The author examined for observing the structures of pyrenoid and cell wall of three strains of Chlorella ellipsoidea and relation of pyrenoid to starch grain formation at the ultrastructure level. 1. The development of pyrenoid of Chlorella species from the time of its initiation and its subdetail sequent activities are described in some pictures. 2. Close correlation between the findings of light microscopy and electron microscopy is proved. 3. The pyrenoid is a dynamic organellae which continues to change its appearance thoughout the development of the Chlorella cell. 4. The starch grains are continously formed by deposition of carbohydrate within the chloroplast with the aid of pyrenoid factors. 5. Some parental starch grains are passed on the daughter cell during cell division. 6. The Da stage cells contain only chlaroplast without pyrenoid matrix. In Da stage a pyrenoid is surrounded by starch and starch grains appear in chloroplast lamellae. In $L_1L_2$ stages, large starch grains of lens form accumulate in cell. In $L_3$ stage pyrenoid disappears for a time and starch grains are scattered. In cell division stage starch grains are divided into four groups. In $L_4$ stage, pyrenoid substance appears temporarily and disappears soon. At this stage the cell is constituted of Dn cell containing chloroplast only. 7. The cellular boundary of JE strain except Y 815 and Y 511 strain contains 250.angs. intermediate layer of unknown chemical composition between the fibrillar cellulose wall and the out capsule layer.
The pyrenoid ultrastructure and distribution of ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (Rubisco) and Rubisco activase in the chloroplasts of Chlamydomonas reinhardtii was studied using the immunogold localization technology with electron microscopy. There were several tubular thylakoids invading in the pyrenoid matrix to form several spokewise channels. The connections between pyrenoid matrix and stroma of chloroplast were the partial of channels. The starch sheath surrounding the pyrenoid was separated into several parts by the connections in transection. Some thylakoids were packed together near the connections in one side of the pyrenoid. Those special structures might be used to transport substance between pyrenoid and stroma of chloroplasts. With the antibody raised against the large subunits of Rubsico from C. protothecoides, the result of the gold immunolocalization of Rubisco in Chlamydomonas reinhardtii showed most of the gold particles heavily labeled the pyrenoid matrix, as well as the starch sheath matrix, and very few in the stroma of chloroplasts. The gold particle density was 880.00 $\pm$ 164.32, 190.00 $\pm$ 152.39 and 9.60 $\pm$ 5.37 ${\mu}m^{-2}$ in pyrenoid matrix, starch sheath and stroma region of chloroplast respectively (background: 5.67 $\pm$ 1.53 ${\mu}m^{-2}$). 99.59% of the total Rubiscos was calculated to be concentrated in the pyrenoid matrix and starch sheath by spatial densities. The gold immunolocalization of Rubisco activase also showed that Rubisco activase was mainly concentrated in the periphery of the pyrenoid and the starch sheath (the density was as high as 229.69 $\pm$ 96.96 ${\mu}m^{-2}$). There were very few gold particles located in the stroma of chloroplasts. These results indicated that pyrenoid surface and starch sheath was the site for Rubisco activation and $CO_2$ fixation, which supported the suggestion that pyrenoids perform photosynthesis function.
Scott , Joseph L.;Baca, Bart;Ott, Franklyn D.;West, John A.
ALGAE
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v.21
no.4
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pp.407-416
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2006
Low molecular weight carbohydrates, phycobilin pigments and cell structure using light and transmission electron microscopy were used to describe a new genus of unicellular red algae, Erythrolobus coxiae (Porphyridiales, Porphyrideophyceae, Rhodophyta). The nucleus of Erythrolobus is located at the cell periphery and the pyrenoid, enclosed by a cytoplasmic starch sheath, is in the cell center. The pyrenoid matrix contains branched tubular thylakoids and four or more chloroplast lobes extend from the pyrenoid along the cell periphery. A peripheral encircling thylakoid is absent. The Golgi apparatus faces outward at the cell periphery and is always associated with a mitochondrion. Porphyridium and Flintiella, the other members of the Porphyrideophyceae, also lack a peripheral encircling thylakoid and have an ER-mitochondria-Golgi association. The low molecular weight carbohydrates digeneaside and floridoside are present, unlike both Porphyridium and Flintiella, which have only floridoside. The phycobilin pigments B-phycoerythrin, R-phycocyanin and allophycocyanin are present, similar to Porphyridium purpureum. The cells have a slow gliding motility without changing shape and do not require substrate contact. The ultrastructural features are unique to members of the Porphyrideophyceae and recent molecular analyses clearly establish the validity of this new red algal class and the genus Erythrolobus.
Two new genera of red algae, Madagascaria erythrocladioides West et Zuccarello and Pseudoerythrocladia kornmannii West et Kikuchi (Erythropeltidales, Compsopogonophyceae, Rhodophyta), were previously described using molecular analysis and confocal microscopy of isolates in laboratory culture. We examined the ultrastructure of both genera to compare with ultrastructure of other members of the class Compsopogonophyceae. Both genera had Golgi bodies not associated with mitochondria and chloroplasts with a peripheral encircling thylakoid similar to all other members of the class studied thus far. Confocal autofluorescence images showed that Madagascaria has a single round central pyrenoid while Pseudoerythrocladia has no pyrenoid. Our electron microscopic work confirms these initial observations. Tables and keys are presented that assist in interpreting cellular details of genera in the class Compsopogonophyceae.
Two siphonous green algae were collected from the eastern coast of Korea. These species share the typical features of Derbesia sporophytes, such as erect and prostrate siphonous filaments and the presence of basal septum in lateral branches. One is characterized by the combined features of a relatively small tufted sporophytic thalli arising from a rhizoidal base, subdichotomously branched filaments with a basal septum and one pyrenoid per subspherical to lenticular chloroplast. The other shows a larger sporophytic thallus, sparsely subdichotomously branched filaments with a basal septum and one pyrenoid per spherical chloroplast. In a phylogenetic tree based on rbcL sequence, the two above-mentioned Korean algae nest in the same clades as Derbesia minima and D. indica, respectively. The genetic distance between the sequences within the clades was 0.5-0.8%, which is considered to be included in the intra-specific range for the genus. These two siphonous Korean algae are identified as D. minima and D. indica, respectively, based on the morphological and molecular analyses. These species are newly recorded in the Korean marine algal flora herein.
The genus Cryptomonas is easily recognized by having two flagella, green brownish color, and a swaying behavior. They have relatively simple morphology, and limited diagnostic characters, which present a major difficulty in differentiating between species of the genus. To understand species delineation and phylogenetic relationships among Cryptomonas species, the nuclear-encoded internal transcribed spacer 2 (ITS2), partial large subunit (LSU) and small subunit ribosomal DNA (rDNA), and chloroplast-encoded psbA and LSU rDNA sequences were determined and used for phylogenetic analyses, using Bayesian and maximum likelihood methods. In addition, nuclear-encoded ITS2 sequences were predicted to secondary structures, and were used to determine nine species and four unidentified species from 47 strains. Sequences of helix I, II, and IIIb in ITS2 secondary structure were very useful for the identification of Cryptomonas species. However, the helix IV was the most variable region across species in alignment. The phylogenetic tree showed that fourteen species were monophyletic. However, some strains of C. obovata had chloroplasts with pyrenoid while others were without pyrenoid, which used as a key character in few species. Therefore, classification systems depending solely on morphological characters are inadequate, and require the use of molecular data.
Rhodomonas (Cryptophyceae) and species assigned to this genus have undergone numerous taxonomic revisions. This also applies to R. marina studied here as it was originally assigned as a species of Cryptomonas and later considered a variation of R. baltica, the type species. Despite being described more than 130 years ago, R. marina still lacks a comprehensive characterization. Light and electron microscopy were employed to delineate a strain from western Greenland. The living cells were 18 ㎛ long and 9 ㎛ wide, elliptical in shape with a pointed to rounded posterior and truncated anterior in lateral view. Two sub-equal flagella emerged from a vestibulum, where also a furrow extended. In transmission electron microscopy, the furrow was associated with a tubular gullet and the pyrenoid embedded in a deeply lobed chloroplast. The chloroplast contained DNA in perforations and was surrounded by starch grains. A tubular nucleomorph was enclosed within the pyrenoid matrix. In scanning electron microscopy, the inner periplast consisted of rectangular plates with rounded edges and posteriorly these were replaced by a sheet-like structure. The water-soluble pigment was Crypto-Phycoerythrin type I (Cr-PE 545). A phylogenetic inference based on SSU rDNA confirmed the identity of strain S18 as a species of Rhodomonas as it clustered with congeners but also Rhinomonas, Storeatula, and Pyrenomonas. These genera formed a monophyletic clade separated from a diverse assemblage of other cryptophyte genera. To further explore the phylogeny of R. marina a concatenated phylogenetic analysis based on the SSU rDNA-ITS1-5.8S rDNA-ITS2-LSU rDNA region was performed but included only closely related species. The secondary structure of nuclear internal transcribed spacer 2 was predicted and compared to similar structures in related species. Using morphological and molecular signatures as diagnostic features the description of R. marina was emended.
We described two brownish freshwater Cryptomonas species, C. marssonii Skuja and C. pyrenoidifera Geitler as first records in Korea. The identification was based on light microscopy, scanning electron microscopy, and nuclear SSU rDNA sequences analysis. Cryptomonas marssonii is characterized by its sigmoid shape with a sharply pointed and dorsally curved antapex, dorso-ventrally flattened cell, two lateral plastids without pyrenoid, and its dimension of 18-25 μm in length and 8-13 μm in width. Cryptomonas pyrenoidifera is characterized by ovoid to elliptical shape with a partially twisted or rounded antapex, dorso-ventrally biconvex cell, lateral plastids with two pyrenoids, and the dimensions of 15-22 μm in length and 10-14 μm in width. Nuclear SSU rDNA sequences between C. marssonii WCK01 from Korea and CCAC0086 from Gernmay, and between C. pyrenoidifera WCK02 from Korea and CCMP152 from Australia were identical, respectively.
Journal of Fisheries and Marine Sciences Education
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v.28
no.6
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pp.1858-1864
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2016
Morphological and molecular information of two marine algae collected from Korea is given. One belonging to a green alga, is characterized by small size up to 4 cm high, much branched thalli on all sides, slender and linear branchlets which is constricted near base, axes without prominent branch scars, chloroplasts with a prominent central pyrenoid. The other, as a brown alga, is distinct from other Korean species in having cylindrical elevated projections at all parts of thallus axis, leaves with slightly serrulate margin together with distinct midrib bearing spines and absence to rarely occurred vesicles. In phylogenetic tree based on rbcL sequences, these two species are nested in the same clade with Bryopsis triploramosa and Sargassum polyporum, respectively. In this study, these two species are newly recorded in the Korean marine algal flora based on the morphological and molecular data.
Kikuchi, Norio;West, John A.;Kajimura, Mitsuo;Shin, Jong-Ahm
ALGAE
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v.21
no.2
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pp.185-191
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2006
The morphology and life history of Stylonema reniforme Kajimura (Stylonematales, Rhodophyta) from Japan were investigated and its taxonomic placement was discussed. This species has 6-30 discoid chloroplasts devoid of a pyrenoid in each cell. This is a typical feature of the genus Goniotrichopsis. The species reproduced only by monospores, which were formed by the direct transformation of the vegetative cells similar to the type species Goniotrichopsis sublittoralis Smith. Goniotrichopsis reniformis (Kajimura) Kikuchi comb. nov. was proposed. The asexual life history of the present species was completed in 3-10 weeks at $15-20^{\circ}C$ in culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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