membrane bioreactors (MBR). Therefore, the interference of QS, referred to as quorum quenching (QQ) has received a great deal of attention. To inhibit biofilm formation, several strategies to disrupt bacterial QS have been reported, and many enzymes which can degrade or modify the signal molecule AHL have been studied. QQ enzymes, such as AHL-lactonase, AHL-acylase, and oxidoreductases may offer great potential for the effective control of biofilm formation and membrane biofouling in the future. This review describes the process of bacterial QS, biofilm formation, and the close relationship between them. Finally, QQ enzymes and their applications for the reduction of biofouling are also discussed.
Kim, Young-Hee;Lee, Jae-Geun;Park, Sung-Hoon;Kim, Jung-Sun
Proceedings of the PSK Conference
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2003.04a
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pp.224.1-224.1
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2003
Recent studies have revealed that bacterial biofilm production by the gram-negative bacteria is regulated by the quorum sensing signaling molecules, AHLs (N-acyl homoserine lactones). This suggests that inhibiting the AHLs could enhance the effects of antibacterial agents. Halogenated furanones purified from the red algae Delisea pulchra have been known to decrease quorum sensing responses by competitive inhibition of the AHLs. (omitted)
The Liquid Culture Assay using a recombinant Agrobacterium tumefaciens strain has been developed as a means for quorum sensing autoinducer screening. However, the low aqueous solubility of marine natural product extracts used as potential autoinducers has been a hindrance in the screening process. Although the addition of organic solvents and/or surfactants could increase aqueous solubility, errors in data interpretation including false positive results could be a serious problem. Therefore, determining the best possible solvent and surfactant at the optimum concentration is crucial. Evaluating methanol, ethanol, 1-propanol, DMSO and DMF at concentration ranges of 0~10% revealed < 2% methanol to be most favorable when tested for ${\beta}$-gal activity and growth inhibition of the recombinant A. tumefaciens strain. On the other hand, among surfactants tested, Triton X-100 was similarly effective in increasing the delivery of autoinducers for activity at less than 0.05% concentration.
A number of bacterial species coexist in oral cavities as a biofilm rather than a planktonic arrangement. By forming an oral biofilm with quorum sensing properties, microorganisms can develop a higher pathogenic potential and stronger resistance to the host immune system and antibiotics. Hence, the inhibition of biofilm formation has become a major research issue for the future prevention and treatment of oral diseases. In this study, we investigated the effects of pentose on biofilm formation and phenotypic changes using wild type oral bacteria obtained from healthy human saliva. D-ribose and D-arabinose were found to inhibit biofilm formation, but have no effects on the growth of each oral bacterium tested. Pentoses may thus be good candidate biofilm inhibitors without growth-inhibition activity and be employed for the future prevention or treatment of oral diseases.
Kim, Tae-Woo;Cha, Ji-Young;Lee, Jun-Seung;Min, Bok-Kee;Baik, Hyung-Suk
Journal of Life Science
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v.18
no.2
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pp.206-212
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2008
The quorum sensing (QS) regulatory network has been the subject of extensive studies during recent years and has also attracted a lot of attention because it both positively and negatively regulates various putative virulence factors, although initially considered to be a specialized system of Vibrio fischeri and related species. In this study, to identify the novel materials which inhibit QS system of microorganisms, extracts of eighteen natural products were tested by bioassay using N-(3-oxohexanoyl)-$_L$-homoserine lactone and N-(3-oxooctanoyl)-$_L$-homoserine lactone synthesized in this experiment and an Agrobacterium tumefaciens NT1 biosensor strain containing a traI::lacZ fusion. The result indicated that the extracts of cabbage, leek, and onion exhibited the QS inhibition activity. Thus, materials contained in the extracts were isolated via recycling preparative HPLC and were purified via a JAIGEL-LS255 column. The common fraction corresponding to a peak of the 83 min point of them quenched the quorum sensing of A. tumefaciens NT1 biosensor strain in ABMM containing X-gal and was designated quorum sensing inhibitor-83 min (QSI-83). The QSI-83 exhibited the heat stability and did not inhibit the growth of A. tumefaciens NTl. Furthermore, thin layer chromatography (TLC) results suggested that these novel materials may be antagonists of N-acyl homoserine lactone or may inhibit the QS autoinducer synthesis by Pseudomonas syringae pv. tabaci.
Infections with Pseudomonas aeruginosa are difficult to treat not only because it is often associated with multidrug-resistant infections but also it is able to form biofilm. The aim of this study was to evaluate the antibiofilm and anti-Quorum Sensing (QS) activities of Thymbra capitata essential oils (EOs) against Beta Lactamase (BL) producing P. aeruginosa and the reference strain P. aeruginosa 10145. GC/MS analysis showed that thymol (23.25%) is the most dominant compound in T. capitata EOs. The MICs of T. capitata EOs against P. aeruginosa (BL) and P. aeruginosa 10145 were 1.11%. At sub MIC (0.041, 0.014 and 0.0046%), the EOs of T. capitata remarkably inhibited the biofilm formation of both strains tested and complete inhibition of the biofilm formation was reported at 0.041%. The EOs of T. capitata were found to inhibit the swarming motility, aggregation ability and hydrophobic ability of P. aeruginosa (BL) and P. aeruginosa 10145. Interestingly, the EOs of T. capitata reduce the production of three secreted virulence factors that regulated by QS system including pyocyanin, rhamnolipids and LasA protease. The potent antibiofilm and anti-QS activities of T. capitata EOs can propose it as a new antibacterial agent to control pseudomonas infections.
Kim, A-Leum;Park, Son-Young;Lee, Chi-Ho;Lee, Chung-Hak;Lee, Jung-Kee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.11
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pp.1574-1582
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2014
Bacteria recognize changes in their population density by sensing the concentration of signal molecules, N-acyl-homoserine lactones (AHLs). AHL-mediated quorum sensing (QS) plays a key role in biofilm formation, so the interference of QS, referred to as quorum quenching (QQ), has received a great deal of attention. A QQ strategy can be applied to membrane bioreactors (MBRs) for advanced wastewater treatment to control biofouling. To isolate QQ bacteria that can inhibit biofilm formation, we isolated diverse AHL-degrading bacteria from a laboratory-scale MBR and sludge from real wastewater treatment plants. A total of 225 AHL-degrading bacteria were isolated from the sludge sample by enrichment culture. Afipia sp., Acinetobacter sp. and Streptococcus sp. strains produced the intracellular QQ enzyme, whereas Pseudomonas sp., Micrococcus sp. and Staphylococcus sp. produced the extracellular QQ enzyme. In case of Microbacterium sp. and Rhodococcus sp., AHL-degrading activities were detected in the whole-cell assay and Rhodococcus sp. showed AHL-degrading activity in cell-free lysate as well. There has been no report for AHL-degrading capability in the case of Streptococcus sp. and Afipia sp. strains. Finally, inhibition of biofilm formation by isolated QQ bacteria or enzymes was observed on glass slides and 96-well microtiter plates using crystal violet staining. QQ strains or enzymes not only inhibited initial biofilm development but also reduced established biofilms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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