Event-specific real-time polymerase chain reaction (PCR) detection method for genetically modified (GM) maize MIR604 was developed based on integration junction sequences between the host plant genome and the integrated transgene. In this study, 2 primer pairs and probes were designed for specific amplification of 100 and 111 bp DNA fragments from the zSSIIb gene (the maize endogenous reference gene) and MIR604. The quantitative method was validated using 3 certified reference materials (CRMs) with levels of 0.1, 1, and 10% MIR604. The method was also assayed with 14 different plants and other GM maize. No amplification signal was observed in real-time PCR assays with any of the species tested other than MIR604 maize. As a result, the bias from the true value and the relative deviation for MIR604 was within the range from 0 to 9%. Precision, expressed as relative standard deviation (RSD), varied from 2.7 to 10% for MIR604. Limits of detections (LODs) of qualitative and quantitative methods were all 0.1%. These results indicated that the event-specific quantitative PCR detection system for MIR604 is accurate and useful.
An assay for detecting Apple scar skin viroid (ASSVd) was developed based on nucleic acid sequence based amplification (NASBA) in combination with realtime detection during the amplification process using molecular beacon. The ASSVd specific primers for amplification of the viroid RNA and molecular beacon for detecting the viroid were designed based on highly conserved regions of several ASSVd sequences including Korean isolate. The assay had a detection range of $1{\times}10^4$ to $1{\times}10^{12}$ ASSVd RNA $copies/{\mu}l$ with reproducibility and precision. Following the construction of standard curves based on time to positive (TTP) value for the serial dilutions ranging from $1{\times}10^7$ to $1{\times}10^{12}$ copies of the recombinant plasmid, a standard regression line was constructed by plotting the TTP values versus the logarithm of the starting ASSVd RNA copy number of 10-fold dilutions each. Compared to the established RT-PCR methods, our method was more sensitive for detecting ASSVd. The real-time quantitative NASBA method will be fast, sensitive, and reliable for routine diagnosis and selection of viroid-free stock materials. Furthermore, real-time quantitative NASBA may be especially useful for detecting low levels in apple trees with early viroid-infection stage and for monitoring the influence on tree growth.
Kim, Sung-Woong;Lee, Hyo-Jeong;Cho, Kang Hee;Jeong, Rae-Dong
The Plant Pathology Journal
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v.38
no.4
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pp.417-422
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2022
Apple stem grooving virus (ASGV) is a destructive viral pathogen of pome fruit trees that causes significant losses to fruit production worldwide. Obtaining ASGV-free propagation materials is essential to reduce economic losses, and accurate and sensitive detection methods to screen ASGV-free plantlets during in vitro propagation are urgently necessary. In this study, ASGV was sensitively and accurately quantified from in vitro propagated apple plantlets using a reverse transcription droplet digital polymerase chain reaction (RT-ddPCR) assay. The optimized RT-ddPCR assay was specific to other apple viruses, and was at least 10-times more sensitive than RT-real-time quantitative PCR assay. Furthermore, the optimized RT-ddPCR assay was validated for the detection and quantification of ASGV using micropropagated apple plantlet samples. This RT-ddPCR assay can be utilized for the accurate quantitative detection of ASGV infection in ASGV-free certification programs, and can thus contribute to the production of ASGV-free apple trees.
Cho, Min Seok;Ahn, Tae-Young;Joh, Kiseong;Kwon, Oh-Sang;Jheong, Won-Hwa;Park, Dong Suk
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.22
no.8
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pp.1113-1117
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2012
Shigella sonnei is a causal agent of fever, nausea, stomach cramps, vomiting, and diarrheal disease. The present study describes a quantitative polymerase chain reaction (qPCR) assay for the specific detection of S. sonnei using a primer pair based on the methylase gene for the amplification of a 325 bp DNA fragment. The qPCR primer set for the accurate diagnosis of Shigella sonnei was developed from publically available genome sequences. This quantitative PCR-based method will potentially simplify and facilitate the diagnosis of this pathogen and guide disease management.
In this paper, we present the possibility of quantification analysis for $A{\beta}$ captured by micro beads using Near-filed detection. In order to evaluate detection efficiency, detected signals were compared with different sizes of micro beads and a varied number of micro beads. Also, $A{\beta}$ deposits and $A{\beta}$ binding to micro beads were measured, therefore, we observed the $A{\beta}$ deposit and light scattering around the surface of micro beads induced by attached $A{\beta}$. This method can be used for quantitative analysis for not only the number of $A{\beta}$, but also the binding ratio of $A{\beta}$ to micro beads.
Kim, Ji-Hyeon;Son, Hyeon-Soo;Lee, Juyoung;Park, Hoon-Hee
The Korean Journal of Nuclear Medicine Technology
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v.21
no.2
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pp.55-64
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2017
Purpose Recently, with the spread of SPECT/CT, various image correction methods can be applied quickly and accurately, which enabled us to expect quantitative accuracy as well as image quality improvement. Among them, the Collimator Detector Response(CDR) recovery is a correction method aiming at resolution recovery by compensating the blurring effect generated from the distance between the detector and the object. The purpose of this study is to find out quantitative change depending on the change in detection distance in SPECT/CT images with CDR recovery applied. Materials and Methods In order to find out the error of acquisition count depending on the change of detection distance, we set the detection distance according to the obit type as X, Y axis radius 30cm for circular, X, Y axis radius 21cm, 10cm for non-circular and non-circular auto(=auto body contouring, ABC_spacing limit 1cm) and applied reconstruction methods by dividing them into Astonish(3D-OSEM with CDR recovery) and OSEM(w/o CDR recovery) to find out the difference in activity recovery depending on the use of CDR recovery. At this time, attenuation correction, scatter correction, and decay correction were applied to all images. For the quantitative evaluation, calibration scan(cylindrical phantom, $^{99m}TcO_4$ 123.3 MBq, water 9293 ml) was obtained for the purpose of calculating the calibration factor(CF). For the phantom scan, a 50 cc syringe was filled with 31 ml of water and a phantom image was obtained by setting $^{99m}TcO_4$ 123.3 MBq. We set the VOI(volume of interest) in the entire volume of the syringe in the phantom image to measure total counts for each condition and obtained the error of the measured value against true value set by setting CF to check the quantitative accuracy according to the correction. Results The calculated CF was 154.28 (Bq/ml/cps/ml) and the measured values against true values in each conditional image were analyzed to be circular 87.5%, non-circular 90.1%, ABC 91.3% and circular 93.6%, non-circular 93.6%, ABC 93.9% in OSEM and Astonish, respectively. The closer the detection distance, the higher the accuracy of OSEM, and Astonish showed almost similar values regardless of distance. The error was the largest in the OSEM circular(-13.5%) and the smallest in the Astonish ABC(-6.1%). Conclusion SPECT/CT images showed that when the distance compensation is made through the application of CDR recovery, the detection distance shows almost the same quantitative accuracy as the proximity detection even under the distant condition, and accurate correction is possible without being affected by the change in detection distance.
Journal of information and communication convergence engineering
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v.8
no.5
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pp.560-565
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2010
In this study, the existence of chaotic characteristics in snoring signals obtained in the form of time series data was checked through quantitative and qualitative analysis methods, and a snoring signal detection system was designed applied with detection algorithms considering diverse parameters of occurring signals in order to enhance the accuracy and reliability of detections and the performance of the system was checked. The system was tested with certain snoring patients and thereby the results as follows could be obtained.
Recently, there have been improvements in diagnostic methods for the assessment of early caries lesions. The reason is that dental professionals are seeking methods to reliably detect incipient dental caries and to remineralize them. This review examines the literature on principles, theoretical background, and history of the Quantitative Light-Induced Fluorescence (QLF) system (Inspektor Research Systems BV, The Netherlands). Furthermore, this paper discusses the potential application of QLF system to clinical practice for educational purpose, enabling dental hygiene students to perform oral health assessment using the QLF system. In addition, the clinical application of QLF system can motivate patients by providing additional visual information about caries and bacterial activity. The evidences on validity and reliability of the QLF system for detection of longitudinal changes in de/remineralization and caries were examined. The QLF system is capable of monitoring and quantifying mineral changes in early caries lesions. Therefore, it can be used to assess the impacts of caries preventive measures on the remineralization and reversal of the caries process. And the QLF system is a very promising equipment to assess educational effectiveness for dental hygiene students in their learning process. In conclusion, the QLF system is the most effective technology for more sensitive staging of caries and treatment without surgical intervention.
Qualitative and quantitative PCR methods were performed to examine detection and quantitation of epsps inserted into genetically modified soybean (GMS) in processed foods, soy milk, tofu, and biji (soybean curd residue). Using PCR amplification to produce two (121 and 330 bp) epsps in GMS, detection limits of GMS in soy milk, tofu, and biji containing 0.01% GMS were measured. For quantitative detection, test samples containing 1, 3, and 5% GMS were measured by real-time PCR method. Results show real-time PCR method is applicable to detect GMS quantitatively in processed foods.
KSII Transactions on Internet and Information Systems (TIIS)
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v.11
no.2
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pp.959-981
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2017
Existing Android malware detection approaches mostly have concentrated on superficial features such as requested or used permissions, which can't reflect the essential differences between benign apps and malware. In this paper, we propose a quantitative calculation model of application risks based on the key observation that the essential differences between benign apps and malware actually lie in the way how permissions are used, or rather the way how their corresponding permission methods are used. Specifically, we employ a fine-grained analysis on Android application risks. We firstly classify application risks into five specific categories and then introduce comprehensive risk, which is computed based on the former five, to describe the overall risk of an application. Given that users' risk preference and risk-bearing ability are naturally fuzzy, we design and implement a fuzzy logic system to calculate the comprehensive risk. On the basis of the quantitative calculation model, we propose a risk classification based approach for Android malware detection. The experiments show that our approach can achieve high accuracy with a low false positive rate using the RandomForest algorithm.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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